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Rab27A对人乳腺癌细胞生物学特性的影响

在世界范围内,尤其在西方国家,乳腺癌发病率仍然居于女性恶性肿瘤的首位,死亡率仅次于肺支气管癌而居于第二位。虽然近些年在基础研究及临床诊治方面取得了长足的进步,但仍有35%左右的乳腺癌患者最终死于复发和转移[1]。人们在研究中不断发现新的与肿瘤细胞恶性表型相关的分子,并有一部分被应用于临床来协助诊治及判断预后。也有一些人们熟识的分子有新的功能被发现,如Rab家族就是其中之一。本研究中,我们初步探讨Rab27A在人乳腺癌细胞中的表达及其在细胞增殖、细胞周期分布、凋亡、体外侵袭中的作用。同时我们也进一步探讨了Rab27A在乳腺癌细胞中发挥作用的分子机制,以便能够在乳腺癌的诊治中找到新的突破口。1材料和方法1.1材料1.1.1细胞人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-435均购自美国典型细胞培养库(ATCC)。MDA-MB-435HM是本实验室侯意枫等从MDA-MB-435中通过裸鼠体内连续筛选的办法建立的具有肺...  (本文共5页) 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

Rab27A对人乳腺癌细胞生物学特性的影响及其机制的研究

目的检测人乳腺癌细胞中Rab27A的定位、表达情况,研究Rab27A表达对乳腺癌细胞生物学特性的影响并探讨其作用机制。方法第一部分1、采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,检测Rab27A及相关的Rab家族成员mRNA在四种人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435和MDA-MB-435HM中的表达。2、通过SYBR greenⅠ法实时半定量逆转录聚合酶链反应(semi-quantitativerealtime RT-PCR)和Western blot方法对Rab27A mRNA及蛋白在人乳腺癌细胞中的差异性表达进行半定量。3、应用免疫荧光(immunofluorescence)及激光共聚焦(confocal)扫描成像技术显示Rab27A蛋白在乳腺癌细胞中的定位及与细胞骨架的关系。4、通过RT-PCR扩增...  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>

《郑州大学学报(医学版)》2015年02期
郑州大学学报(医学版)

人脐带间充质干细胞的分离、培养及其肝细胞生物学特性分析

结果:从脐带基质分离出成纤维样细胞形态的h UC-MSCs,CD44表达阳性;RT-PCR结果表明培养的h UC-MSCs表达成熟肝细胞的标志基因ALB、CK18、G6P、GLUL和MET,而不表达TAT,PAS糖原染色呈阳性反应。结论:组织块贴壁培养法可有效获得稳定、均质性良好的h UC-MSCs,其具备部分肝细胞生物学特性。肝细胞移植为肝脏疾病的治疗开辟了一条新的途径,成为原位肝移植技术的一种较好的替代方法或辅助方法[1-3]。此外,肝细胞在基础研究、药物开发、生物人工肝等领域也有较高的应用需求[4-5]。然而,肝细胞来源短缺严重制约着与之相关领域的研究进展,并阻碍了其临床转化应用的进程。该研究从脐带基质中分离获得具有较强增殖能力的间充质干细胞,即人脐带基质来源的间充质干细胞(humanumbilical cord stroma-derived mesenchymal stem cells,h UC-MSCs),检测其部分肝...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国医学工程》2006年04期
中国医学工程

质粒转染对细胞生物学特性的影响

基因转移技术不仅广泛用于实验性研究,而且也是进行基因治疗的主要方法。实现肿瘤基因治疗的关键是基因高效导入和体内使用安全[1]。质粒DNA与重组病毒相比,具有操作简单,可容纳的插入片段大,整合和扩散的危险性小,易于制备等特点,因此质粒作为非病毒类基因载体用于基因治疗的研究也在逐年增多[2,3]。当基因被克隆后,可以通过转染技术将克隆基因导入各种不同类型的细胞内进行分子生物学方面的研究和实施基因治疗。由于转染DNA在宿主细胞染色体内整合具有随机性,转染后的细胞与转染前细胞在生物学特性方面有时会产生很大的差异。由于空质粒载体转染常被用来进行实验对照[4,5],但其自身对细胞生物学特性的影响研究尚少。本实验通过表达质粒DNA稳定转染,分析了质粒DNA转染对乳腺癌细胞系生物学行为的影响。1材料及方法1.1主要材料人乳腺癌细胞系T47D来源于美国典型培养物保藏中心(ATCC),细胞在含10%胎牛血清的RP-MI1640培养液中培养。转染试剂...  (本文共4页) 阅读全文>>

《基础医学与临床》2008年02期
基础医学与临床

三氧化二砷对多发性骨髓瘤细胞生物学特性的影响

近年来,我国率先开展的As2O3治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的实验和临床研究已经引起国际肿瘤学界的广泛兴趣。在普遍证实静脉注射As2O3可有效诱导复发性APL患者症状缓解的同时,发现一定浓度的As2O3对实体瘤亦有治疗作用[1]。据此,将As2O3试用于难治性、复发性多发性骨髓瘤(MM)的治疗,已取得一定疗效,但其作用机制尚不清楚,并且有相当的药物不良反应。为了探讨其作用的分子机制,本研究以骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞为实验对象,观察As2O3对RPMI8226细胞的增殖、杀伤及促凋亡效应的影响,进而探讨上述效应过程与死亡受体DR4、DR5的信号传导关系。期望为临床合理应用As2O3治疗MM提供实验依据。1实验1.1主要材料As2O3(1 g/L)(哈尔滨伊达药业有限公司),以PBS配制成浓度为1 mmol/L的储存液,使用前稀释至工作浓度。抗坏血酸0.4 g/L(西安利君制药股份有限公司)。四甲基偶氮唑蓝(MTT)(...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国实验血液学杂志》2019年02期
中国实验血液学杂志

miR-155在弥漫大B细胞淋巴瘤组织中的表达及其对细胞生物学特性的影响

IPI评分:0-2分27例;3-5分49例。同期,选取因淋巴结反应性增生(LNRH)就诊患者40例作为对照组,其中男性25例,女性15例,平均年龄(56.72±13.57)岁。取DLBCL和LNRH患者组织标本。本研究通过医院伦理委员会批准,所有患者均知情同意。试剂与仪器总RNA提取试剂(TRIzol法)和Lipofectamine2000试剂购自美国Invitrogen公司,逆转录和PCR试剂盒购自美国Promiga公司,miR-155和U6引物由上海生工生物公司设计合成,人体DLBCL细胞株DB购自美国ATCC,胎牛血清、胰蛋白酶和RPMI 1640培养液购自美国Sigma公司,噻唑蓝(MTT)试剂购自上海恒远生物科技有限公司,二甲基亚砜(DMSO)购自上海徕创生物科技公司,Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒购自南京恩晶生物科技有限公司,Transwell小室购自美国Corning公司,Matrigel基质胶和...  (本文共7页) 阅读全文>>

《中国综合临床》2004年10期
中国综合临床

急性微分化型白血病细胞生物学特性与疗效分析

急性微分化型白血病 (minimallydifferentiateda cuteleukemia ,AML M0 )是一种少见的急性髓细胞白血病亚型。目前国内报道甚少 ,我们对近 5年来发现的 10例AML M0 的细胞生物学特性及疗效进行回顾性分析如下。1 资料与方法1.1 一般资料  10例AML M0 患者为苏州大学附属第一医院和河南省肿瘤医院血液科初治住院患者。男 6例 ,女 4例 ;年龄 30~ 5 6岁 ,平均 4 3.6岁。1.2 免疫表型 治疗前抽取骨髓标本 3ml,应用直接双标免疫荧光法检测细胞表面抗原。所用单克隆抗体T系列为CD2、CD3、CD7;B系列为CD10、CD19、CD2 2 ;髓系列为CD13、CD14、CD33;干、祖细胞单抗为CD34。胞浆内髓过氧化物酶 (MPO)需经固定、打孔 ,然后标记。应用EPICS XL型流式细胞仪 (Beckman Coulter ,USA) ,激发光为 4 88n...  (本文共2页) 阅读全文>>