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鸭瘟病毒部分基因的克隆与序列分析

鸭瘟(Duck Plague)又名鸭病毒性肠炎,是危害鸭、鹅及其他雁形目禽类的一种急性、接触性、败血性传染病,以血管损伤、消化道出血坏死、淋巴器官受损和实质性器官退形性变化为主要特征,该病由Baudet[1]首次报道于荷兰,黄引贤等[2]于1959年在我国首先发现该病的存在,目前已成为严重威胁养鸭业的主要疫病之一。该病的病原鸭瘟病毒(Duck PlagueVirus,DPV)或称鸭病毒性肠炎病毒(Duck EnteritisVirus,DEV),属疱疹病毒科,但国际病毒分类委员会(ICTV)尚未确定其具体分类地位,这是因为人们对该病毒的了解多集中于流行病学、诊断和防治等方面,而病毒基因组、结构蛋白等的研究几乎仍是空白。鉴于此,我们首先构建了DPV的基因组部分文库,并进行了部分基因序列的测定,希望由此对DPV的分子生物学特性作进一步探索。1材料与方法1.1病毒鸭瘟疫苗株VAC株,由山东省农业科学院家禽研究所禽病诊断与免疫重点实验室...  (本文共3页) 阅读全文>>

《青岛农业大学学报(自然科学版)》2008年02期
青岛农业大学学报(自然科学版)

鸭瘟病毒AV1221株gH基因的克隆与序列分析

鸭瘟病毒(Duck Plague V irus,DPV)是引起鸭、鹅和其它雁形目禽类的一种急性、热性、败血性传染病的病原。DPV属于疱疹病毒科,具有该类病毒的一般特征,病毒粒子大小为200nm左右[1]。近年来与其它疱疹病毒相比,鸭瘟病毒在分子生物学领域研究进展比较缓慢,直到鸭瘟病毒UL6、UL7基因和DNA聚合酶基因的部分序列报道之后[2,3]人们才开始对该病毒有了新的认识。目前,已有DPV TK基因[4]、gH基因[5]的报道。gH糖蛋白是疱疹病毒感染所必需的[6,7],它的功能与病毒的穿入有关。目前,对鸭瘟病毒gH基因及其表达产物的研究较少,其详细的功能还不清楚。本文的目的是克隆DPVAV1221株的gH基因,为进一步研究其功能打下基础。1材料与方法1.1病毒、菌种及质粒鸭瘟病毒强毒AV1221株(37代)购自中国兽医药品监察所。感受态大肠杆菌DH5α,pMD-18 T载体购自宝生物工程(大连)有限公司。1.2鸭胚10日龄...  (本文共5页) 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

鸭瘟病毒部分基因组序列的克隆及重组病毒转移载体的构建

鸭瘟(Duck plague)又名鸭病毒性肠炎(Duck viral enteritis,DVE),由鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV)引起,是鸭、鹅及多种雁形目禽类的一种急性、热性、败血性传染病。其特征是流行广泛,传播迅速,发病率和死亡率高,能够造成较大的经济损失,是危害养鸭业的主要疫病之一。鸭瘟病毒的研究起步较晚,其分子生物学方面的研究相对滞后,严重制约了针对病毒基因的功能及病毒在机体细胞、组织中的复制机理、感染过程以及机体抗病毒感染机制等多方面的研究;对鸭瘟病毒的分子生物学特性进行研究将加速其重组活载体疫苗的研制进程。构建基因组文库是开展鸭瘟病毒分子生物学研究的基础,而获得大量的高度纯化鸭瘟病毒基因组DNA是构建鸭瘟病毒基因组文库的首要步骤,本研究首先差速离心收集病毒沉淀,然后用蔗糖密度梯度离心法提纯病毒,利用经典的蛋白酶K、SDS裂解,酚∶氯仿抽提法提取鸭瘟病毒基因组DNA,结果表明此种方法能...  (本文共57页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国禽业导刊》2004年15期
中国禽业导刊

一例鹅的鸭瘟病毒感染报告

鹅的鸭瘟病毒感染也称鹅病毒性溃疡性肠炎,是由鸭瘟病毒引起的一种急性败血性传染病。我市由于过去养鸭少,养鹅更少,未见鹅的鸭瘟病毒感染的报道。近一年来,我市的养鸭业、养鹅业开始起步,鸭、鹅存栏量不断增大,鸭、鹅混养的现象也时有发生,使该病的发生流行具备了客观条件。现将我市发生的一例鹅的鸭瘟病毒感染病例报告如下。一.流行特点该病于2004年3月下旬发生于某种禽场。该场饲养管理良好,常年饲养种鸭20000只,后又同时饲养商品鹅5000只。种鸭进行程序化免疫,注射过2次鸭瘟疫苗;商品鹅未进行鸭瘟疫苗注射。种鸭未发生疫情。商品鹅于40日龄发生疫情,日死亡淘汰50~100只,紧急免疫注射25倍鸭瘟疫苗后,5天后疫情得到控制,10天后鹅群恢复正常。病程共计15天,死亡鹅480只,死亡率9.6%。二.临床症状病鹅体温升高,精神沉郁,缩颈,羽毛蓬乱而无光泽,食欲下降,喜欢饮水。两肢麻痹,个别病例翅膀下垂。眼睑水肿、流泪,眼周围羽毛湿润,眼结膜充血、...  (本文共1页) 阅读全文>>

《四川农业大学学报》1987年01期
四川农业大学学报

应用酶联免疫吸附试验检测鸭瘟病毒的实验研究

1923年以未,人们对鸭瘟的诊断方法进 行了多方探索。1938年l王。55和Dardir提出 了用刘胞培养物的空斑测定法刘D尸Y作J一;。定 量泣则及中和试验。1974年Eriokson和 Pr。:for对接种DPV的鸭胚成纤维细胞川虫 光抗体法染色定位观察获得成功。’1931年我 国广东省陈泊伦等采用琼脂免疫扩散试验检 测DPV。:954年MirgY,一Dong等用反向 被动血凝试验出DPV。 目前诊断鸣瘟的常用方法主要是病毒中 和试验和凉脂免疫双扩散试验。病毒中和试 验需时约1一2周,且需活细胞或活动物。琼 刀举疫双扩散试验简单易行,但灵敏度不高。 为适应我国养鸭业迅速发展的要求,对鸭瘟 的早期、快速、敏感、准确的诊断方法急待开一拿,飞试验应用1971年Engvall和porlm“n牟撼出的酶联免疫吸附试验(EL工SA)检测早期感染鸭体内的DFV。此法不仅把抗原抗体反应的高度特异性与酶催化反应的高度灵敏性相结合,而且病毒的分...  (本文共6页) 阅读全文>>

《畜牧兽医学报》1988年S1期
畜牧兽医学报

用间接血凝测定五株抗鸭瘟病毒单克隆抗体对其它病毒的交叉反应性

单克隆抗体以多克隆抗体无法比拟的特异性,受到人们的广泛关注,也因此被广泛用于抗原分析(1,4—6],抗原定位,以及抗原变异(2)等方面的研究,同时也为微生物分类、传染病的鉴别诊断提供了重要手段。本文利用间接血凝技术,对抗鸭瘟强毒的三种单克隆抗体与同属病毒——马立克病毒、以及其它属的鸡新城疫病毒。鸭肝炎病毒,作交叉反应性测定,以确定其株间,属间以及其他病毒问的反应特异性。 材料与方法 一、马立竞囊毒 由南京药械厂提供。 二、璃奢城痰瘸膏、■肝炎囊●均由本系微生物组提供。 三、挽■t簟吏■抗体由本研究室生产。 四、抗康麓1I}鸭瘟强毒接种北京鸭五只,死亡后,取死鸭肝脏剪碎。经高速匀浆机处理后,再冻融五次。然后用超声波间断处理15分钟,8000rpm 4℃离心30分钟。将上清液25000g、4℃离心1.5小时,弃上清液,用TE缓冲液(10mM Tris.HCL pH8.O lmM EDTA)将沉淀悬浮,再用超声波处理1分钟,加入固体硫...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国兽医杂志》1989年01期
中国兽医杂志

用反向被动血凝试验检测鸭瘟病毒

鸭瘟病毒(D尸V夕引起一种鸭的急性、致死性、接触性疫病,对全世界产鸭地区具有经济上的重要性。诊断急性DPV感染的方法通常是观察特征性的组织损伤和分离DPV。分离毒力较弱的毒系的方法是接种乳鸭。作病毒的体外检测一直很困难,因为有的毒系的DPV在细胞培养物中不产生蚀斑。已.用IF法作诊断,但有时对荧光的判读较困难。 Rycaj首先报道了RPHA试验。在该试验中,抗体致敏红细胞在相应抗原存在时发生凝集。这一方法已用于检测和鉴定其它病毒。本研究旨在确定可否将RPHA发展成柞nPV检酬的古汁_材料和方法 抗血清、免疫前血清和IgG用Holla了nd B DPV疫苗作绵羊高免制备特异注抗DPV血清,血清的中和试验滴度为1忿320。免疫前血清系采自绵羊,经中和试验测定无DPV和DPV抗体。两种血清均经56℃加热灭活30分钟。致敏红细抱所脉含DP丫抗体(DPV Ab)的免疫球蛋白G(I gG)用抗DPV血清制备。用35%饱和(NH落):50、沉...  (本文共4页) 阅读全文>>