分享到:

日本血吸虫微粒体抗原的研究——Ⅱ.成虫微粒体抗原的提取、分离及其化学和免疫学特性

我们曾报告用差速离心法自日本血吸虫成虫匀浆中制备微粒体粗抗原,并且证明该抗原用于ELISA测定时,比成虫可溶性抗原的活力为高川。作者之一(Tsang)从曼氏血吸虫成虫制备微粒体抗原并通过柱层析法进一步纯化,得到了活力和特异性远比可溶性抗原为高的组分‘幻。根据中美医药卫生科技合作协议,1982年10月同一作者来中国预防医学中心寄生虫病研究所,共同对日本血吸虫成虫微粒体抗原进行提取和分离,并对分离的组分作化学和免疫学特性的研究并与差速离心所得的微粒体粗抗原进行了抗原活性的比较。材料和方法 一、日本血吸虫成虫用大动脉灌注法,自感染1,500条日本血吸虫尾坳42一45天的家兔中取得成虫,生理盐水洗净,滤纸吸干,置液氮中保存。 二、试验血清血吸虫病患者血清:3份慢性日本血吸虫病患者血清。1份晚期日本血吸虫病患者的脾血。正常人血清:非血吸曳病流行区健康人血清。交叉反应血清.华支皋吸虫病、肺吸虫病、姜片虫病及丝虫病患者血清取自我国非血吸虫病流...  (本文共4页) 阅读全文>>

《寄生虫学与寄生虫病杂志》1983年04期
寄生虫学与寄生虫病杂志

日本血吸虫微粒体抗原的研究 Ⅱ.成虫微粒体抗原的提取、分离及其化学和免疫学特性

用差速离心和琼脂糖Cl一ZB柱层析方法自日本血吸虫成虫匀浆中提取和分离微粒体抗原并对其化学和免疫学特性进行了鉴定。同时,用ELISA法对微粒体粗抗原(JA五度Ac),尿素溶解部分(J Mc)和提纯的微粒体抗原(J AMA)的敏感性和特异性进行了比较。在动力学ELIsA测定中,JAMA抗原对同种抗体显现较高的活力,达到8.8u;对蛔虫、华支肇吸虫、肺吸虫病患者血清各3份,旋毛虫病猴血清1份的反应结果低于lu,均未出现交叉反应;在微量滴定板ELISA中亦显出高的敏感性和特异性,并且证明经过纯化后的特异性活力增加.与微粒体抗原相比,胞液及尿...  (本文共2页) 阅读全文>>

《上海免疫学杂志》1984年06期
上海免疫学杂志

日本血吸虫微粒体抗原的研究 Ⅲ.成虫微粒体抗原在ELISA中的应用

1982年我们用差速离心法从日本血吸虫成虫中分离得到的微粒体粗抗原(J AMAC)用于ELISA表明其抗原活力远比成虫可溶性抗原(JSAA)为高〔立〕。根据中美医药卫生科技合作协议,同年10月美国疾病控制中心曾凯(V·Tsang)来我所共同对JAMAC做进一步提取和分离,得到了尿素溶解部分(JMC)和提纯的微粒体抗原(J AMA)。用ELISA对血吸虫抗体进行检测时,JAMAC、JMC和JAMA三种抗原均呈现高的敏感性和特异性阁。由于JAMAC的制备方法较简便,无需柱层分离步骤,我们采用这一抗原对疫区急性、慢性、晚期血吸虫病人,非疫区正常人以及肝吸虫、肺吸虫、丝虫病人的血清进行了测试,结果如下。预测选择OD=1.0时的抗原合适稀释度。各期病人血清稀释成1:200一1:1,600四个稀释度,正常人及各类交叉反应试验血清为1,20。及1:400二个稀释度。辣根过氧化物酶兔抗人IgG结合物的工作浓度为1:1,000(即原液1:20,0...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国地方病学杂志》1970年40期
中国地方病学杂志

酶促微粒体脂质过氧化模型的建立

酶促微粒体脂质过氧化模型的建立孙贵范李富君邱立岩丁桂英摘要动用全外实验,对NADPH/FeSO4诱发的微粒体脂质过氧化(LP)发生条件及反应历程进行了探讨。结果表明:在327℃水浴,微粒体蛋白浓度为1.0mg/ml,pH值7.4的0.1mol/LTris-HCL缓冲液的条件下,150μmol/LNADPH和4.45μmol/l/LFeSO4可使微粒全中丙二醛(MDA)含量于反应15分钟内迅速上升,30分钟时达到高峰,以后趋于平稳。揭示一定比例的NADPH/FeSO4可有效地激发微粒体LP。本研究初步建立子酶促微粒体LP模型。关键词还原型辅酶Ⅱ微粒体模型脂质过氧化中图分类号Q552FoundationofenzymaticmicrosomallipidperoxidationmodelSunGuifan,LiFujun,QiuLiyan,etal.DepartmentofPreventiveMedicine,ChinaMedica...  (本文共3页) 阅读全文>>

《工业卫生与职业病》1988年05期
工业卫生与职业病

大鼠肾皮质线粒体和微粒体膜脂流动性的测定方法

生物膜具有流动性,正常的流动性是维持膜各种功能的重要条件。用DPH荧光偏振技术测定大鼠肾皮质线粒体和微粒体膜脂流动性的方法迄今国内外尚未见报道。本文报告这一方法及有关条件的选定。 测定方法 1.主要试剂、仪器磷酸盐缓冲液(PBS)PH7.4,荧光探剂:1,6一二苯基一1,3,5一己三烯(DPH,Sigma)I MPF一4型荧光分光光度仪,仪器测试条件及计算公式详见文献(1,2)。 2.主要操作步骤选健康雄性大鼠,断头处死后,取肾皮质1g,加6ml冷的O.32-M蔗糖一O.1M Tris一}tCl缓冲液(pH7.4),以1500‘pm匀化二分钟,用差速离心法制备线粒体,钙沉淀法制备微粒体(3)。整个分离过程均在0~4℃下进行。用Low‘y’s法测定膜蛋白含量C4)。取2m1膜悬液,然后加入2m1 2×10—M的DPH溶液,温育不同时间后测试,进行各项最适条件的选定。 结果与讨论 1.DPH与线粒体膜、微粒体膜结合后的荧光光谱变化 ...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国矿业学院学报》1988年01期
中国矿业学院学报

豫西煤田晚古生代煤中各向异性微粒体的发现及成因探讨

自国际煤岩委员会1971年提出微粒体这一显微组分以来,对这种反射率高,粒径不射1“m的颗粒状有机集合体的成因,引起国内外学者广泛注意¨’。‘迄今,主要存在两种完全对立的观点。一部分人认为微粒体是次生细胞壁,或是细分散腐植碎屑在泥炭化作用早期经氧化而成‘0][R.Thiessen(1936),J.M.S6hopf(1977)i A.D.Cohen(1980),M.Shibaoka(1978,1983)]。另一种观点由M.。Teichmnller(1973,1974)‘。’,‘‘’提出,她根据微粒体首先出现在煤化程度很低的烟煤中,常见沥青质体过渡为微粒体等地质事实,。认为微粒体是沥青质体等富氢显微组分在煤化作用过程中排出液态沥青后的裂解残体。这种观点并得到了D.G.Murchison(1979),M.w01f‘(1977j,K.Ot.tenja_nn(-1979)等人的支持,是目前微粒体成因的主要观点。笔者对豫西煤由的济源、焦作、新...  (本文共7页) 阅读全文>>