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快速盐析法提取DNA在HLA基因分型中的应用

肾移植供受者HLA基因水平的配型是提高移植物长期存活率的关键性因素,而模板DNA提取的质量和速度又是影响基因配型在临床移植应用的主要因素之一。为此,我们在建立顺序特异引物聚合酶链反应方法(PCR-SSP)用于快速HI,A-DR基因分型[’]的同时,对采用快速盐析法和标准酚氯仿法提取肾移植供受者尤其是供者不同组织来源的样本模板DNA进行了同步对比研究,取得满意结果。报告如下。材料与方法一、样本来源与处理二()全血样本:肝素抗凝血l~Zml,离』L(1000r/min)5分钟后吸取白细胞层加入10ml红细胞溶解波,洗涤两次备用。如血样本较多(3~sml)则用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞备用。(2)DNA提取:淋巴细胞毒交叉试验剩余的淋巴细胞,可直接用于DNA提取。(3)脾组织:24/h时内新鲜牌组织sg(或一ZO”C长时间冷藏脾组织IOg),剪成碎片(越细越好),加生理盐水20~30ml,加入淋巴细胞分离波,离心(ZO0r/min)I...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国科学C辑:生命科学》1996年03期
中国科学C辑:生命科学

滇金丝猴的随机扩增多态DNA与遗传多样性分析

滇金丝猴(Rhinophithecus bieti)是一种外形惹人喜爱的重要珍稀野生动物.它具有深灰色体毛和红色嘴唇,以及扁平的鼻子,生长在高山雪地森林中,主要以苔薛和地衣为生l’].1879年Mime-Edwards首先报道滇金丝猴的存在,其后的将近一个世纪中动物学家一直不能证实是否存在活的滇金丝猴,直到1962年,Peflg等发现了一些滇金丝猴的毛才证实了滇金丝猴的存在. 通常人们所知的有四种金丝猴(Rhinopithecus属),滇金丝猴(R.bicti)被认为是其中最进化的一种[2].然而不幸的是,目前滇金丝猴的数量仅为 2 000只左右,并且其分布也仅限于云南西北部及相邻的西藏境内针叶林内,滇金丝猴由于其狭窄的分布和群体数量少正面临着濒临灭绝的境地12] 在过去的几十年里,对滇金丝猴的研究主要集中于形态学,解剖学,种系发生学和生态学方面.对于群体的遗传结构和特点,例如,近交系数等了解得非常少.研究滇金丝猴的遗传多样性以...  (本文共6页) 阅读全文>>

《遗传》1996年06期
遗传

三例氨基糖甙类抗生素致聋患者的线粒体DNA测序分析

氨基糖忒类抗生素(Aminoglycos饲cAnt山iotics,,AmAn)是临床上应用较广泛的一类抗生素。主要有庆大霉素、卡那霉素、新霉素、硫酸链霉素和双氢链霉素等.虽然早在五十多年前人们就已发现这些药物会导致神经性耳聋并对前庭和肾脏有毒性作用(”,但由于AmAn在治疗革兰氏阴性菌感染上效果较好,卡那霉素与庆大霉素不易引起机体的过敏反应及广大农村的医疗卫生特点,AmAn在临床上仍广为使用,因此,许多儿童将遭受这类药物副作用的危害。七十年代以来,AmAn耳中毒已成为致聋的主要原因,占我国聋哑患者的66%左右。每年约增加2万名新生儿患者问’.有关这些药物键性作用的分子机理及疾病的传送方式长期以来一直不甚清楚,1993年,PfeZ。lit等”’‘人通过对3个*m*n致芒家系的研究,首次报道公者与线粒体**A突变有关。为了解此病的发生奠定了基础。我们应用**R扩增产物直接对分别来自3个有AmAn致聋家族史的二名患者的线粒体**A进行...  (本文共3页) 阅读全文>>

权威出处: 《遗传》1996年06期
《中华妇产科杂志》1960年40期
中华妇产科杂志

葡萄胎的DNA指纹及其与恶变的关系

葡萄胎的DNA指纹及其与恶变的关系张小为张丽珠周羡梅顾玲芬摘要:目的:研究葡萄胎的DNA来源及其与临床转归的关系。方法:41例葡萄胎标本主要采自北京地区,以吸宫术后8周血hCG高于正常为恶变标准。用Jeffreys探针33.15与这41例葡萄胎标本及夫妇双方血DNA的HinfI限制性片段作Southern吸印杂交,获得DNA指纹,经过对比分析,判定葡萄胎的DNA来源。结果:32例标本获得了清晰的DNA指纹图谱,其中DNA完全来自父源者21例,恶变6例,占28.6%(6/21);DNA来自双亲者11例,均无恶变。结论:DNA完全来自父源与来自双亲的葡萄胎相比较,其恶变风险的差异有显著性(P<0.05)。关键词葡萄胎DNA指纹法病理学TheStudyofDNAFingerprintofHydatidiformMolesandtheClinicalOutcomeZhangXiaowei,ZhangLizhu,ZhouXianmei,e...  (本文共3页) 阅读全文>>

《Journal of Northeast Forestry University》1996年01期
Journal of Northeast Forestry University

RFLPs IN INTERNAL TRANSCRIBED SPACERS OF RIBOSOMAL DNA FROM THREE SPECIES OF TILITIA

ManyTilletiasPeciesareAnPohanplantpathogenswithworldwidedistribution.TilletialaevisKuhnandrtrihei(Bjerk.)Winter,tkatincitecommonbuntdiseaseofwheat,andTcontroversaKuhn,whichincitesdWatbuntdiseaseofwheat,arecloselyrelatedfilamen-todsbasidiomvcetCs.TcontroversaislistedasquarantinePestbysomeunepidedriccountriesbecauseofitsscriJusdamapeanddifficulty'tocontfol.Tlael,:,withnoreticulationontelio-sPOrewall,isdistinctmorpholog...  (本文共3页) 阅读全文>>

《广东蚕业》1996年02期
广东蚕业

家蚕微孢子虫保存株DNA的特异性扩增

日本从1900年起,家蚕母蛾的微抱子虫病检测即成为法定义务,该法的基本原理是:根据PASTEUR(1870)发现的使用组织中无抱子的母蛾产的卵。该法行之有效。因微抱子虫病造成的产量损失几乎保持为零。但是,蚕种生产中,二小部分母蛾在微抱子虫病检查时,发现其组织中仍包含有抱子。这些抱子部分看来系家蚕微抱子虫(引起微抱子虫病的一种病原Nb),另一部分为其它抱子虫类(Fujiwara,1980;Fujiwara等,1985)。一种从草地贪夜蛾中分离的微抱子虫(Iwano和lshihara,1 991)Nose,,:a SP.与Nb在抱子大小、极丝结构、营养增殖及在家蚕幼虫中的感染部位和抱子表面抗原与Nb保存株NIS一001抱子的单抗抗体的免疫反应都相似,但接种后使家蚕幼虫致死的数量不同,因而,我们相信该微抱子虫为一株家蚕微抱子虫(Nb,Sd一NU一Iw8401)。该株系虽然在草地贪夜蛾中流行,形成高的致病率,但它也可能感染蚕种生产中的家...  (本文共5页) 阅读全文>>