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非创伤性产前基因诊断胎儿DNA比较研究

胎儿性别产前诊断是对性连锁遗传疾病家系进行优生指导时必要的临床诊断指标。胎儿细胞存在于孕妇外周血[1],孕妇孕早期宫颈拥有胎儿脱离细胞[2,3,4]。近期国内外报道母体外周血血浆中存在游离胎儿DNA[5]。这些孕妇孕早期存在的生理基础及PCR方法在性别检测中的成熟应用为非创伤性产前基因诊断胎儿DNA提供了有利条件。国内外对不同取材途径及取材时间的胎儿DNA产前诊断均有报道,但缺乏系统的比较分析。本文以相同病例的不同取材途径的比较分析来探求非创伤性胎儿DNA产前诊断的最适方法。资料与方法研究对象:标本来源为1998年1012月来我院门诊施行人工流产手术孕妇,随机取812孕周初产妇15例,经产妇25例(间隔末次产期18月以上)。取材:每病例人工流产前以无菌棉棒于宫颈口旋转1周,停5秒取出至含PBS离心管,收集胎儿脱落细胞。人流后取绒毛组织约1cm3。另静脉取外周血3ml(肝素抗凝)。模板DNA制备:绒毛组织;外周血(1ml);胎儿脱...  (本文共3页) 阅读全文>>

东南大学
东南大学

胎儿核酸检测分析方法的研究

产前诊断一直人类遗传学领域的研究重点,目前临床上常用的诊断方法主要有羊水穿刺和绒毛膜诊断等,这些方法对产妇和胎儿均有较大的危害,而且操作相对繁琐。近年来胎儿DNA的发现为这一问题的解决提供了可能,使得无创性产前诊断不再是梦想。随后的研究证实胎儿RNA也存在于孕妇的外周血液中,这为该研究的进一步发展提供了新的途径。尽管无创性产前诊断在近年来取得了较大的进展,但仍然与临床实际应用存在着很大的差距,特别是在胎儿核酸的高灵敏度和高通量检测方面。为此,我们以不同怀孕时期的孕妇外周血液为研究对象,结合基因芯片技术,发展了胎儿DNA和RNA的高通量检测技术并且应用于胎儿相关基因的检测分析中。本论文的主要研究内容有:胎儿核酸分离纯化方法的研究;胎儿DNA的扩增检测方法的研究;胎儿RNA定量检测分析方法的研究;孕妇血浆DNA甲基化的初步研究。具体内容如下:1.孕妇血浆核酸提取方法的研究我们以现有的核酸提取分离方法为基础,结合孕妇外周血液中胎儿核酸...  (本文共128页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

产前分子技术非创伤性诊断胎儿血型的研究

目前产前诊断在许多国家是固定的产科检查的一部分。然而,常规的获得遗传学分析的胎儿组织的方法是有创伤的并且是对胎儿有一定的风险,这些方法包括羊膜腔穿刺和绒毛活检被称为侵入性产前诊断。非创伤性产前诊断早期主要研究将自孕妇外周血中富集、纯化获得的胎儿细胞用于产前诊断,然而母血循环中胎儿细胞是很稀少的,这一点限制了它的临床应用。自从1997年母亲血浆中胎儿的游离DNA的发现为非创伤性产前诊断开辟了新的研究途径,它已经被用于产前诊断胎儿性别、胎儿Rh血型以及产前诊断单基因缺陷病如β-地中海贫血,Huntington病、胆囊纤维化和强直性肌营养不良等疾病。母婴血型不合而引起的新生儿溶血病(HDN)在临床上较为常见,其发病率约为1%。可导致胎儿出生后核黄疸等后遗症,甚至可引起胎儿宫内死亡。非创伤性产前诊断胎儿血型对预防血型不合导致的HDN有重要的意义。目前国外的研究主要集中在Rh血型系统,关于ABO血型血型系统的产前诊断报道也甚少。Kidd、...  (本文共58页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国优生与遗传杂志》2000年04期
中国优生与遗传杂志

产前基因诊断研究新进展

在产前基因诊断中 ,胎儿DNA主要从羊膜腔、绒毛膜和胎儿脐带血中获得的胎儿细胞中提取 ;但这些侵入取样方式可能对孕妇和胎儿造成危害。目前 ,随着多聚酶链式反应 (polymerasechainreaction ,PCR)、荧光原位杂交 (fluo rescenceinsituhybridization ,FISH)等技术的发展及流式细胞仪的应用 ,一些新的非创伤性产前基因诊断方法正成为发展的热点。非创伤性胎儿DNA的取样技术一、孕妇外周血该法采用密度梯度离心富集存在于孕妇外周血的胎儿细胞 ,然后利用各种胎儿细胞表面特异抗原的单克隆抗体与胎儿细胞结合 ,经流式细胞仪或磁激活细胞分离等方法分离、纯化胎儿细胞 ,再通过常规方法提取胎儿细胞核DNA进行产前基因诊断 ;或者直接收集存在于孕妇外周血中的胎儿游离DNA进行产前基因诊断。196 9年 ,Walknowska等在怀男胎的孕妇血循环中发现了核型为 46 ,XY的细胞 ,推测这种核型...  (本文共4页) 阅读全文>>

《生物学教学》1999年09期
生物学教学

RFLP与产前基因诊断

智育工作要转变教育观念,改革人才培养模式,积极实行启发式和讨论式教学,激发学生独立思考和创新的意识,切实提高教学质量。要让学生感受、理解知识生产生和发展的过程,培养学生的科学精神和创新思维习惯,重视培养学生收集处理信息的能力、获取新知识的能力、分析和解决问题的能力、语言文字表达能力以及团结协作和社会活动的能力。──摘自“中共中央、国务院关于深化《育改革,全面推进素质教育的决定”──RFLP即限制性片段长度多态性(restrictionfrag-mentlengthpomp。mhism),可用来进行产前基因诊断,它是根据将致病基因相邻的连锁基因,或连锁DNA片段作为遗传标记,通过追踪和分析这些标记,间接地作出诊断。1诊断原理生物个体之间性状各异,人类也不例外,即使孪生双胞胎的外貌特征也有差异。据估计,人类DNA的平均异质性为每20071000个核耷酸对中有一个差别。限制性内切酶对遗传差异的分析提供了一个很有用的工具。当基因突变涉及...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中华检验医学杂志》2003年01期
中华检验医学杂志

8个假肥大型肌营养不良症家系产前基因诊断

假肥大型肌营养不良症 (DMD)是一种严重的常见致死性X 连锁隐性神经肌肉系统遗传病 ,发病率约为 1/ 3 5 0 0 ,我们用 18对外显子引物[1,2 ] 、6对内含子 (CA)重复序列引物[3]和性别决定基因SRY引物 ,有效地对 8个DMD家系进行产前基因诊断。一、材料和方法1.研究对象 :8个DMD家系来自 1996~ 2 0 0 1年本院神经内科门诊 ,患者均有典型临床表现 ,血清肌氨酸磷酸激酶(CK)高于正常 10倍以上 ,肌电图和肌活检提示肌原性损伤。2 .仪器 :PE96 0 0热循环仪、Bio Rad系列水平与垂直电泳仪 (Poche公司 )。3 .引物的选择 :外显子缺失筛查引物 18对[1,2 ] ,连锁分析引物 6对[3] ,自行设计SRY引物 1对。SRY F引物序列 :GAATATTCCCGCTCTCCGGA ,SRY R引物序列 :GCTGGTGCTC CATTCTTGAG ,片段长度为 472...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中华妇产科杂志》1971年10期
中华妇产科杂志

产前基因诊断的现状和趋势

产前基因诊断的现状和趋势任兆瑞曾溢滔产前基因诊断的经典概念,是指应用分子生物学的技术和方法,在产前对有罹患某种遗传性疾病风险的胎儿(或胚胎)的相关基因进行分析,从而对胎儿是否患病作出预测的一项生物技术。近年来,随着导致胎儿发育异常和畸形的病原体的不断被发现,产前基因诊断的概念已扩大到对病原体基因的检测和鉴定。据国内外资料报道,遗传性疾病和各种先天性缺陷的人数,约占人口总数的6‰。另据上海市近年的一项56万新生儿调查资料显示,遗传性疾病及严重的先天性缺陷的发生率,占被调查新生儿总数的1.2‰。目前,由于对绝大多数遗传性疾病和先天性缺陷尚无有效的治疗方法,因此,积极开展产前监测和产前诊断对于提高人口素质、保障人民的身体健康具有非常重要的意义。一、产前基因诊断的历史和现状与传统的基于遗传性状表型的诊断技术不同,产前基因诊断是对胎儿的某些特定基因进行分析,是胎儿基因型的诊断。因此,具有更直接、更特异和更精确等特点。产前基因诊断作为一种现...  (本文共3页) 阅读全文>>