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血友病A内含子22及内含子1倒位的检测及其意义

目的:(1)通过检测血友病A(hemophiliaA,HA)患者凝血因子Ⅷ基因内含子22及内含子1倒位的发生率,改进并完善血友病内含子22倒位及内含子1倒位的实验室检测方法;(2)探讨其与FⅧ抑制物产生的相关性。方法:(1)选取130例经一期法检测FⅧ:C确诊的HA患者,其中重型(FⅧ:C≤1)91例,中型(1FⅧ:C≤5)13例,轻型(5FⅧ:C≤25)26例,并采用Bethesda方法对130例HA患者进行FⅧ抑制物检测;(2)以基因组DNA为模板,采用双管多重PCR扩增技术对130例HA患者进行内含子1倒位检测,对其中71例HA患者采用长距离PCR技术进行内含子22倒位检测。结果:(1)130例HA患者中筛查到6例抑制物阳性HA患者,其抗体滴度分别为2.3、3.6、24.4、32、121.6和345.6BU /ml,阳性率为4.6%(6/130),6例均为重型HA患者,占重型HA患者的6.5%(6/91);(2)130例H  (本文共37页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国协和医科大学
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中国血友病A患者基因突变谱的研究

第一部分中国血友病A患者基因突变谱的研究背景:血友病A是一种常见的X染色体连锁隐性遗传性出血性疾病,发病率为1/5000。血友病A的临床症状与其体内残余的凝血因子Ⅷ促凝活性有关,重型血友病A(FⅧ:C<1%)发生自发性出血或者外伤后的出血频率明显高于轻中型,因而关节畸形等致残性并发症的发生率高于轻中型患者。患者疾病的严重程度与FⅧ基因突变类型有直接的关系,造成FⅧ结构重大缺失的突变往往导致重型的血友病A,而引起蛋白中某位点氨基酸改变的突变,其后果与该氨基酸所处的位点有关,其可能致病机制包括影响FⅧ与其他蛋白作用位点,影响其分泌及稳定性。血友病A患者的主要治疗手段为FⅧ制剂的替代治疗,包括血浆来源的浓缩FⅧ或者基因重组的FⅧ,后者的优势在于可以避免血制品相关的感染如HIV、HBV及HCV等。替代治疗的普及使血友病A患者的生活质量得到极大的提高。但是在替代治疗过程中最严重的并发症是FⅧ同种抗体的产生,尤其在重型血友病中,发生率可达3...  (本文共61页) 本文目录 | 阅读全文>>

河北医科大学
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甲型血友病的基因诊断方法研究

目的:血友病(hemophilia)是一种常见的出血性疾病,主要是由于凝血活酶缺失导致,其中最为常见的是甲型血友病(HemophiliaA,HA)。甲型血友病是一种X连锁的隐性遗传病,约占先天性出血性疾病的85%,在男性活婴的发病率约为1/5000,女性主要为携带者,患者少见。编码凝血因子Ⅷ的基因发生突变而导致的该凝血因子功能缺陷或含量不足是该病发生的主要原因。临床表现为自幼反复自发或轻微创伤后全身各部的出血,除皮肤、粘膜出血外,以肌肉、关节出血为特点,反复关节出血往往导致关节畸形,重要脏器出血甚至可危及生命。HA的发病轻重主要与FⅧ活性大小有关,FⅧ活性1%为重型,FⅧ活性在1%到5%之间为中型,5%到25%之间为轻型,还有一部分定义为亚临床型,其FⅧ活性在25%到45%之间。目前只能靠替代疗法、对症处理等来维持患者的生命,临床上没有找到有效的根治性治疗措施,因此对有生育要求的可疑携带者进行基因诊断,筛查出携带者进行产前诊断,...  (本文共37页) 本文目录 | 阅读全文>>

《临床血液学杂志》2012年05期
临床血液学杂志

血友病A患者内含子22和内含子1倒位的检测及其意义

目的:通过检测血友病A患者凝血因子Ⅷ基因内含子22、内含子1倒位的发生率,改进并完善血友病患者内含子22倒位、1倒位的实验室检测方法,并探讨其与FⅧ抑制物产生的相关性。方法:选取130例经一期法检测FⅧ:C确诊的血友病A患者,采用Bethesda方法进行FⅧ抑制物检测。采用双管多重PCR扩增技术...  (本文共4页) 阅读全文>>

中国医科大学
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重型甲型血友病患者F8基因突变筛查鉴定及功能分析

目的:甲型血友病,即血友病A,是凝血因子Ⅷ缺乏或功能缺陷所导致的X连锁隐性出血性疾病,主要累及男性,在男性人群的发病率约为1/5000。患者主要表现为反复自发性或外伤后出血。其中,重型甲型血友病患者临床出血严重,凝血因子Ⅷ凝血活性(FⅧ:C)A剪接突变功能分析包括构建野生型和突变型F8 minigene表达载体,分别转染人胚肾细胞HEK293T,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)结合DNA测序进行体外剪接验证。结果:1.在35例重型甲型血友病患者中,27例患者内含子22倒位阳性,占77.1%(27/35)。2.在35例重型甲型血友病患者中,未检测到内含子1倒位阳性患者(0/35)。3.在倒位阴性的8例重型血友病患者中,共鉴定出4种F8基因突变:c.185CG无义突变(p.Ser62Ter)、c.2951CA无义突变(p.Ser984Ter)、c.7016GT错义突变(p.Arg2339Met)和c.670+1GA剪接突变。...  (本文共51页) 本文目录 | 阅读全文>>

安徽医科大学
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血友病A患者FⅧ基因内含子1及22倒位分析

背景血友病A (hemophilia A,HA)是由于凝血因子Ⅷ(coagulation factorⅧ, FⅧ)基因缺陷所致的X连锁隐性遗传性出血性疾病,男性患病率约为1/5000~1/10000。FⅧ基因位于X染色体长臂末端Xq28,全长186 kb,由26个外显子和25个内含子组成。导致HA的基因突变种类繁多,呈高度异质性。其中重型HA多由大的DNA片段缺失、倒位或插入等引起。1993年发现约半数重型HA发生FⅧ因子内含子22倒位。近年来发现,FⅧ内含子1倒位是仅次于内含子22倒位导致重型HA的另一个重要原因。本研究首次联合运用FⅧ基因内含子1和22倒位基因突变位点,对81例HA患者和6个血友病家系的11例可能携带者进行直接基因诊断。FⅧ抗体的产生是HA患者最严重的并发症之一,FⅧ基因突变也是血友病A患者产生FⅧ抗体的危险因素之一,本研究就FⅧ基因内含子1和22倒位与抗体的相关性进行初步探讨。目的对HA患者进行FⅧ抗体检测...  (本文共43页) 本文目录 | 阅读全文>>