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脂肪酶膜固定化方法的研究

研究了以纤维素滤纸膜为载体的猪胰脂肪酶的四种固定方法(高碘酸钠氧化法、对苯醌活化法、环氧氯丙烷  (本文共4页) 阅读全文>>

天津科技大学
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细菌纤维素固定化脂肪酶的研究

细菌纤维素是利用木醋杆菌发酵得到的纯度极高的纤维素,细菌纤维素有许多特性,如纳米纤维组成三维网络结构、良好的亲水性、良好的机械强度、高结晶度和易降解等。近年来,脂肪酶的固定化成为国内外研究热点之一。本论文研究了以细菌纤维素膜为载体固定化脂肪酶、细菌纤维素小球为载体固定化脂肪酶、羟丙基细菌纤维素膜为载体固定化脂肪酶的酶学性质。研究了细菌纤维素膜的制备,以细菌纤维素膜为载体固定化脂肪酶,研究了吸附法和吸附-交联法中各因素对固定化脂肪酶的影响,以理论吸附率、活力回收率、固定化酶活力、比活力、蛋白载量为指标,探讨了膜尺寸大小、吸附时间、给酶量等因素对固定化脂肪酶的影响;通过游离酶和固定化酶性质的比较,系统研究了最适反应温度、最适反应pH值、温度稳定性、pH稳定性、重复使用稳定性和储存稳定性等固定化酶的酶学性质,结果表明:固定化脂肪酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为5,在稳定性方面采用吸附-交联法固定化脂肪酶的稳定性最好,吸附法固...  (本文共73页) 本文目录 | 阅读全文>>

天津科技大学
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聚乳酸膜改性及固定化脂肪酶的研究

为了改善聚乳酸(PLA)材料的结构与性能、扩大PLA的应用领域,本文以PLA为材料,分别通过聚己内酯(PCL)和聚乙二醇(PEG)改性制得复合膜,研究了不同改性剂和添加量对PLA膜结构和性质的影响。通过PEG增塑改性制备的PLA/PEG膜由于其独特的微孔结构和较好的生物相容性,可以作为脂肪酶固定化载体材料。主要研究结果如下:采用PLA和PCL以8/2、6/4、5/5、4/6、2/8的添加比(w/w)共混改性,用浇铸法制膜后分别测定改性膜的表面疏水性、机械性能、表面表征、热力学性能。结果表明PLA/PCL共混膜均为疏水表面,由于共混膜中PCL含量增多,PLA/PCL膜的抗拉强度和弹性模量降低,但是断裂伸长率只从2.7%增加到3.6%,远远小于纯聚己内酯(62.5%),说明二者混合后复合膜的力学强度降低但没有起到很好的增韧作用。采用PLA和PEG(分子量400、1000、4000、6000)以9/1、8/2、7/3、6/4的添加比(...  (本文共70页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

丙烯腈/丙烯酸共聚物纳米纤维膜的制备及脂肪酶的固定化

丙烯腈/丙烯酸共聚物膜表面带有活性基团-羧基,适合用作酶固定化的载体材料。因此通过静电纺丝技术制备了丙烯腈/丙烯酸共聚物纳米纤维膜,并以其作为脂肪酶的固定化载体,利用其极高的比表面积,提高固定化酶的载酶量。但是作为一种合成聚合物,这种膜材料存在着生物相容性较差等缺点,使得酶分子与载体材料间会产生非生物特异性相互作用,从而导致酶的失活。为了提高固定化酶的活性,本论文又采用表面仿生修饰的方法,将两种不同的蛋白质分别引入到丙烯腈/丙烯酸共聚物纳米纤维膜表面,在膜材料表面构建仿生修饰层,为脂肪酶(来源于Candida rugosa)营造一种生物友好的微环境,使酶的活性提高。通过这两种方法的有机结合,即用蛋膜素和胶原蛋白分别修饰丙烯腈/丙烯酸共聚物纳米纤维膜,期望能得到载酶量和保留酶活都比较高的固定化酶膜。具体内容如下:用静电纺丝法制备了丙烯腈/丙烯酸共聚物纳米纤维膜,用扫描电镜(SEM)表征了纺丝液浓度和电压对纳米纤维直径的影响。用碳二...  (本文共104页) 本文目录 | 阅读全文>>

北京化工大学
北京化工大学

脂肪酶的固定化及其在油酸丁酯合成中的应用

作为一种重要的有机精细化工产品,油酸丁酯在多个领域有着广泛的应用。目前,商品化油酸丁酯都是通过化学方法合成的,但生产过程中存在反应条件剧烈、环境污染大、产品品质低等缺点。为克服油酸丁酯传统生产方法的不足,本研究选取两种脂肪酶(黑曲霉脂肪酶和假丝酵母脂肪酶)为催化剂,考察了生物法合成油酸丁酯的可行性及影响因素,同时,考虑到游离酶在工业应用上的缺陷,还研究了脂肪酶的固定化及其在油酸丁酯合成中的应用。主要研究结果如下:(1)游离脂肪酶催化反应表明,黑曲霉脂肪酶和假丝酵母脂肪酶都能催化合成油酸丁酯,但假丝酵母脂肪酶的催化能力明显优于黑曲霉脂肪酶。对相关影响因素的考察表明,反应溶剂对转化率影响较大,反应溶剂logP>2时转化率较高,本研究选择的是正己烷。假丝酵母脂肪酶的最佳反应条件为:温度为37℃,摇床速度200r·min~(-1),底物正丁醇与油酸的摩尔比为1,给酶量为5000IU/25mL溶剂时,其4小时的最高转化率为59.1%。(2...  (本文共81页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江工业大学
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酶膜生物反应器制备核苷酸的研究

5’-核苷酸广泛应用于医药及食品行业,在世界范围内核苷酸类药品、制剂成为研究和投资的热点之一,需求量日益增长。国内仅个别厂家能进行四种核苷酸生产,且产品纯度不高,产量不大,原料不足的问题严重制约了我国核苷酸类药物和衍生物的开发。酶膜生物反应器是在生物化工和膜分离技术的基础上发展起来的新型反应器,作为生物反应分离耦合过程的一个具体应用,其有不可比拟的优越性,在食品、生物化工、医药、环境等领域得到了越来越广泛的应用。为此本课题开展了酶膜生物反应器制备核苷酸的研究。主要研究了核酸酶P1的制备及分离纯化、游离及固定化酶膜生物反应器制备核苷酸、核苷酸的分离纯化等。利用正交及响应面法优化了培养基成分,并对培养条件进行了优化,在最优条件下,可得到核酸酶P1最大酶活性354 U/ml。通过热失活、超滤、硫酸铵分级沉淀、疏水作用层析、离子交换层析以及凝胶层析等生化分离手段提纯得到了电泳纯核酸酶P1,酶蛋白比活为1264U/mg,纯化倍数为93.4...  (本文共197页) 本文目录 | 阅读全文>>