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凝集素在植物中的生理功能

本文介绍了近年来凝集素在豆科植物—根瘤菌共生结瘤固氮、植  (本文共6页) 阅读全文>>

福建农林大学
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稻瘟病菌几丁质酶和丝氨酸蛋白酶之水稻受体研究

稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起水稻重要病害,是研究植物与病原微生物相互作用的重要模式生物。已知其在侵染水稻时分泌几丁质酶、丝氨酸蛋白酶,参与致病过程。前期研究表明稻瘟病菌几丁质酶和丝氨酸蛋白酶可能是稻瘟病的致病因子,然而,它们在病程中的作用机制未明,特别是如何介导寄主水稻的响应,尚无报道。本文利用酵母双杂交系统以稻瘟病菌几丁质酶、丝氨酸蛋白酶作为诱饵蛋白,从水稻中筛选受体,研究两个蛋白与候选受体的互作关系,并探讨候选受体水稻RNAi突变体在与稻瘟病菌互作过程的变化,从而进一步明确它们在抗病或致病过程中的作用。酵母双杂交获得与稻瘟菌几丁质酶(MoChi1)互作的阳性克隆18个,与稻瘟病菌丝氨酸蛋白酶(MoSP1)互作的阳性克隆12个,同时测序并对他们进行生物信息学分析,结果发现MoChi1和MoSP1筛选到了同一个受体甘露糖凝集素OsMbl1。通过GST pull-down验证了MoChi1可以与水稻甘露糖凝...  (本文共147页) 本文目录 | 阅读全文>>

西南大学
西南大学

蜡梅开花过程基因表达的ESTs分析与凝集素基因功能的初步鉴定

蜡梅(Chimonanthus praecox (L.) Link)是蜡梅科(Calycanthaceae)蜡梅属(Chimonanthus Lindl.)植物,为原产我国的落叶丛生灌木。蜡梅花在12月至翌年早春2月孕蕾开花、花香宜人以及其特殊的抗逆性状令人关注。目前人们对蜡梅开花与花香形成的分子机理研究缺乏,没有从蜡梅中克隆到抗逆基因的报道,对蜡梅开花过程中的基因表达情况不清楚。本论文从构建蜡梅花cDNA文库入手,利用EST技术分析开花过程中的基因表达情况,在此基础上,克隆蜡梅凝集素基因,利用转基因手段初步分析其抗虫性。主要取得以下结果:1.蜡梅花cDNA文库构建用SMART cDNA文库构建试剂盒成功构建了蕾期、露瓣期、初开期、盛开期蜡梅花混合cDNA文库。原始文库滴度达到1.4×10~6pfu/ml,扩增文库滴度约为10~(10)pfu/ml,重组率达96%,插入片段在0.5 kb以上,平均约1.1kb。通过PCR检测,从...  (本文共129页) 本文目录 | 阅读全文>>

湖南农业大学
湖南农业大学

苹果轮纹病防御相关基因的鉴定及功能分析

轮纹病(Botryosphaeria dothidea)在我国是危害严重的苹果主要病害之一。研究苹果植物的抗病机制并在此基础上培育抗病品种是有效地防治苹果病害的重要途径之一。本研究通过鉴定苹果轮纹病防御相关基因并研究其功能,以探索苹果植物对轮纹病的防御机制。参照模式植物,对苹果基因组中的防御相关基因进行生物信息学分析,并结合利用半定量RT-PCR和荧光定量PCR技术,发现6个响应轮纹病病原菌侵染的基因,包括甘露糖结合蛋白基因MdMBP2.酰基辅酶A结合蛋白基因MdACBP2.2个病原相关蛋白PR-4基因MdPR-4-1和MdPR-4-2、水稻CBiP基因的同源基因MdCBiP1以及西红柿抗性基因Cf4的同源基因MdCf3。其中MdMBP2、MdPR-4-1、MdPR-4-2、MdCBiP1、MdCf3在轮纹病病原菌侵染后表达量显著上升,而MdACBP2的表达则在轮纹病病原菌侵染后显著下降。本研究首先对3个差异达到极显著水平的基因...  (本文共125页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
南京农业大学

大豆凝集素基因lec-s的克隆及转化烟草的研究

凝集素是具有一个或多个非催化性的结构域,可与单糖或多糖可逆结合的一类蛋白质或糖蛋白。目前为止,人们已经从多种植物、动物、细菌、病毒和真菌中分离出凝集素。迄今为止已发现的许多凝集素中,植物凝集素是最大的一个家族,尤以豆科植物的种子中凝集素含量最为丰富。以往的报道表明,植物凝集素在植物中具有防御功能。在正常情况下,植物凝集素仅作为储存蛋白而不表现任何特异活性;一旦植物受到微生物、昆虫等动物的危害,植物凝集素就会从植物的受害细胞释放出来,与病原物或昆虫消化道特定的糖蛋白结合,扰乱其正常的生理生化功能,最终表现为对病虫害的抗性。目前为止,已经有雪花莲凝集素基因、豌豆外源凝集素基因、菜豆凝集素基因、苋科凝集素基因以及Ⅱ型核糖体失活蛋白基因等许多植物凝集素基因成功地用于植物抗病虫害基因工程。在本实验室的前期工作中,我们利用RACE和反向PCR技术从大豆品种合丰29号中分离得到一个新的大豆凝集素基因,命名为lec-s (DQ235094).本...  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

马蹄莲、石斛和姜凝集素基因的克隆及分析

凝集素是一类含有至少一个非催化结构域并能可逆结合到特异单糖或寡糖上的蛋白质。单子叶植物甘露糖结合型凝集素(monocot mannose-binding agglutinins)是其中比较大的一个家族,其中以雪花莲凝集素为代表的一个亚类显示出良好的抗同翅目昆虫活性,以天麻抗真菌蛋白为代表的另一亚类则具有突出的抗真菌活性,它们在植物抗虫和抗病基因工程中均具有很大的应用潜力。为了挖掘更多更有效的抗病、抗虫基因,本文对植物凝集素基因进行研究,以马蹄莲、石斛和姜为材料,利用RACE-PCR技术,成功地从中克隆出了凝集素基因,并对其功能进行了研究,得到如下结果:1.首次从天南星科植物马蹄莲中克隆了马蹄莲凝集素基因zaa,zaa的全长cDNA为871bp,含有一个417bp的开放阅读框,编码一个由138个氨基酸组成的前体蛋白。对ZAA和其他单子叶甘露糖结合凝集素的序列同源性进行了比较,并发现zaa是由一个多基因家族编码的。半定量RT-PCR...  (本文共79页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西大学
广西大学

木豆凝集素的提纯、部分性质及生物学活性研究

豆类是人、畜植物蛋白主要来源,食用豆类在三大食用作物(谷类、豆类、薯类)中排名第二。豆科植物的根瘤固氮占生物固氮总量的40%。木豆是唯一可食的木本豆类,发源于印度次大陆,已有6000多年的栽培历史,属热带、亚热带作物,一年生或多年生。木豆耐干旱、耐贫瘠,蛋白质含量高(平均21.5%),营养丰富,在我国西南地区可用于遏止石漠化、保持水土、恢复生态,同时还收获粮食、饲料。凝集素是一类可促使细胞凝集的蛋白质,最早在豆科植物中发现,普遍存在于微生物、植物、动物机体中。能与糖分子结合是凝集素的一个典型性质,这使凝集素能与动物肠道上皮细胞表面结合,破坏刷状缘膜和主要吸收细胞的结构,引起营养吸收面减少,从而使植物凝集素具有广泛的抗虫谱。医学研究认为,植物凝集素具有抗癌、防癌活性;农业研究发现,豆类凝集素可能是根瘤菌的识别受体。本研究发现,木豆凝集素(粗样)可以通过50%硫酸铵饱和度盐析从木豆籽粒干粉生理盐水浸提液提取,效率1.15%。供试的不...  (本文共158页) 本文目录 | 阅读全文>>