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原发性膀胱移行细胞癌p16基因缺失突变的研究

为探讨p16基因在膀胱移行细胞癌(TCC)中的改变,我们采用多聚酶链(PCR)和多聚酶链单链构象多态性(PCRSSCP)方法对人原发性膀胱移行细胞癌标本p16基因缺失和突变进行了研究。材料与方法1.标本来源:38例经病理检查证实的原发性膀胱TCCs和9例正常膀胱粘膜标本获于武汉大学中南医院泌尿外科手术。标本于-70℃冰箱速冻保存,以供提取DNA。2.DNA提取及PCR方法建立:组织DNA提取依常规方法进行。正常膀胱粘膜DNA作对照,3磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因作内对照(表1),扩增p16基因2个外元,即外元1和外元2。引物设计见表1。反应体系50μl,模板DNA0.2μg,MgCl21.5mmol/L,KCl50mmol/L,Tris·Cl10mmol/L,dNTP0.2mmol/L,每对引物各20pmol/L,混匀后液体石蜡覆盖在2400型基因扩增仪(GeneAmpPCRsystem2400,美国PerkinElmer...  (本文共2页) 阅读全文>>

《解放军医学杂志》2001年06期
解放军医学杂志

金属蛋白酶及其抑制剂与膀胱移行细胞癌浸润转移的关系

基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )是一种锌离子依赖性蛋白水解酶 ,其主要作用底物是基底膜的Ⅳ型胶原和层粘连蛋白。组织金属蛋白酶抑制剂 2(TIMP 2 )能特异的同MMP 2及其前体结合并抑制其活性[1] 。本研究应用RT PCR和免疫组织化学方法检测人膀胱移行细胞癌及癌旁组织MMP 2和TIMP 2的mRNA及蛋白表达水平 ,以探讨其在膀胱移行细胞癌侵袭和转移过程中的意义。1 材料与方法1 1 材料随机选取兰州军区兰州总医院保存的膀胱移行细胞癌组织标本 61例 ,其中 2 3例带有癌旁组织。男性 54例 ,女性 7例 ,患者年龄 17~ 82岁 ,平均 59.3岁。1 2 方法1 2 1 MMP 2及TIMP 2mRNA表达水平测定 所有标本采用一步法[2 ] 提取组织总RNA。RT PCR反应混合物为 30 μl体系 ,包括RT PCR酶混合物 2 .0 μl (华美生物工程公司 )、引物 30 pmol及相应缓冲液...  (本文共3页) 阅读全文>>

《实用肿瘤杂志》2001年03期
实用肿瘤杂志

膀胱移行细胞癌p21WAF1/CIP1 mRNA及蛋白的表达

近年来发现细胞周期调控基因 p2 1 WAF1 /CIP1与肿瘤的发生、发展密切相关 ,在肿瘤分子生物学中的地位令人瞩目 ,但它的表达在不同类型肿瘤中的作用尚未明了。本研究同时采用原位杂交及免疫组织化学技术探讨 p2 1 WAF1 /CIP1基因在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。1 材料与方法1 .1 研究对象 选取江西医学院第二附属医院1 998年 1月~ 1 999年 1 2月手术切除并经病理证实的膀胱移行细胞癌标本 56例。其中男性 42例 ,女性1 4例 ,年龄 36~ 76岁 ,中位年龄 56.3岁。病理分级按照 WHO标准 : 级 9例 , 级 2 1例 , 级 2 6例。浅表性肿瘤 ( Tis~T1) 1 7例 ,浸润性肿瘤 ( T2 ~ T4 ) 39例。同时选取 1 0例正常的膀胱黏膜组织作对照。所有用于原位杂交和免疫组化的病理标本均经统一的方法处理 :4%甲醛溶液固定 4~ 6小时 ,梯度乙醇脱水 ,石蜡切片包...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中华泌尿外科杂志》2001年09期
中华泌尿外科杂志

30岁以下青少年膀胱移行细胞癌

我们自 1980~ 1999年收治 30岁以下膀胱移行细胞癌患者 2 2例 ,占同期收治初发膀胱移行细胞癌患者总数的 1.5 7% (2 2 / 140 1) ,多数为分化较好的表浅乳头状移形细胞癌。材料和方法一、一般资料本组 2 2例。男 16例 ,女 6例。年龄 11~ 30岁 ,平均 2 5岁 ,其中 2 0岁以下者 4例 ,2 1~ 2 5岁者5例 ,2 6~ 30岁者 13例。临床表现 :间断全程无痛肉眼血尿 17例 ,全程肉眼血尿伴尿路刺激症状 2例 ,间断终末无痛肉眼血尿 1例 ,尿路刺激症状 1例 ,无临床症状经体检发现者 1例。 9例有吸烟史 ,均为 2 1~ 30岁的男性病人。二、术前检查2 2例均行B超检查 ,发现膀胱内占位 2 1例 ,1例无阳性发现。 2 2例行IVU检查 ,上尿路均未见异常 ,5例发现膀胱充盈缺损。 2 2例行膀胱镜检查均发现膀胱肿瘤 ,单发 19例 ,多发 3例 ;其中 11~2 5...  (本文共3页) 阅读全文>>

《临床泌尿外科杂志》2001年02期
临床泌尿外科杂志

膀胱移行细胞癌微血管密度与肿瘤复发的关系

本研究采用免疫组织化学方法研究膀胱移行细胞癌微血管密度 ( i MV)与肿瘤复发的关系 ,并就其机制作初步探讨。1 资料与方法1 .1   研究对象选择 1 991年 5月~ 1 995年 6月在山东省立医院行膀胱部分切除术且有随访结果的初发膀胱肿瘤患者 2 5例为研究对象 ,男 2 0例 ,女 5例 ,平均年龄 55.46( 2 8~ 72 )岁。平均随访 44.5( 2 9~ 77)个月。手术切除膀胱肿瘤 ,病理检查证实为移行细胞癌 ,其中 T1期 8例 ,T2 期 1 2例 ,T3 期 5例 ; 级 6例 , 级 1 2例 , 级 7例。1 .2   研究方法每一标本作 5μm厚连续切片 5张 ,分别行免疫组织化学染色、HE染色及空白对照染色。采用S- ABC免疫组织化学染色法 ,一抗为兔抗人第 因子相关抗原 ( F8相关抗原 )、碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)多克隆抗体及小鼠抗人血管内皮细胞生长因子 ( VE...  (本文共2页) 阅读全文>>

《前卫医药杂志》2001年05期
前卫医药杂志

膀胱移行细胞癌组织中PCNA、MMP-2的表达及意义

本文笔者采用免疫组化方法检测PCNA和MMP 2在膀胱移行细胞癌中的表达 ,探讨各基因表达与膀胱癌临床分期、病理分级的关系。1 材料和方法1.1 组织标本 人膀胱移行细胞癌标本 5 0例 ,为1993~ 1988年间在我院住院患者的存档石蜡包埋组织块。病理分级按WHO标准 ,Ⅰ级 11例 ,Ⅱ级30例 ,Ⅲ级 9例 ;临床分期按UICC标准 ,Ta 8例 ,T12 3例 ,T2 9例 ,T3 8例 ,T4 2例。患者年龄 2 4~77岁 ,平均 (5 5 .74± 13.65 )岁。男 4 2例 ,女 8例。另外 ,取正常膀胱组织 8例作为对照组。1.2 免疫组化试剂及方法 鼠抗人PCNA单克隆抗体 (1∶10 0 ) ,鼠抗人MMP 2单克隆抗体 (1∶10 0 ) ,LSAB试剂盒 ,均购于福州迈新公司。免疫组化采用LSAB法。用已知阳性切片作阳性对照 ,用PBS代替一抗作阴性对照。1.3 阳性表达强度标准 PCNA阳性表达...  (本文共3页) 阅读全文>>