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日本血吸虫微粒体抗原的研究——Ⅱ.成虫微粒体抗原的提取、分离及其化学和免疫学特性

我们曾报告用差速离心法自日本血吸虫成虫匀浆中制备微粒体粗抗原,并且证明该抗原用于ELISA测定时,比成虫可溶性抗原的活力为高川。作者之一(Tsang)从曼氏血吸虫成虫制备微粒体抗原并通过柱层析法进一步纯化,得到了活力和特异性远比可溶性抗原为高的组分‘幻。根据中美医药卫生科技合作协议,1982年10月同一作者来中国预防医学中心寄生虫病研究所,共同对日本血吸虫成虫微粒体抗原进行提取和分离,并对分离的组分作化学和免疫学特性的研究并与差速离心所得的微粒体粗抗原进行了抗原活性的比较。材料和方法 一、日本血吸虫成虫用大动脉灌注法,自感染1,500条日本血吸虫尾坳42一45天的家兔中取得成虫,生理盐水洗净,滤纸吸干,置液氮中保存。 二、试验血清血吸虫病患者血清:3份慢性日本血吸虫病患者血清。1份晚期日本血吸虫病患者的脾血。正常人血清:非血吸曳病流行区健康人血清。交叉反应血清.华支皋吸虫病、肺吸虫病、姜片虫病及丝虫病患者血清取自我国非血吸虫病流...  (本文共4页) 阅读全文>>

《寄生虫学与寄生虫病杂志》1983年04期
寄生虫学与寄生虫病杂志

日本血吸虫微粒体抗原的研究 Ⅱ.成虫微粒体抗原的提取、分离及其化学和免疫学特性

用差速离心和琼脂糖Cl一ZB柱层析方法自日本血吸虫成虫匀浆中提取和分离微粒体抗原并对其化学和免疫学特性进行了鉴定。同时,用ELISA法对微粒体粗抗原(JA五度Ac),尿素溶解部分(J Mc)和提纯的微粒体抗原(J AMA)的敏感性和特异性进行了比较。在动力学ELIsA测定中,JAMA抗原对同种抗体显现较高的活力,达到8.8u;对蛔虫、华支肇吸虫、肺吸虫病患者血清各3份,旋毛虫病猴血清1份的反应结果低于lu,均未出现交叉反应;在微量滴定板ELISA中亦显出高的敏感性和特异性,并且证明经过纯化后的特异性活力增加.与微粒体抗原相比,胞液及尿...  (本文共2页) 阅读全文>>

《上海免疫学杂志》1984年06期
上海免疫学杂志

日本血吸虫微粒体抗原的研究 Ⅲ.成虫微粒体抗原在ELISA中的应用

1982年我们用差速离心法从日本血吸虫成虫中分离得到的微粒体粗抗原(J AMAC)用于ELISA表明其抗原活力远比成虫可溶性抗原(JSAA)为高〔立〕。根据中美医药卫生科技合作协议,同年10月美国疾病控制中心曾凯(V·Tsang)来我所共同对JAMAC做进一步提取和分离,得到了尿素溶解部分(JMC)和提纯的微粒体抗原(J AMA)。用ELISA对血吸虫抗体进行检测时,JAMAC、JMC和JAMA三种抗原均呈现高的敏感性和特异性阁。由于JAMAC的制备方法较简便,无需柱层分离步骤,我们采用这一抗原对疫区急性、慢性、晚期血吸虫病人,非疫区正常人以及肝吸虫、肺吸虫、丝虫病人的血清进行了测试,结果如下。预测选择OD=1.0时的抗原合适稀释度。各期病人血清稀释成1:200一1:1,600四个稀释度,正常人及各类交叉反应试验血清为1,20。及1:400二个稀释度。辣根过氧化物酶兔抗人IgG结合物的工作浓度为1:1,000(即原液1:20,0...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国地方病学杂志》1970年40期
中国地方病学杂志

酶促微粒体脂质过氧化模型的建立

酶促微粒体脂质过氧化模型的建立孙贵范李富君邱立岩丁桂英摘要动用全外实验,对NADPH/FeSO4诱发的微粒体脂质过氧化(LP)发生条件及反应历程进行了探讨。结果表明:在327℃水浴,微粒体蛋白浓度为1.0mg/ml,pH值7.4的0.1mol/LTris-HCL缓冲液的条件下,150μmol/LNADPH和4.45μmol/l/LFeSO4可使微粒全中丙二醛(MDA)含量于反应15分钟内迅速上升,30分钟时达到高峰,以后趋于平稳。揭示一定比例的NADPH/FeSO4可有效地激发微粒体LP。本研究初步建立子酶促微粒体LP模型。关键词还原型辅酶Ⅱ微粒体模型脂质过氧化中图分类号Q552FoundationofenzymaticmicrosomallipidperoxidationmodelSunGuifan,LiFujun,QiuLiyan,etal.DepartmentofPreventiveMedicine,ChinaMedica...  (本文共3页) 阅读全文>>

《海南医学》2012年07期
海南医学

血小板微粒体与缺血性脑卒中的相关性研究进展

血小板微粒体(Platelet microparticles,PMP)主要为血小板在受到不同刺激作用下细胞膜向外伸展变形,细胞膜部分以出芽方式形成小囊泡或伪足脱落进入微循环而形成的细小微粒,是血小板粘附或活化的产物。PMP的体积小于正常的血小板,直径0.1~1.0μm,但具有完整的膜结构,其膜的成分与血小板相同,表达一些血小板的膜糖蛋白(GP)、血小板活化因子(PAF)、β-淀粉样前体蛋白、Ca2+依赖性蛋白酶(Calpain)和有促凝作用的磷脂等。PMP是血液循环中含量最多的微粒体,占所有微粒体的70%~90%,在多种生理和病理过程中起着重要作用。正常人血液中含有少量PMP。本文就血小板微粒体的生物特性、检测及其在缺血性脑卒中的研究进展做一综述。1血小板微粒体的生物学特点1.1血小板微粒体的来源及形成机制体内PMP主要来源于活化的血小板;而体外研究PMP的产生,必须先通过各种途径激活血小板。目前研究发现高切应力和多种激活剂,如...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中华医学杂志》1970年80期
中华医学杂志

肝肾微粒体1型抗原在大肠杆菌中的表达

肝肾微粒体1型抗原在大肠杆菌中的表达王达仲人前马筠孔宪涛肝肾微粒体1型抗原(LKM-1)被看作是自身免疫性肝炎(autoimmunehepatits,AIH)中的一种重要的自身抗原。已知它为位于肝细胞微粒体中的细胞色素P450的ⅡD6组分(CYPⅡD6)——一种细胞色素P450单氧酶。它与多种药物代谢有关[1]。我们通过获得人的CYP2D6cDNA片段,然后构建表达性溶源菌,通过诱导,成功地表达了肝肾微粒体1型抗原,为建立自身免疫性肝炎的特异诊断方法,开展对自身免疫性肝炎发病机理的进一步研究奠定基础。一、材料和方法1.材料:(1)人肝cDNA文库、菌株及质粒:人肝细胞λgt11cDNA文库(美国Clontech,PaloAlto,CA);大肠杆菌Y1089、Y1090。XL1-blue及质粒pBK-CMV为本中心提供。(2)LKM-1抗体:为英国伦敦英国皇家医学与牙医学院免疫中心提供,其滴度>1:2000;异丙基硫代-β-D半乳...  (本文共2页) 阅读全文>>