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应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检查马传染性贫血病病毒抗体的研究

酶联免疫吸附试验(EL巧A)是一种简便、快速、敏感的血清学方法,与其他血清学方法相比有其独特的优点,因此在医学领域各学科的研究及血清学诊断方面愈来愈受到广泛的重视。自1979年以来,我们首先对应用ELIsA双抗体夹心法检测马传染性贫血病(以下简称马传贫)病毒抗原进行了研究〔1〕,并将该方法用于马传贫研究及疫苗生产方面〔2〕。在此基础上又探讨了ELIsA间接法检查马传贫病毒抗体的应用价值,现将试验结果报告如下。材料及方法 一、病毒抗原 系马传贫驴白细胞弱毒感染的驴胎成纤维细胞培养物,经处理后,再进行病毒蛋白定量(用紫外分光光度计SHIMADZ UUV一190),分装成小瓶保存于一2。℃冰箱备用。 二、酶标记抗体 应用33%饱和硫酸按沉淀与DEAE纤维素离子交换柱层析法〔3〕,从羊抗马血清(本所魏仁山提供)中提取IgG。用过碘酸钠氧化法〔3〕使羊抗马IgG与辣根过氧化物酶(美国S坛maVI)结合,制备酶标记抗体。经50%饱和硫酸铁沉...  (本文共6页) 阅读全文>>

《昆虫天敌》1982年04期
昆虫天敌

应用血清学方法检验水稻害虫天敌的捕食种类(初报)

应用血清学方法来检验稻田捕食性天敌所捕食的害虫种类,由于受检天敌直接采自田间,因而能够准确地反映出在自然情况下天敌的实际捕食情况。在国外,这种方法已作为生态学的手段而广泛应用,在我国则尚未见报导。 血清学方法的原理,主要是利用动物的血液对外来的异种入侵物质产生免疫性反应这一特性来进行的。由于各种动物都具有各自的特异性免疫反应,因此,可以利用这一方法来鉴定动物的种类。其方法是从田间采回需检验的昆虫,把它制成抗原,把这一抗原注射到兔身上,使兔产生抗该种昆虫的抗体血清,以这种抗体血清与来自田间的天敌新鲜材料进行免疫反应,即可检验出这种天敌曾否捕食该种害虫。 在1981年,我们曾对十余种害虫进行试验,试图使兔对它们产生免疫反应,但只有三化螟等7种获得了成功。在此基础上我们对园蛛、肖峭,隐翅虫和长颈步娜等多种捕食性天敌进行了检验,以结果呈阳性反应的即为捕食过某种害虫。试验对供试天敌都作了抗各种害虫的抗体血清的检验,...  (本文共2页) 阅读全文>>

《湖北大学学报(自然科学版)》1988年04期
湖北大学学报(自然科学版)

应用血清学方法检测棉田蜘蛛捕食棉蚜的研究

琼脂凝胶双扩散法(Agar-gel double diffusion,DD),是血清学方法应用于动物捕食关系研究的一种传统方法“’,现在仍然被广泛应用’‘’‘’)。然而,这种方法受其灵留性的限制,只能对捕食关系及捕食效应作一般性研究。 80年代以前,很少的研究应用了比双扩效法更灵敏的方法“’。”。虽然,前人对应用于捕食关系研究中的免疫电泳法的技术、研究程序进行了研究。‘’,但并没有对免疫电泳法的应用进行研究。本文对免疫电泳法用于检测棉田蜘蛛捕食棉蚜的可行性进行了研究,现将结果报道如下。1 材料和方法1.】抗血清的制备 棉蚜抗原制备方法参见Dempste,”’方法。抗原抽提浓直接用葡聚糟G25干粉浓缩后贮存备用。采用福氏完全佐剂兔疫家兔。制备的棉蚜抗血清等分分装后,在温度为一30℃条件下保存。I.2 t验方法 血清学检测方法为三种:电泳免疫扩敝法(electroimm。。odiff。sion,EID),交叉电兔疫扩散法(cross...  (本文共5页) 阅读全文>>

《北京实验动物科学》1988年02期
北京实验动物科学

小鼠腺病毒在鼠群中心感染及血清学检测方法的比较

小鼠腺病毒(MAd)有两个血清型‘且’:FL株和K87株,前者常引起哺乳小鼠的致死性感染,对成年小鼠则可造成死亡;后者仅限于肠道的非致死性感染。本病毒在鼠群中呈隐性感染状态,且感染率不高.Trentin‘”(1966)检查了741只普通小鼠,阳性检出率为15肠,而583只剖腹产小鼠血清学检查全部为阴性。不过也曾有过裸鼠发生腺病毒自然感染的报道‘”。虽然感染程度不严重,但小鼠可长期带毒、排毒、污染环境,影响实验结果。因此,我们采用了三种血清学方法对开放饲养和SPF小鼠(1985“1987上半年)进行了血清抗体的检测。 材料和方法 一、材料:1.小鼠腺病毒标准株:中国医学科学院医学实验动物研究所提供. 2.阳性血清:用小鼠腺病毒感染3日龄乳鼠,待发病后取脾、肺、研磨,制成悬液,经胭淋巴结途径免疫致敏的家兔.当沉淀反应效价达1:16000~32000时放血。 3.羊抗兔,羊抗鼠IgG荧光抗体:北京生物制品研究所产品.批号分别为86一2...  (本文共5页) 阅读全文>>

《江苏蚕业》1988年04期
江苏蚕业

家蚕病毒的血清学研究进展

血清学方法是实验诊断病毒感染和鉴定病毒的重要手段,也是研究病毒的重要方法,已在人租动植物病毒的研究与诊断中广泛地应用。同时随着免疫学基础理论的不断发展和与医学、生物学各分文的互相渗透,除了经典的血清学方法如免疫沉淀试验、免疫扩散试验、细胞凝集反应和补体结合反应等不断标准化外,象免疫荧光、免疫酶技术、放射免疫技术和生物素亲和素系统(.BAS)等技术方法汉不断地建立和广泛地得到应用。五十年代末期开始,-、血清学方法也被成功地应用于昆虫病毒的研究。六十年代我国学者曾用家蚕质型多角体病毒的多角.体(CPB)抗血清少鉴别了两种多角体形状的CPV(CPV一T和CPV一H)之间的相互关系,以后国内外学者又相继对家蚕的其他各种病毒进行了鉴定、定位和早期诊断研究,促进了对家蚕病毒研究的深入。一热斌泪乞 1_.CPv:首先将洗净的多角体碱解,释放出病毒粒子,然后运用超速离心法〔1〕、蔗糖密度梯度离心法〔2·幻和分子筛凝胶柱层析法〔钊都分离纯化得到了...  (本文共5页) 阅读全文>>

《重庆医药》1989年05期
重庆医药

三种特异性血清学方法诊断流行性出血热的评价

1978年以来,国内外先后分离出流行性出血热(简称出血热)病毒,并建立了免疫荧光试验””———“‘一(IFA)的特异性血清学诊断方法“-’‘。其后,国 一、待检血清 木文待检血清采自1986年12月内外有应用酶联兔疫吸附试验(ELISA)、血凝抑_一198了年12月期间住我院传染科,按1981年全国制试验出厂、免疫粘连血凝试验诊断出血热的个。流行性出血热防治(试行)方案。的诊断、分型别报告”-”。为了比较这些特异性血清学方法诊断 标准’‘’确诊的不同临床病型、病期的出血热患者血出血热的价值,我们选择了间接兔疫荧光抗体法 清184份,同时收集了无出血热病史的本院献血员(IFAT)、ELBA、HI方法(下简称三法)平行(作为正常人)及作出血热患者(包括病毒性肝炎、地检测了出血热患者血清164份、非出血热患者及 肺结核、病毒性及细菌性呼吸道感染、流脑、菌痢正常人血清各50人份的出血热特异性抗体。现将结 等)血清各50人份...  (本文共4页) 阅读全文>>