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应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测马传染性贫血病病毒抗原的研究

近年来,马传染性贫血病(以下简称马传贫)弱毒疫苗的应用已取得了很好的防制效果。针对疫苗的需求日益增加,不断完善疫苗生产的某些环节是十分必要的。为此,我们探讨了应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)在马传贫疫苗生产和研究方面的某些应用问题,现将试验结果报告如下。 材料和方法 (一)特异性抗体:抗马传贫病毒抗体,系由人工感染马传贫强毒的马的血清提取的,抗血清编号为36号。琼脂凝胶扩散(简称琼扩)抗体价为1:64,抗体提纯方法按文献〔”进行。 (二)辣根过氧化物酶(HRP):美国sigma砚级,RZ值为3.1,一20℃冰箱保存一年半以上。 (三)酶标记抗体:对用36号抗血清提纯的扰马传贫病毒烤G,用过碘酸钠氧化法进行酶标记,纯化后,制备的酶标抗体编号为抗马传贫IgGE一36,其克分子比值为2.1,酶结合率为37.3%。 (四)被检样品:马传贫驴自细胞弱毒疫苗(简称马传贫疫苗)由我所生产,包括合格已应用的和不合格未应用的,一即℃保存。 (...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国兽医杂志》2005年04期
中国兽医杂志

马传染性贫血琼扩抗原生产工艺的改进

马传染性贫血病毒 (Equine infectious anemiavirus,EIAV)是逆转录病毒科慢病毒属的成员之一 ,其基因组结构与人免疫缺陷病毒 型 (Humaninnunodeficiency virus type1,HIV- )相似 [1,2 ]。马传染性贫血呈世界性分布 [3 ] ,常引起慢性感染 ,以发热、贫血为特征 ,耐过马呈隐性感染并终身带毒。 2 0世纪 70年代初期 ,Coggins博士建立了检测感染马血清抗体的琼脂扩散试验 (AGID) ,成为检测 EIA的标准方法 [4]。此外 ,用于马传贫的诊断方法还有补反试验 (CF) ,补反抑制试验 (CFI) ,病毒中和试验(VN) ,免疫荧光法 (IF) [5]和酶联免疫吸附试验(EL ISA) [6]等。我国也相继建立了检测马传贫病毒抗体的 AGID和 EL ISA诊断方法 [7]。 AGID诊断方法因其操作简单方便 ,判定结果可靠 ,一直得到广泛应...  (本文共3页) 阅读全文>>

《吉林畜牧兽医》1981年06期
吉林畜牧兽医

关于马传贫琼扩抗原生产的体会

马传染性贫血(简称马传贫)的琼脂扩散反应(简称琼扩)给马传贫的诊断及防治工作创造了方便条件。琼扩的优点很多。例如,对环境的要求不严格,夏季在室温,冬季在较暖和的屋内即可进行,操作简便,判定结果容易,阴阳性界线明显,因此深受欢迎。 近年来,有许多单位普遍反映,琼扩抗原效价不稳定,在马传贫检疫中达不到予期目的。一些生产琼扩抗原的单位也曾来我所了解关于琼扩抗原的生产情况。为了总结经验教训,针对我们在琼扩抗原生产中遇到的一些问题,谈一谈我们的体会。供有关单位参考。 我所自1975年以来,至今已生产出近70批琼扩抗原,除二批因疤疹病毒污染外,合格率基本达到100%。我所生产的琼扩抗原具有效价稳定、检出率高、不存在非特异性干扰等优点。我们的做法是这样的: 1.人员固定,明确分工,责任到人。我所琼扩抗原生产组的人员一直是很稳定的。组内有从事实验工作三十余年的老同志,也有从学校毕业参加工作不久的青年同志。有干部,有新、老战士,也有工人。因他们较...  (本文共3页) 阅读全文>>

《国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册》1993年06期
国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册

发展中国家的疫苗质量

据报道,发展中国家因无合适的质量控制使疫苗生产不符合标准。Henderson指出,DTP的抗原含量在这些国家生产的批次中仅10肠合格。在原先有合适抗原含量的疫苗现场使用期间,疫苗抗原性可有显著减少,结果使接种者接受的疫苗儿乎不含足够的抗原。 在70年代,对印度108个免疫接种中心使用的脊髓灰质炎活疫苗作了效力试验。60帕接种中心疫苗效力无明显下降,而其余的接种中心所使用的疫苗效力下降60肠~99呱。在斯里兰卡20例蛇咬伤病人中,19例用抗蛙蛇毒血清反复治疗无效亦令人吃惊。在90年代,接种中心冻干麻疹疫苗的效果亦相似。在尼日利亚的伊巴丹,因疏忽而使用低于10,半数组织培养感染量(T CIDso)的疫苗,结果其血清阳转率仅为26...  (本文共2页) 阅读全文>>

《畜牧兽医科技信息》2004年09期
畜牧兽医科技信息

马传染性贫血琼扩抗原生产工艺的改进

马传染性贫血病毒(Equineinfectiousanemiavirus,EIAV)是逆转录病毒科慢病毒属的成员之一,其基因组结构与人免疫缺陷病毒I型(Humaninnunodeficiencyvirustype1,HIV-I)相似。马传染性贫血病呈世界性分布,常引起慢性感染,以发热、贫血为特征,耐过马呈隐性感染并终身带毒。20世纪70年代初期,Coggins博士建立了检测感染马血清抗体的琼脂扩散试验(AGID),成为检测EIA的标准方法。此外,用于马传贫的诊断方法还有补反试验(Complementfixation,CF),补反抑制试验(Comple-mentfixationinhibiton,CFI),病毒中和试验(Virusneutralization,VN),免疫荧光法(immunofluore-scence,IF)和酶联免疫吸附试验(Enzyme-linkedimmunosor-bentassay,ELISA)等。我国也...  (本文共3页) 阅读全文>>

《国外医学(流行病学传染病学分册)》1980年02期
国外医学(流行病学传染病学分册)

关于e抗原本质的一些研究(综述)

自1972年Magnius和Espmark等‘1,首先发现e抗原以来,人们对它的纯化方法、理化特性、检测方法以及其临床和流行病学的意义进行了大量的研究,但对e抗原的本质仍然不清楚。本文将集中地对近年来关于e抗原本质的一些研究,作一简要的综述。 一、e抗原可能是宿主机体对乙型肝炎病毒感染反应的产物。 Magnius等(1,,,开始考虑e抗原是宿主被病毒感染时分离出来的一种抗原,但又不象是由于肝脏损害时从肝细胞释放出来的宿主结构。由于这种抗原在甲型肝炎的病例中从未发现过,因此进而考虑e抗原可能对乙型肝炎病毒是特异的,或是宿主对病毒反应而产生的。 以后通过流行病学的研究‘“’4),证明e抗原出现在乙型肝炎的潜伏期,但这并不意昧e抗原必须由乙型肝炎病毒所特异决定,它也可能反映宿主对乙型肝炎病毒复制的特异反应。这样,e抗原与乙型肝炎病毒在抗原学的关系上,仍然是不确定的。 Vogten等‘5)的研究也证实了e抗原与宿主对乙型肝炎病毒免疫反应...  (本文共7页) 阅读全文>>