分享到:

骨髓间充质干细胞定向分化肝细胞及肝内移植研究

为了观察骨髓源性的肝细胞体内移植情况,我们向大鼠肝纤维化形成模型的肝脏内移植经诱导及未诱导骨髓间充质干细胞,并观察其分布生长情况。材料与方法1.材料:健康雄性SD大鼠,鼠龄3~4周,重量100~120g,由军事医学科学院实验动物部提供。皮下注射60%四氯化碳植物油溶液6周,行大鼠肝纤维化形成模型的制备。移植前肝纤维化形成的大鼠均用60Coγ射线一次全身照射,总剂量为4.5GY抑制大鼠免疫功能。肝细胞生长因子(HGF)、表皮生长因子(EGF,美国BD公司),5溴脱氧尿苷(BrdU,Sigma公司),小鼠抗BrdU单克隆抗体(Sigma公司),鼠抗白蛋白单克隆抗体(Dako公司),鼠抗CK8单克隆抗体(英国Abcam公司),FITC标记马抗鼠IgG(Dako公司),PE标记兔抗鼠IgG(Dako公司),小鼠抗大鼠CD34PE,CD44FITC,CD45PE,CD90FITC,CD31PE,小鼠IgG FITC抗体,小鼠IgG PE抗...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国组织化学与细胞化学杂志》2007年06期
中国组织化学与细胞化学杂志

神经干细胞定向分化过程中溶酶体表达变化的研究

随着神经干细胞(neural stem cells,NSCs)研究的不断深入,探索神经干细胞增殖、分化机制尤其是其定向分化机制倍受人们关注。首先它将为阐明神经系统发育机制提供有利证据,其次为神经干细胞的应用提供更有价值的资料。目前已知有许多因素可诱导神经干细胞向不同的神经细胞分化,如血小板衍化因子(PDGF)、脑源性神经生长因子(BDNF)、胰岛素样生长因子(IGF-1)可使神经干细胞分化为神经元的比例增加,而睫状神经生长因子可诱导神经干细胞向星形胶质细胞分化等[1]。神经干细胞完成向神经元的定向分化是一个细胞从幼稚到成熟的过程,在这个过程中细胞内的各种细胞器逐渐发育成熟共同维持细胞的功能。溶酶体是细胞内起消化作用的重要细胞器,在神经元的定向分化过程中会有何变化呢?本实验采用新生大鼠皮层干细胞的培养方法[2],分离培养出神经干细胞,撤去丝裂原后加入适量的BDNF、IGF-1诱导神经干细胞向神经元定向分化,应用荧光免疫细胞化学技术...  (本文共4页) 阅读全文>>

第一军医大学
第一军医大学

恒河猴骨髓间充质干细胞的定向分化及其机制

肌腱损伤是外科临床的常见疾病,目前尚未有理想的治疗方法。肌腱组织工程研究为临床修复肌腱损伤和缺损提供了新思路。肌腱细胞分化程度高,体外增殖相对缓慢,不能满足肌腱组织工程对其数量上的要求。骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)不但能保持自我更新的能力,而且还具有多向分化潜能。在特定条件下,可以向多种组织细胞分化。另有研究表明,异体骨髓MSCs移植不引起宿主的免疫排斥反应。因此,MSCs有可能成为肌腱组织工程中很有吸引力的种子细胞的来源之一。本研究通过贴壁筛选法结合MSCs专用培养基MSCGM从非人灵长类动物恒河猴骨髓中分离、培养骨髓MSCs,建立体外培养扩增骨髓MSCs的方法;应用免疫组织化学和流式细胞术等手段检测所分离细胞的碱性磷酸酶活性、细胞表面抗原标志、细胞基质蛋白属性;采用排除法对所离的细胞进行鉴定,并将所分离细胞接种于裸鼠体内观察其多向分化潜能;应用原位杂交法检测MSCs的端粒酶活性;...  (本文共101页) 本文目录 | 阅读全文>>

南通大学
南通大学

WJ-MSCs定向分化为子宫内膜细胞的分子机制

目的体外诱导人脐带华通氏胶间充质干细胞(Wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells,WJ-MSCs)向子宫内膜间质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)和腺上皮细胞(endometrial epithelial cells,EECs)定向分化,探讨在分化过程中p38MAPK、ERK1/2以及cAMP-PKA信号通路的作用。方法(1)取足月剖宫产新生儿脐带华通氏胶,采用植块法原代培养WJ-MSCs。取全子宫切除术后新鲜子宫内膜组织,采用酶消化法原代培养ESCs。(2)采用8-溴-环磷酸腺苷(8-Br-cAMP)、雌激素及生长因子TGF-β,EGF,PDGF-BB诱导P3代WJ-MSCs向子宫内膜间质细胞样细胞分化,诱导21天后观察细胞的形态学变化,流式细胞术鉴定细胞表面波形蛋白、角蛋白表达情况。(3)采用transwell共培养体系将WJ-MSCs与E...  (本文共66页) 本文目录 | 阅读全文>>

《环境与职业医学》2002年03期
环境与职业医学

药物介导小鼠胚胎干细胞体外定向分化为心肌细胞

药物介导小鼠胚胎干细胞体外定向分化为心肌细胞@朱丹雁$浙江大学药学院!杭州310031@楼宜嘉$浙江大学药学院!杭州310031胚胎干细胞;;体外定向分化;;心肌细胞;;药物筛选;;安全性评价[目的 ]胚胎干细胞 (embryonicstemcells ,ES细胞 )是从早期胚胎内细胞团或桑椹胚分离出来的全能细胞系 ,具有体外不分化的无限增殖能力 ,当处于适合的培养条件下 ,可定向分化形成多种单一的细胞。本研究利用ES细胞的这种特性 ,旨在构建一种可提供生物信息量大而专一性强的体外药物筛选和安全性评价模型。由于ES细胞体外定向分化模型重演了基因按照特定的时间、空间表达的过程。在与药物...  (本文共1页) 阅读全文>>

《中国输血杂志》2016年06期
中国输血杂志

茵陈蒿汤调控红系定向分化K562细胞增殖与凋亡研究

红系定向分化的K562细胞具有红系特征,血型抗体可调控其增殖与凋亡[1]。茵陈蒿汤[2]出自《伤寒论》,由茵陈蒿、栀子和大黄组成,具有清热、利湿和退黄之功效,是治疗湿热型黄疸的首选方剂,亦用于防治新生儿溶血症等。近年来的研究证明,茵陈蒿汤具有中和血型物质作用[3-5]和抑制免疫性抗体[6]产生的作用,特别是对抑制ABO血型抗体的产生具有显著的作用。本研究通过细胞实验,观察茵陈蒿汤对红系定向分化的K562细胞增殖、凋亡影响,并探索茵陈蒿汤对血型抗体的作用,为研究茵陈蒿汤能否通过调节血型抗原/抗体表达,使ABO血型不合移植物逃避免疫攻击[7],而为ABO血型不合移植奠定基础。1材料与方法1.1实验试剂氯化高铁血红素(Hemin,Sigma公司,批号:51608277);联苯胺、亚硝基铁氰化钠、30%H2O2(广州康龙生物);RMPI 1640培养基(Hyclone Cat.No.SN30809);胎牛血清(生工生物Cat.No.A2...  (本文共5页) 阅读全文>>