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W316bp探针鉴定高、低产王浆西蜂DNA分子特异标记的研究

W 31 6bp是不同三品系高产浆西蜂 (浙农大、平湖及萧山意蜂 )的基因组DNA以随机引物W通过RAPD PCR扩增获得的一个共同的特异DNA片段[1] ,它只出现在高产浆的浙农大、平湖、萧山意蜂的DNA多态性图谱中 ,而在低产浆的喀尼阿兰西蜂的DNA多态性图谱中没有出现。为了进一步弄清W 31 6bp与产浆高、低西蜂的遗传关系 ,用地高辛作标记物 ,将W 31 6bp制备成DIG(digoxigenin) W31 6探针 ,然后用DIG W 31 6bp探针分别与高产浆的浙农大、平湖及萧山意蜂和低产浆的喀尼阿兰西蜂的RAPD PCR扩增产物进行Southern杂交 ,同时还与它们的基因组DNA进行斑点杂交 ,以此探讨鉴定W 31 6bp特异片段与高产浆西蜂优良性状基因的相关性。1 材料与方法1 .1 材料1 .1 .1 样品来源( 1 )W 31 6bp为浙农大、平湖、萧山意蜂等三品系西蜂的RAPD PCR扩增产物。( 2...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国养蜂》2001年03期
中国养蜂

高产王浆西蜂的DNA特异标记——W316bp片段的研究

20世纪 90年代初由Welsh和Williams[1,2 ] 两个研究小组同时提出的RAPD -PCR技术是近年来发展起来的一种以PCR扩增为基础的新标记技术。它是用一系列人工合成的寡聚核苷酸单链 (通常为 9— 1 0bp)为引物 ,对所研究基因组DNA进行PCR扩增 ,获得基因组DNA的多态性图谱[3 ] 。本文采用RAPD PCR技术 ,在分子水平上对高、低产蜂王浆的西蜂 (以老美意产浆量为 1 0 0 % ,喀尼阿兰蜂为 80 % ,浙农大意蜂、平湖意蜂及萧山意蜂产浆量均为 2 0 0~ 30 0 % )进行基因组DNA的多态性分析 ,找出与高产王浆蜂相关的DNA特异标记。1材料与方法1 1材料1 1 1样品来源喀尼阿兰蜂 ( 1 1代 )、浙农大意蜂 ( 5代 )、平湖意蜂( 6代 )、萧山意蜂 ( 5代 ) ,四品系西蜂的工蜂蛹均由吉林省养蜂科学研究所提供。“代”是指原种繁育的后代。1 1 2主要试剂引物...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国养蜂》2001年04期
中国养蜂

地高辛标记DNA分子中W316bp特异片段成探针的研究

探针是带有标记的特定的DNA(或RNA)片段 ,是分子杂交的重要工具。制备探针的方法有 :限制性消化法制备探针、缺刻转移法制备探针、随机引物标记法制备探针[1] ,标记物可采用放射性物质 (γ 3 2 P)和非放射性物质 (生物素、地高辛、荧光素等 ) [2 ] ,利用探针的核酸杂交可鉴定特定的基因或转录产物。W 3 1 6bp是不同三品系高产浆西蜂 (浙农大、平湖及萧山意蜂 )的基因组DNA以引物W通过RAPD PCR扩增得到的高产浆西蜂共同的特异片段 ,它只出现在高产浆的浙农大、平湖、萧山意蜂的DNA多态性图谱中 ,而在低产浆的喀尼阿兰西蜂的NDA多态性图谱中并不出现。本文以地高辛配基作标记 ,采用随机引物法将W3 1 6bp制备成探针。此法具有敏感、快速、安全等优点。利用W 3 1 6bp探针可进行斑点杂交、Southern杂交 ,以此区别高、低产王浆的西蜂。1 制备探针基本原理以W 3 1 6bp片段作为模板 ,变性后能...  (本文共3页) 阅读全文>>

《蜜蜂杂志》2002年08期
蜜蜂杂志

优良浆意蜂DNA分子特异标记(W316bp)的鉴定研究

每个物种的特性是由它一套与众不同的脱氧核糖核酸 (DNA)所保持。例如蜜蜂的中、西蜂之间的差异是由不同种的DNA分子的差异所致 ;西蜂的亚种及品系之间差异也是由它们的不同DNA分子的差异所造成的 ;不同优良性状的蜜蜂也是由于DNA分子的变异而建立的。因此不同种 ,不同亚种 ,以及不同品系均是由于DNA分子差异所引起的 ,所以从DNA分子水平分析 ,均属于分子遗传学分析[1] 。采用以人工设计的随机引物聚合酶链反应(AP -PCR)分子生物学技术[2 ] ,从西蜂两亚种(喀尼阿兰和意蜂 )的DNA基因组进行随机引物扩增 ,建立DNA多态性图谱的方法称随机引物扩增多态性DNA (RAPD)分析[3] ,分别制备了两亚种西蜂的DNA多态性图谱。在经过 11种 (P1,P2 ,P3,P4 ,P5 ,P6 ,P7,P8,P9,K以及W等 )随机引物筛选的DNA多态性图谱中 ,发现意蜂三品系 (浙农大、萧山、平湖 )以W (5′ -CGGC...  (本文共2页) 阅读全文>>

《生物技术》2003年04期
生物技术

正、反杂交二西蜂及其父、母本DNA基因组的多态性研究

松丹一号与松丹二号均是 4种不同的纯种西蜂 (珲春、卡尼阿拉、平湖、老美意 )杂交蜂。松丹一号杂交蜂是以珲春、卡尼阿拉西蜂为父本 ,以平湖、老美意西蜂为母本杂交而成 ;而松丹二号杂交蜂是以珲春、卡尼阿拉西蜂为母本 ,以平湖、老美意西蜂为父本反杂交而成。本文采用RAPD -PCR技术分析了两种杂交西蜂的DNA基因组的多态性 ,结果发现松丹一号与松丹二号的DNA基因组多态性图谱有较大的差异 ,并与它的母本、父本比较也有各不相同的差异。1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 样品 :珲春 (HuichunApisL)、卡尼阿拉 (CarnicaApisL)、平湖 (PinghuApisL)、老美意蜂 (LaomeiApismelliferaL .)工蜂蛹及雄蜂蛹和正杂交松丹一号、反杂交松丹二号西蜂的工蜂蛹样品均由吉林省养蜂科学研究所提供。1.1.2 主要试剂 :随机引物W :5’ -CGGCCCCGGT - 3’(由上海生工生物工程...  (本文共2页) 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

从西蜂DNA分子中寻找与高产王浆相关的特异基因标记及其鉴定

本研究以11组随机引物(P_1、P_2、P_3、P_4、P_5、P_6、P_7、P_8、P_9、K、W)对不同产浆量的四品系西蜂(低产浆:喀尼阿兰蜂;高产浆:浙农大、平湖及肖山等意蜂)的基因组DNA进行RAPD—PCR遗传分析。以W(5’-CGGCCCCGGT-3’)为随机引物通过RAPD—PCR扩增技术从西蜂的不同三品系(浙农大、平湖和肖山等意蜂)的DNA分子中获得了与高产浆相关的共同特异基因标记—W316bp片段,用非放射性标记物—地高辛(DIG),使用随机引物标记法,制备成DIG-W316bp探针,再与高、低产浆西蜂的基因组DNA及PCR扩增产物分别进行斑点杂交及Southern杂交鉴定。结果:(1)以W为引物,在高产王浆的浙农大、平湖、肖山等三品系意蜂的基因组DNA的扩增产物中找到了与高产浆优良性状相关的特异基因标记——W316bp片段。(2)然后将W316标记成DIG-W316bp探针,再与高、低产王浆西蜂的DNA基因...  (本文共56页) 本文目录 | 阅读全文>>