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香烟作用于肺部原代细胞影响慢阻肺气道重构的研究进展

慢性阻塞性肺疾病(COPD)的主要病理改变发生在呼吸道、肺实质以及肺部血管〔1〕。在细胞水平下研究COPD的病理机制既可以采用永生化的细胞株,也可以采用原代细胞体外培养模型,但原代细胞直接来源于机体组织,生物性状尚未发生大的变化,在一定程度上能够更好地反映体内的状态和功能。因此,原代细胞体外培养模型逐渐称为研究包括COPD在内的疾病的病理机制的重要实验对象。本文拟分析和总结香烟刺激对COPD气道重构的影响。1肺部原代细胞1.1肺部原代细胞的来源肺移植、肺切除、肺组织活检以及肺泡灌洗是获取肺部原代细胞的主要途径,再通过直接解剖分离,流式细胞分选术或探针标记法可进一步获取纯度较高的目标原代细胞。这些原代细胞主要包括上皮细胞、内皮细胞、气道平滑肌细胞、成纤维细胞、Ⅱ型肺泡细胞、巨噬细胞以及白细胞〔2〕。1.2肺部原代细胞对研究COPD病理机制的重要性过去在COPD的研究中,主要采用多种细胞株作为实验对象,如Ⅱ型肺泡细胞(A549)以及...  (本文共4页) 阅读全文>>

福建医科大学
福建医科大学

微囊藻毒素LR对小鼠肝原代细胞的损伤作用及机制

微囊藻毒素(Microcystin,MC)是一类具有生物活性的单环七肽化合物,由淡水蓝藻菌产生的高毒性次级代谢产物,污染湖泊水库,引发环境安全问题。MC分布广,可通过饮用水和食物链传递进入人体,其毒性效应范围广,可损害肝脏、肾脏、肠胃、皮肤等不同器官,通过消化、遗传、神经、免疫、生殖等系统对人类健康造成严重危害。肝脏作为MC累积与作用的靶器官,极易受到损害。微囊藻毒素LR亚型(MC-LR)在众多亚型中肝毒性最强,已有的研究表明其可引起肝细胞病理学改变,与肝细胞坏死、肝癌发生具有密切联系。本研究以小鼠肝原代细胞为研究对象阐明MC-LR对小鼠肝原代细胞生物学行为的影响并初步探讨其机制。本研究第一部分内容旨在探究MC-LR对小鼠肝原代细胞的损伤作用。通过分离提取出原代肝实质性细胞,以细胞形态、糖原染色和免疫组织化学等三种方法证实了所提取细胞为实质性肝细胞,并测得MC-LR对小鼠肝原代细胞的半数致死量(IC_(50))为0.026μg/...  (本文共58页) 本文目录 | 阅读全文>>

《西南农业大学学报(自然科学版)》2006年02期
西南农业大学学报(自然科学版)

一种家蚕卵巢原代细胞制作方法探索

随着细胞工程技术的日益发展,细胞培养成为细胞工程和体外研究生命现象的基础,是现代实验生物学上极有价值的研究手段之一,在生物学[1]、医学[2]和农业[3]等多个领域和生产实践中发挥了巨大的作用,极大的推进了生物基础研究的发展。家蚕基因组框架图的完成[4]预示着功能基因组时代的到来,利用家蚕原代细胞及其细胞系进行家蚕基因功能研究,迫在眉睫。原代细胞培养物从机体分离出来不久,其生物学特性与机体内组织极为相似,故用原代细胞培养物进行试验可以突破试验材料在时间和空间上的限制,极大的便利了研究工作。因此,体外细胞培养技术也日益受到人们的重视,逐渐普及。体外细胞培养方法多种多样,虽然细节上存在差异,但是总体上都具备以下步骤:取材及培养材料的准备、分离(散)细胞、接种和培养、更换培养液[5]。通常,细胞分离有机械解离法、酶学解离法和鳌合剂解离法。这些方法各有优劣,前2者解离效果好,但是会对细胞产生不同程度的损伤,鳌合剂解离法效果较差,应用范围...  (本文共3页) 阅读全文>>

《医药导报》2001年07期
医药导报

三氧化二砷诱导粒细胞性白血病原代细胞凋亡的研究

慢性粒细胞性白血病 (CML)是骨髓多能干细胞克隆性疾病 ,90 %患者伴有特异的细胞遗传学异常 ,即Ph染色体。随着三氧化二砷 (As2 O3 )治疗急性早幼粒细胞白血病 (APL)方法的问世及机制研究的不断深入 ,为砷剂用于治疗其他血液系统肿瘤的可能性拓宽了视野。我们曾以CML细胞系K5 6 2细胞为模型 ,证实As2 O3 可通过诱导其凋亡而抑制增殖[1] ,在此基础上 ,我们开展了As2 O3 对CML患者原代细胞生长的影响进行了初步的研究。1 材料和方法1.1 主要试剂 As2 O3 购自美国Sigma公司和哈尔滨伊达药业公司 ,胎牛血清 (FCS)、RPMI16 4 0及IMDM培养基购自Gibco/BRL公司 ,蛋白酶K、RNA酶购自Promega公司。1.2 标本来源与处理  2 6例CML患者按照《血液病诊断及疗效标准》(第 2版 )而确诊均属慢性期 (CP) ,系我院 1999年 1月~ 2 0 0 0年 8...  (本文共2页) 阅读全文>>

《华西医学》2006年04期
华西医学

雌二醇对不同年龄阶段患者的乳腺癌原代细胞增殖影响的体外研究

乳腺癌作为严重危害女性健康的主要恶性疾病之一,其发病率在我国目前仍然呈现上升的趋势。以往的大量研究已经表明内源性和外源性的雌激素是乳腺癌发病的主要危险因素,女性的乳腺癌发病风险会随着持续暴露于雌激素下时间的延长而增加[1]。同时已经明确的与人乳腺癌发生有关的危险因子,大多数也是通过性激素相关途径发挥作用的,而且这些途径的大部分也会涉及到雌激素[2]。但是以往有关雌激素水平和乳腺癌发病风险以及细胞增殖水平之间关系的研究大多是来自大规模的回顾性分析,或者仅仅限于乳腺癌细胞系以及动物实验。在此我们利用原代细胞的体外分离和培养技术,对来自乳腺癌患者的不同性质乳腺组织原代细胞在体外增殖时受培养环境中雌激素水平的影响情况进行了研究。1材料与方法1·1研究对象我们随机选取我院2004年4月~2005年3月因乳腺癌而行“乳腺癌根治术”的患者,共有35例(均为女性);年龄≤35岁的7例,年龄35岁并且未绝经的16例,已经绝经(完全无月经期≥1年)...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国病理生理杂志》2000年10期
中国病理生理杂志

谷氨酰胺缺乏对急性早幼粒白血病原代细胞生长和分化的影响

氨基酸 (aminoacid ,AA)对白血病细胞生长和分化有重要影响 ,并且白血病细胞与正常细胞AA代谢有差异[1 ,2 ] 。在另文[2 - 7] 中作者已对U937、K562细胞株氨基酸代谢的特点及干扰AA代谢对其生长分化的影响进行了一些报告。为进一步探索缺乏谷氨酰胺对病人急性早幼粒白血病原代细胞生长和分化的影响 ,进行了本研究。材 料 和 方 法一、材料(一 )培养液 无谷氨酰胺的RoswellParkMemorialInstitute (RPMI) 1 640培养基干粉 (GIB CO) ,用三蒸水按说明书配制 ,每升加青霉素和链霉素各 1 0万单位 ,用 0 2 2 μm微孔滤膜正压过滤 ,补加 1 0 %灭活胎牛血清 (军事医学科学院提供 )。对照组按实验要求补加不同浓度的谷氨酰胺 (glu tamine ,Gln ,华美 )。(二 )急性早幼粒白血病 (acutepromyelocyteleukemia ,AP...  (本文共3页) 阅读全文>>