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地塞米松体外抑制人眼小梁细胞生长及表皮生长因子mRNA的表达

糖皮质激素引起眼压升高的机制至今尚不清楚。我们在研究体外人眼小梁细胞表达表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor ,EGF)mRNA的基础上 ,观察了地塞米松对培养的人眼小梁细胞生长的影响及抑制正常小梁细胞表达EGFmRNA的情况。以探讨地塞米松引起青光眼的发生机制。材料和方法一、材料1 眼球 :因各种原因死亡 ,经允许可以摘除的眼球。无眼病 ,年龄≤ 30岁。摘除眼球时间在死亡后 4 8h以内。2 主要试剂 :地塞米松 (我国西南制药厂产品 ) ,DMEM培养基 (美国GIB公司产品 ) ,EGFcDNA探针 (中国军事医学科学院产品 ) ,随机引物同位素标记试剂盒 (美国Premaga生物制品公司产品 )。3 主要仪器设备 :美国NAPCOMODELL5410型CO2 孵箱 ,日本OLYMPUS相差显微镜 ,日本岛津紫外分光光度计 ,瑞士激光密度扫描仪。二、方法1 细胞培养 :方法同以往文献报道[1]2 ...  (本文共4页) 阅读全文>>

《眼视光学杂志》2001年02期
眼视光学杂志

体外培养人眼小梁细胞表达转化生长因子-β_2

原发开角型青光眼 (primaryopen angleglaucoma ,POAG)是常见致盲性疾病之一。小梁网是引起房水外流受阻 ,眼内压升高的关键部位。小梁细胞数目异常减少 ,细胞外基质异常沉积是其主要病理改变[1,2 ] 。有研究表明 ,具有抑制内皮细胞生长、促进多种细胞外基质合成分泌等作用的转化生长因子 β2 (transforminggrowthfactor β2 ,TGF β2 ) ,在POAG患者房水中的浓度明显高于非POAG患者 ,并可能参与了POAG的发生[3] 。本实验拟用RT PCR和免疫组化染色检测体外培养人眼小梁细胞是否表达TGF β2 ,以利于进一步研究TGF β2 与POAG发病学的关系。1 材料和方法1.1 人眼小梁细胞培养及鉴定 按我科王林等[4 ]报道的方法进行人眼小梁细胞体外培养和鉴定。简言之 ,经家长同意后 ,于死后 6h取新生儿眼前段 ,以拉细的玻璃针插入Schlemm’s管 ,从玻璃...  (本文共3页) 阅读全文>>

《眼科新进展》2014年11期
眼科新进展

小梁细胞表达的miRNA研究新进展

miRNA是一种长约22个核苷酸的非编码RNA,编码miRNA的基因在RNA聚合酶Ⅱ的作用下于细胞核内转录生成miRNA前体转录本,经RNA聚合酶Ⅲ切割产生miRNA前体。前体miRNA通过输出因子及其受体转运至胞浆,并在另一种RNA聚合酶Ⅲ切割下产生双链miRNA,初级miRNA经过Dro-sha、Dicer连续剪切最终形成成熟miRNA。成熟miRNA单链与Agol蛋白结合,生成RNA诱导沉默复合体,其相对应的过客链随之降解。miRNA与靶mRNA 3’非翻译区ta binding protein 2,LTBP2)。然而与这些基因相对应间(3’UTR)相互作用,致mRNA降解或翻译抑制[1],从而影响翻译过程。miRNA在调控基因表达方面有很重要的作用,研究证明miRNA涉及多种细胞功能,包括调节眼部组织细胞的发育、分化、再生、凋亡和代谢,同时影响眼部细胞功能和昼夜节律的调控[2]。随着对青光眼分子学的深入研究,已证明与青光...  (本文共3页) 阅读全文>>

《眼视光学杂志》2007年04期
眼视光学杂志

肿瘤坏死因子-α对体外培养的人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3和基层金属蛋白酶-9表达的影响

原发性开角型青光眼(primary open-angleglaucoma,POAG)是常见的致盲性眼病之一,以视神经萎缩、视野缺损和病理性眼内压升高为主要临床特征,迄今为止,其病因及发病机制尚不清楚。许多研究发现POAG患者小梁网中细胞外基质(extra-cellular matrix,ECM)异常堆积,房水流出阻力增加。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类金属依赖性的蛋白水解酶家族,是降解细胞外基质主要的酶,组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinase,TIMPs)能特异性地抑制MMPs的功能。房水中局部MMPs/TIMPs平衡的改变及MMPs活性的降低可能增加小梁网异常的细胞外基质的堆积,增加房水流出阻力,这可能与POAG的发病有关。激光小梁成形术(laser trabeculoplasty,LTP)是治疗POAG的一种有效...  (本文共5页) 阅读全文>>

《眼科研究》2005年06期
眼科研究

组织型谷氨酰胺转移酶在牛眼小梁细胞中的表达及意义

本实验应用免疫组织化学和RT-PCR法检测体外培养的牛眼小梁细胞(bovine trabecu lar m eshwork cell,BTMC)是否表达组织型谷氨酰胺转移酶(tissue transglutam inase,tTG),以探讨tTG与原发开角型青光眼(POAG)的发病学关系。1材料与方法1.1 BTMC的体外培养和鉴定参见我科过去报道的方法。1.2免疫组织化学染色用0·02 mol/L PBS将培养在盖玻片呈棕黄色阳性染色(图1)。阴性对照未见...  (本文共1页) 阅读全文>>

《航空航天医药》2000年03期
航空航天医药

小梁细胞体外培养技术的建立及细胞骨架的形态学观察

随着体外培养技术的普及及发展 ,越来越多的学者把此技术应用与青光眼的研究 ,小梁细胞的培养成功为研究其结构及功能在青光眼的发病机制、病理过程、及临床意义上提供了良好的实验条件 ,从而使人们对小梁细胞有了更全面深入的了解。本研究旨在建立小梁细胞体外培养技术 ,为今后的研究提供良好的实验对象。小梁细胞体外培养技术的建立及细胞骨架的形态学观察———刘 涛 张德秀 刘 勇 王 力 丁海燕1 材料与方法1 .1 材料 DMEM培养基及胎牛血清均购自Hyclone .co .Itd。hepe’s购自华美公司 ,谷氨酰胺 ,羊抗鼠anti a smooth actine ,SABC试剂盒购自博士得 ,兔抗鼠anti tubulin ,及相关试剂盒购自福建迈新公司 ,anti NSE ,anti Ⅷ因子相关抗原分别由西安医科大学第二附属医院病理科及第四军医大学秦都口腔医院病理科提供。1 .2 小梁细胞培养方法参考扬新光[1] 方法 ,与屠宰场取...  (本文共4页) 阅读全文>>