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孕激素对人成骨样细胞膜型基质金属蛋白酶-1表达和明胶酶-A激活的影响

人成骨样细胞系MG 63购自美国培养物保存中心 (ATCC号 :CRL 1 42 7) ,用无酚红的MEM培养液 (Sigma公司 )培养 ,其中含 1 0 %胎牛血清 (FBS ,Gibico公司 ) ,青霉素 5 0U/ml,庆大霉素 5 0 μg/ml。3d换液 1次 ,达汇片后按每瓶 5× 1 0 5 细胞接种至2 5cm2 培养瓶。  二、细胞干预试验  MG 63细胞培养于 2 5cm2 培养瓶中 ,在含1 0 %FBS的上述培养液中培养 2d ,换 1 %FBS培养液培养 4d ,含 0 2 5 %牛血清白蛋白 (BSA ,Sigma公司 )的无血清MEM培养 2d ,用 0 (含 0 2 5 %BSA的无血清MEM)、1 0 - 1 0 、1 0 - 9、1 0 - 8mol/L孕酮 (Sigma公司 )干预 48h。收集培养液行酶联免疫吸附(ELISA)测定、Western杂交和明胶酶谱分析 ;参照分子克隆...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国肿瘤临床与康复》2001年04期
中国肿瘤临床与康复

肺癌患者明胶酶A基因表达的研究

向周围组织浸润是恶性肿瘤的典型特征 ;对细胞外基质的溶解是肿瘤细胞向外扩散的基础。近来的研究表明基质金属蛋白酶 (Matrixmetalloproteinases ,MMPs)在肿瘤溶解细胞外基质向外侵袭中发挥了重要作用。明胶酶A(gelatinaseA ,MMP2 )是基质金属蛋白酶的一种 ,它在乳腺癌、前列腺癌及结肠癌中的表达已有报道[1、2 ] 。我们用逆转录定量PCR方法研究了肺癌患者明胶酶A基因表达的情况 ,结果表明肺癌明胶酶A基因表达增强。材料和方法一、研究对象 肺癌患者 19例 ,男 12例、女 7例 ,平均年龄 6 3± 11岁。所有患者均术中取癌组织及正常组织各一块 ,迅速投入液氮 ,在标本留取一周内行RNA提取。癌组织经病理检查确诊。二、试剂 总RNA提取试剂盒 (TotalRNAIsola tionSystem)、AMV逆转录酶、RNA酶抑制剂、Olig(dt)15Primers、Tg酶、PCRMarker...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中华口腔医学杂志》2002年06期
中华口腔医学杂志

颞下颌关节盘前移位和盘穿孔滑液明胶酶测定及临床意义

明胶酶为基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinases ,MMPs)家族中重要成员 ,主要降解细胞外基质 (extracellularmatrix,ECM )。我们对正常、可复性盘前移位 (anteriordiscdisplacementwithreduction ,ADDwR)、不可复性盘前移位(anteriordiscdisplacementwithoutreduction ,ADDw/oR)及关节盘穿孔 (discperforation ,DP)关节液明胶酶含量及其活性进行测定 ,结合TMD病理类型分析探讨其在TMD中的作用。1 .材料和方法 :① 65例TMD患者 80侧TMJs,分为 :ADDwR组、ADDw/oR组和DP组。 1 5名志愿者 1 5侧无症状TMJ为对照组。关节滑液取自关节上腔。②用酶谱法及HPIAS 1 0 0高清晰度彩色病理图文分析系统读取明胶酶条带面积和灰度 ,根据公式 :条带...  (本文共1页) 阅读全文>>

《中国肿瘤临床与康复》2002年04期
中国肿瘤临床与康复

肺癌患者明胶酶B基因表达的研究

恶性细胞的典型特征是其侵袭外周组织 ,在远隔器官形成转移肿瘤的能力。肿瘤细胞通过已存在的或新形成的结合位点与细胞外基质结合 ,进而溶解细胞外基质 ,最后经细胞外基质的缺损处向外扩散。近来的研究表明基质金属蛋白酶 (Matrixmetalloproteinases,MMPs)在肿瘤溶解细胞外基质向外侵袭中发挥了重要作用。明胶酶B(gelatinaseB ,MMP9)是基质金属蛋白酶的一种 ,它在皮肤鳞癌及结肠癌中的表达已有报道[1,2 ] 。我们用逆转录定量PCR方法研究了肺癌患者明胶酶B基因表达的情况 ,结果表明肺癌明胶酶B基因表达增强。材料和方法一、研究对象 :肺癌患者 4 6例 ,男 30例、女 16例 ,平均年龄 6 6± 13岁。所有患者均术中取癌组织及正常组织各一块 ,迅速投入液氮 ,在标本留取一周内行RNA提取。癌组织经病理检查确诊。二、试剂 :总RNA提取试剂盒 (TotalRNAIsolationSystem)、...  (本文共2页) 阅读全文>>

《河北医科大学学报》1980年60期
河北医科大学学报

大鼠不同年龄和组织中明胶酶活性的比较研究

近年来研究发现,基质金属蛋白酶(matrixmetaloproteinase,MMP)家族与细胞迁移和增殖密切相关。明胶酶是MMP家族成员之一,包括明胶酶A(MMP2)和明胶酶B(MMP9)两种成员,两者均以酶原形式分泌,对应分子量分别为72KDa和92KDa或95KDa,活化后前者分子量为68KDa、66KDa或62KDa,后者分子量为88KDa或85KDa。明胶酶的底物包括明胶、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和纤连蛋白。在体内明胶酶可高效降解基底膜的主要结构成分-Ⅳ型胶原,对血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecel,VSMC)穿过细胞外基质(extracelularmatrix,ECM)进行迁移和增殖尤其重要,因而与许多心血管疾病,如动脉粥样硬化(artherosclerosis,As)、血管再狭窄等有关。探讨明胶酶在不同年龄和组织中的活性变化,是深入研究明胶酶活性改变的生理及病理意义的必要前提。鉴于此,本实验用...  (本文共2页) 阅读全文>>

《明胶科学与技术》1988年04期
明胶科学与技术

明胶文摘

CA 1 986,1 04(1)3376d 钙离子对明胶醉促水解的影晌 Hoshino,Yasuo;Satoh,Toshio: Agrje.Biol.Cheo.1955,49(11), 3 331一2(英). (3株受试菌种的)红假单胞菌酶明胶酶(Rhodopseudomonas gelatinosa)在化学组成确定的培养基(S介质)中水解明胶,条件分为含(0.02肠)CaZ令和不含Ca么斗的两种。实验表明,CaZ+离子对该酶水解无影响。相反,所有的红假单胞菌酶茹果酶(Rhodopseudomonao capoul。扭)菌株只有在Ca“+离子存在时才能使明胶水解,尽管它们对电解质的耐受性还弱于R一明胶酶。因此,在缺乏CaZ+离子的培养基中,用明胶水解的试验方式可以区别这两种酶菌株。 CA 1 986,104(2)10537k 新设计的化学内陷荆“G.T.xl-ADM,, Sugitaehi,Akto;Takatsuka,Yuic...  (本文共5页) 阅读全文>>