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新型戊型肝炎诊断试剂盒的研制及其应用

戊型肝炎病毒(HEV)经胃肠道传播,在我国新疆地区曾爆发流行,全国各地均有散发病例。国际上Genlabs公司推出以基因重组抗原组装的EIA诊断试剂,国内用合成肽作抗原,检测肝炎病人HEV抗体[1~3],但与国外试剂相比灵敏度稍低。为了进一步提高诊断HEV感染的敏感性,我们将HEVORF3合成肽和HEVORF2基因重组抗原混合包被,制备了新型戊肝诊断试剂,对试剂盒的灵敏度、特异性、精密性、稳定性及临床应用进行了系统研究。材料和方法1ORF3多肽抗原多肽抗原合成纯化按文献[1]。2基因重组抗原的制备利用融合蛋白表达载体PGEX-3X表达了戊型肝炎病毒第二读框区(ORF2402~660)优势抗原表位,表达抗原溶于水,可利用商品化的谷胱甘肽Sepharose-4B亲合层析柱得到纯化的抗原(此抗原制备的详细过程另文发表)。3血清标本病人血清来自解放军第302医院住院患者及新疆自治区防疫站。健康人血清来自北京及河北正常人群。4EIA试剂的制...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中华医学信息导报》1998年23期
中华医学信息导报

我国戊型肝炎诊断试剂盒研制成功

传染病报告资料显示,我国每年新发生病毒性肝炎约120万例,其中戊型肝炎约10.3万例,占8.6%。“八五"之前,国内外因无戊型肝炎特异性诊断试剂盒,临床主要用排除法进行粗略诊断。球八五一期间,由北京医科大学牵头、中国预防医学科学院病毒学研究所和新疆维吾尔自治区卫生防疫站参加的((我国戊型肝炎诊断试剂的研制》攻关课题组,经过努力研制成功了戊型肝炎抗体酶联免疫试剂盒、戊型肝炎抗体蛋白吸印法确证试剂盒、戊型肝炎病毒核酸逆转录聚合酶链反应法和套式逆转录聚合酶链反应法试剂盒,并用于戊型肝炎的临床诊断和防治研究,填补了国内空白,取得了良好效益。 一、戊型肝炎抗体酶联免疫试剂盒 课题组应用人工合成和基因重组戊型肝炎病毒多肽为抗原,分别建立了两种戊型肝炎抗体酶联免疫试剂盒。经军事医学科学院微生物学流行病学研究所、北京市卫生防疫站、北京地坛医院和北京医科大学第一临床医院等单位进行的临床考核认为,该试剂盒灵敏度高、特异性好,可用于临床戊型肝炎诊断。...  (本文共1页) 阅读全文>>

东北农业大学
东北农业大学

猪戊型肝炎间接ELISA诊断试剂盒的研制

戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)感染引起的一种急性、自限性疾病。病毒通过粪-口途径进行传播,其爆发和流行主要分布在发展中国家,常因饮用水被污染而引起,散发病例呈全球分布。1997年,第一株动物源性HEV—猪HEV的发现,揭开了动物源性HEV研究的新篇章。其后,各发达国家及印度等国陆续都有猪HEV的相关报道,明确提出HE为一种人畜共患病,已成为各国密切关注的公共卫生问题。本试验应用RT-PCR技术从HEV阳性猪粪便中扩增出ORF2的部分基因片断,大小为681bp,将其克隆于pMD18-T载体经测序分析。将该片段插入pET-32a表达载体,转入大肠杆菌BL21,经0.2mM IPTG诱导得到融合表达蛋白,SDS-PAGE分析证明该分子量为45KD,命名为PET32a-p221。Western blot试验显示PET32a-p221与HEV阳性血清发生反应,具有良好...  (本文共49页) 本文目录 | 阅读全文>>

《畜牧兽医学报》2010年11期
畜牧兽医学报

猪戊型肝炎ELISA诊断试剂盒的研制及应用

戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E Virus,HEV)感染而引起的一种急性、自限性疾病,它是一种人畜共患病,主要经粪—口途径传播。HE主要暴发和流行于发展中国家,在很多发达国家也有发现,散发病例呈全球分布。1997年,美国学者Meng等[1]发现了猪源的HEV,随后,各发达国家[2-3]及印度等国陆续都有猪的相关报道,确定戊型肝炎为一种人畜共患病[4],并成为各国密切关注的公共卫生问题。我国是戊肝主要流行区之一,在我国新疆地区曾暴发流行,全国各地均有散发病例。近几年来,在猪等与人关系密切的动物中陆续发现了HEV感染[5]。伏丽萍等[6]对全国22个省市地区的血清学检测结果进行分析,表明几乎所有被检地区都或多或少存在猪戊型肝炎病毒(SHEV)的污染,个别地区则相当严重,对此应当给予高度重视,应尽快建立有效的针对该病的诊断技术和免疫方法。国内外SHEV的诊断技术大多限于实验室水平,包括...  (本文共7页) 阅读全文>>

《天津医科大学学报》1980年10期
天津医科大学学报

138例戊型肝炎临床研究

138例戊型肝炎临床研究天津市传染病医院肝炎科王震宇天津医科大学总医院魏蔚戊型肝炎病毒(HEV)自1983年被Bal-ayan[1]使用免疫电镜(IEM)在戊型肝炎(HE)病人粪便中检测出以来,已有13年之久,现世界已有27个国家报道有HE,中国已有15个省市自治区报道并且其中7个省市自治区呈暴发或流行[2]。现将我院肝炎科1992年10月至1996年10月期间住院病人中HE临床资料作一分析,以提高临床医师对本病的认识。1资料与方法1.1诊断标准:急性黄疸型、慢性迁延型、慢性活动型、急性重型、亚急性重型、慢性重型及肝硬化,甲、乙、丙、丁、戊型肝炎均按照1990年5月上海第6次全国病毒性肝炎学术会议制订的诊断标准。1.2病例选择:1992年10月至1996年10月期间我科共收治患者1165例,男性896例,女性269例,男女比例为3.331,平均年龄为42.77±11.41岁,其中HE为138例,占11.85%,男性123例,女性...  (本文共4页) 阅读全文>>

《上海畜牧兽医通讯》2007年05期
上海畜牧兽医通讯

动物戊型肝炎研究进展

戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)感染引起的急性病毒性疾病,主要通过粪、口途径传播。戊肝以其水源性暴发流行和急性散发为特点,呈全球分布,是发展中国家的主要问题之一。近年来,在发达国家的发病率也呈上升趋势。历史上先后在东南亚、中亚、中东、北非和西非以及墨西哥等国发生50余次疫情。中国是戊肝的高发地之一,迄今为止已暴发11次,其中以1986年~1988年我国新疆南部地区发生戊型肝炎水型流行最为严重,共计发病119280例,死亡707例,是迄今世界上最大的一次戊型肝炎流行,造成巨大的社会危害和经济损失。人群感染后死亡率在0.5%~3%之间,孕妇感染病情较重,死亡率高达15%~25%〔1~3〕。1997年Meng等〔4〕用ELISA方法证实美国猪中存在HEV抗体并用逆转录巢式聚合酶联反应法(RT-nPCR)检测到猪HEV RNA,从猪体内分离出1株野生型戊型肝炎病毒,与人类HEV具有极高的同源性,后发...  (本文共2页) 阅读全文>>