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RANTES与移植排斥

异体器官移植可引起复杂的炎症反应和特异性免疫应答 ,该反应主要由不同的细胞因子介导 ,在不用免疫抑制剂的情况下 ,通常导致急性移植排斥或移植物损坏。随着研究排斥反应不断深入 ,RANTES引起人们的关注。 RANTES(Ragulated upon Activation Normol T Cell Expressed andSecreted)即调节激活正常 T细胞表达和分泌的细胞因子 ,它是一种趋化因子。趋化因子是一类控制细胞定向迁移的小分子分泌蛋白。至今已发现 4 0多种。在趋化因子的分子中都有4个保守的半胱氨酸 (C) ,根靠近分子氨基酸 (N端 )的前两个 C之间是否插入其他氨基酸 ,将其分为 4个亚类 :C- X-C家族 (插入一个氨基酸残基 ) ,亦称 α类趋化因子 ;C- C家族 (不插入其它氨基酸 ) ,亦称或称 β类趋化因子 ;CX3家族(插入 3个其它氨基酸 ) ;C家族 (N端仅 1个 C)。RANTES属于...  (本文共4页) 阅读全文>>

第四军医大学
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RANTES及其受体拮抗剂在大鼠小肠移植排斥反应中的作用

目的1.掌握大鼠节段性异位小肠移植动物模型的建立方法。2.研究大鼠小肠移植术后不同时段移植肠RANTES的表达与急性排斥反应的关系,探讨RANTES蛋白的表达变化在小肠移植排斥反应早期诊断中的意义。3.研究早期应用Met-RANTES对同种异体大鼠移植肠的影响,探讨趋化因子受体拮抗剂在小肠移植排斥反应中的免疫抑制作用及其与FK506的协同效应。方法1.选用近交系成年雄性SD和Wistar大鼠进行节段性异位小肠移植。实验分5组,每组24只,第1组:非手术对照组(SD);第2组,同基因移植对照组(SD→SD);第3组:异基因移植未治疗组(SD→Wistar);第4组,Met-RANTES治疗组[SD→Wistar+Met-RANTES(200μg·d~(-1),ip)];第5组,Met-RANTES+小剂量FK506治疗组[SD→Wistar+Met-RANTES(200μg·d~(-1),ip)+FK506(0.5 mg·kg~(...  (本文共72页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国协和医科大学
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RANTES与SPARC基因在角膜移植排斥反应中的表达

目的:动态检测细胞趋化因子,激活正常T细胞表达和分泌的调节物(RANTES)和酸性富含胱氨酸分泌型蛋白(SPARC)在异体角膜移植排斥反应中的表达,为角膜移植排斥反应的早期诊断提供依据。方法:首先建立实验大鼠异体角膜移植动物模型,并设同体角膜移植、角膜碱烧伤模型为对照组,在不同时间段提取各组角膜上皮细胞总RNA。用RATENS、SPARC基因引物进行RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)扩增,经琼脂糖凝胶电泳后,采用激光密度扫描半定量RANTES和SPARC mRNA的表达水平。然后对PCR扩增结果中主要条带用限制性内切酶酶切分析,验证表达结果。在取角膜上皮之前,对受试动物进行裂隙灯、活体共聚焦显微镜检查,最后角膜病理,来判断角膜排斥与否和程度。结果:1.正常角膜上皮细胞未见RANTES基因表达,可见SPARC基因的低表达;2.异体角膜移植3天后各时间点均见排斥眼RANTES基因的高表达,同体角膜移植及角膜碱烧伤后未见表达;3.S...  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

新疆医科大学
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大鼠肾移植后肝、心和脑组织中排斥反应相关细胞因子的分子生物学研究

目的:研究肾移植受体大鼠肝脏、心脏和脑组织中排斥反应相关细胞因子的分子生物学变化,探讨肝、心和脑组织损伤在机体排斥反应中的因果关系,为防治肾移植后肝、心、脑组织的损伤奠定基础。方法:首先,通过总结108例临床肾移植成功病例资料,回顾分析对比总体与其中24例发生急性排斥反应后出现肝、心、精神并发症者的发生率有无差异。其次,建立大鼠肾移植动物实验模型。取大鼠70只,随机分为对照组10只、实验组60只(供体30只,受体30只),供、受体均在术前禁食12小时,10%水合氯醛35mg/100g体重腹腔麻醉。在相对无菌条件下实施异体肾移植术,移植后10天手术取出大鼠心肝脑组织。主要观测指标:(1)组织病理学观察肾移植后肝、心和脑组织的镜下变化。(2)应用免疫组织化学技术检测移植肾大鼠的心、脑、肝组织中排斥反应相关的炎症趋化相关因子RANTES、INF-γR、INF-γ的表达;MMP-2、TIMP-2的改变;以及排斥反应所致组织细胞凋亡的相关...  (本文共164页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中科技大学
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RANTES/CCL5天然突变体S24F在心脏移植排斥反应中的作用及机制研究

第一部分RANTES/CCL5天然突变体S24F基因重组腺病毒载体的构建与鉴定目的:构建携带天然RANTES/CCL5突变体S24F基因的重组腺病毒载体,制备能表达S24F蛋白的重组腺病毒,为体/内外干预移植排斥反应奠定研究基础。方法:根据Capoulade-Metay文献报告,按照序列信息通过化学合成法,设计合成目的基因S24F。BamH、EcoRI限制性内切酶对化学合成的目的基因S24F及穿梭载体pAV-MCMV-GFP-3FLAG进行酶切,用试剂盒对线性化的载体片段进行回收。目的基因片段与线性化的载体同源重组,将产物再转化DH5α感受态细胞。用菌落PCR鉴定阳性转化子,阳性克隆送公司测序。对测序对比准确的阳性克隆进行质粒抽提。采用AdMaxTM腺病毒包装系统,将携带S24F基因的腺病毒穿梭质粒pAV-MCMV-S24F-GFP-3FLAG与携带了腺病毒大部分基因组的辅助包装质粒PBHGlox△E1,3Cre共转染HEK29...  (本文共125页) 本文目录 | 阅读全文>>

福建医科大学
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RANTES在大鼠肝肾联合移植排斥反应中的表达及意义

目的1、建立大鼠肝肾联合移植的稳定模型;2、探讨大鼠肝肾联合移植排斥反应中移植物RANTES的表达。方法:将SD大鼠、Wistar 大鼠随机分为正常对照组(A组)、同种同基因移植组(B组)、同种异基因移植组(C组)。应用袖套法建立大鼠肝肾联合移植模型。分别对A组肝肾组织及移植后1、4、7d肝肾组织进行活检,行免疫组化染色,然后进行图像半定量分析,以检测正常及移植肝肾组织中RANTES的表达水平。结果1、成功建立动物模型,存活时间:C组为9-14d, B组90d。2、C组大鼠肝肾组织RANTES分子表达水平显著高于A、B组,且其升高与移植术后的排斥程度呈正相关。结论1、袖套法建立肝肾联合移植模型稳定可靠,Wistar →SD为较理想的研究排斥反应的模型。2、移植肝肾中RANTES的表达可能对诊断肝肾联合移植急性排斥及判断反应的严重程度具有参考价值。  (本文共37页) 本文目录 | 阅读全文>>