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水稻花器介导法转目标基因的研究

水稻纹枯病和稻瘟病是水稻的主要病害。实践证明 ,选育抗病品种是防治病害最经济有效且又安全的措施。但目前优质、高产、抗稻瘟病、抗稻纹枯病四者相结合的水稻品种少有。水稻转基因技术是改良水稻 ,创造新种质资源的有效方法之一。近年用于水稻转化的方法大多为基因枪法、农杆菌介导法、花粉管通道法 (花器介导法 ) ,但因花粉管通道法的影响因素复杂 ,并且多数报道未提供令人信服的分子证据 ,所以学术界 ,特别是国外学者对花粉管通道转化法持怀疑甚至否定的态度。为完善花粉管通道介导转化体系 ,我们于 1998~ 2 0 0 2年 ,在用几丁质酶基因转入水稻的同时 ,研究了相关因素对花器介导法转目标基因的影响。1 材料与方法1.1 植物转化质粒 pBG1112 (含细菌几丁质酶基因SchiA )和 pBG112 1(含烟草几丁质酶基因TchiB)将细菌几丁质酶基因SchiA和烟草几丁质酶基因TchiB分别连上CaMV35S启动子和Nos终止区 ,构建...  (本文共5页) 阅读全文>>

湖南大学
湖南大学

基于目标基因的人类miRNA之间功能相似性计算方法研究

microRNA(miRNA)是一类重要的内源性非编码小RNA分子,它可以在后转录水平通过绑定目标mRNA的3'非翻译区来调控基因的表达。由于miRNA参与了许多重要的生物过程,所以miRNA与许多重要疾病甚至癌症有关。识别人类miRNA的功能有助于开发出新的疾病诊断与治疗的药物。然而迄今为止,虽然成千上万的miRNA被识别出来,但是大部分miRNA的功能仍然是未知的。高通量技术的发展积累了大量的可利用数据,为研究者们计算人类miRNA之间的功能相似性、预测miRNA的功能提供了可能,针对现有方法的不足,本文基于目标基因提出了两种方法用于计算人类miRNA之间的功能相似性。对于编码基因而言,其功能相似性可以基于它们的序列、表达相似性或者基因本体(Gene Ontology,GO)注释计算,其中基于GO注释的方法往往取得更好的实验效果。随着基因GO注释信息的快速积累,通过目标基因GO注释信息来计算miRNA之间功能相似性的办法是切...  (本文共60页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国疫苗和免疫》2012年05期
中国疫苗和免疫

百日咳鲍特菌双目标基因荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立及应用

百日咳是由百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)引起的一种严重急性呼吸道传染病,人群普遍易感,尤以婴幼儿多见。近年来百日咳发病率有上升趋势,局部地区出现爆发或者流行,被称为百日咳再现[1-2]。值得注意的是,已接种疫苗的青少年和成人患百日咳的人数逐渐增多,其临床症状并不典型,其流行病学特征也发生了改变[3],因此进行百日咳监测显得非常重要。本研究应用百日咳鲍特菌重复插入序列(Insertion Sequences,IS)481、IS1002双目标基因,结合羧基荧光素与小沟结合集团(5-Carbaxy Fluorescein-Aminohexyl Amidite-Minor Croove Binder,TaqMan-MGB)荧光探针标记技术,建立了百日咳鲍特菌双基因荧光定量聚合酶链反应(Polymease Chain Reaction,PCR)检测方法,现将结果报告如下。材料与方法1菌株和临床标本菌种百日咳鲍特菌...  (本文共4页) 阅读全文>>

《化学分析计量》2014年04期
化学分析计量

日发现新材料可瞬间检测出目标基因

目前基因检测的常用方法是从血液中提取DNA,并对可能含目标基因的DNA片段进行复制,以找出目标基因。但DNA片段的复制需要几小时甚至几十个小时,并容易出现误差。名古屋大学科研人员开发出的新材料由不到1 mm2的玻璃基板和上面如枞树叶般密布的金属丝组成。只需让一滴血流经这种新材料,DNA链就会分解成碎片,其中含目标基因的片段会和金属丝所含溶液中特定的荧光色素发生反应,从而被检测到。如果这项新技术能投入实际应用,那么细菌引起...  (本文共1页) 阅读全文>>

《国外医学.遗传学分册》1990年03期
国外医学.遗传学分册

递减杂交法分离和筛选目标基因

分子生物学研究表明哺乳类至少有十万个基因的活性表达I‘]。它们决定着生命的基本活动。截止到1988年,已发现的单基因遗传病和遗传性状有4 344种,分离和定位的基因和致病基因分别是1 457和415个仁2]。从众多的基因群体中逐个分离和筛选出决定具体的遗传病基因(目标基因),将它们对号入座,仍然是一个相当艰巨的任务。现已发展起来的分子的、细胞的、免疫的和酶学的方法正以每年分析和定位100~200个基因的速度建设着这一巨大的工程〔3]。其中,分子生物学的方法最令人瞩目。许多新方法、新技术被引入和应用到这个领域,这必将加速人们分离和筛选基因的进程。本文就将新近发展起来的分子递减杂交法分离和筛选目标基因加以综述。 递减杂交(subtraetive hybridizati-。n)的基本原理是用单链或变性的双链驱动nNA或RNA(driver一nNA或RNA)与目标DNA(target DNA)在一定条件下混合杂交,选择性地分离并除去驱动...  (本文共4页) 阅读全文>>

《分子植物育种》2009年03期
分子植物育种

转基因玉米目标基因纯合体快速准确的PCR鉴定方法(英文)

Genetically modified crops have been approved worldwide. The most successful and effective trans- genic traits thus far are herbicide tolerance and insect resistance (Jauhar, 2006). Transgenic maize events with insect resistance such as Bt11, Event176, MON810, MON863 and TC1507 are widely used in the US. Her- bicide tolerance is conferred by 5-enolpyruvlyshiki- mate-3-phosphate synthase gene (EPSPS) isolated from the...  (本文共5页) 阅读全文>>