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提高木霉属纤维素酶系中β-葡萄糖苷酶活性的研究

β-葡萄糖苷酶在生物能源、保健品、食品等领域具有广阔的应用前景。而且该酶是纤维素酶系中的关键组分,在纤维素降解过程中起着限速酶的作用。木霉是世界公认的纤维素酶的产量比较高的菌种之一。然而该霉所产β-葡萄糖苷酶的活性普遍偏低。因此,培育高产β-葡萄糖苷酶的木霉菌株具有重要意义。对出发菌株绿色木霉AS3.3711进行UV、DES、和NaNO2复合诱变后,通过筛选得到了酶活较高突变菌株U3D2Na22,其产β-葡萄糖苷酶的酶活为0.74IU/mL,是原始菌株AS3.3711的3.2倍。通过单因素实验结合正交设计的方法,对绿色木霉U3D2Na22产酶培养基的组分进行分析,确定其最适产酶培养基组成为:碱稻草0.69%、乳糖0.33%、蛋白胨2%、硫酸铵0.5%、NaH2PO40.3%、CaCO30.2%。通过实验确定绿色木霉U3D2Na22的最适发酵条件为:发酵液初始pH4.0,发酵温度30℃,培养时间132h,当发酵培养进行到72h时补  (本文共79页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国酿造》2017年09期
中国酿造

产水解银杏黄酮苷的β-葡萄糖苷酶菌株的筛选及鉴定

银杏叶(Ginkgo bi1oba L.)提取物中的黄酮类物质主要是以黄酮糖苷的形式存在,占银杏叶提取物总含量的22%~24%[1]。主要是由山奈酚、槲皮素以及异鼠李素等黄酮苷元与葡萄糖等单糖以O-糖苷键连接而成,以糖苷键形式存在的黄酮占到提取物黄酮总含量的95%[2]。银杏黄酮类物质是治疗心血管疾病的天然药物[3],具有降低全血黏稠度、扩张血管、增加血流量、抗氧化等作用[4-5],除此之外,银杏黄酮类物质在防治青光眼、糖尿病,抗癌、抗菌、抗衰老等方面也有显著的效果[6-7]。由于银杏黄酮大部分以糖苷形式存在,少部分以苷元型黄酮形式存在,不易被肠道吸收,难以达到疗效。经体外抗自由基氧化实验研究发现,黄酮苷元清除自由基的能力比黄酮苷强,苷元抗氧化能力也明显优于黄酮苷。因此,将黄酮苷转化为黄酮苷元的研究吸引了多数人的目光。β-葡萄糖苷酶能参与水解黄酮苷类化合物的各种糖苷键,能水解O-糖苷以及C-糖苷,生成黄酮苷元被大肠直接吸收[8]...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国酿造》2017年09期
中国酿造

β-葡萄糖苷酶生产菌筛选及酶学特性

β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase)又称β-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶。其属于纤维素酶类,能够水解结合于末端非还原性的β-D-葡萄糖苷键,同时释放出β-D-葡萄糖和相应的配基[1]。β-葡萄糖苷酶存在于自然界许多植物、昆虫、真菌及细菌体内,在纤维素降解[2]、食品去苦增香[3]、果酒增香[4]、医药[5]、病虫害防治[6]等方面有广泛应用,另外在生产大豆异黄酮活性苷元[7]、天然栀子蓝[8]、表面活性剂[9]等方面也有应用。黑曲霉(Aspergillusniger)是常见的食品安全菌种,所产的β-葡萄糖苷酶在食品、医药等领域中有很好的发展前景。以黑曲霉AN为出发菌株,通过亚硝基胍(nitroso-guanidin,NTG)诱变获得黑曲霉β-葡萄糖苷酶突变株,以期能够筛选得到高产菌株,并且获得性能良好的β-葡萄糖苷酶,以提高其应用价值。1材料与方法1.1材料与试剂1.1.1菌种黑曲霉(Aspergillus niger)AN...  (本文共3页) 阅读全文>>

《食品工业科技》2013年24期
食品工业科技

绿色木霉β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的克隆

纤维素酶是将纤维素水解成纤维二糖和葡萄糖的一组复杂酶系的总称,细菌、真菌、放线菌等微生物均能产纤维素酶[1-5]。其中β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,纤维二糖酶或CB,EC3,2,1,21)能催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,防止纤维二糖的积聚,减轻其对纤维素酶的抑制作用,决定了纤维素糖化过程的最终效率,是促进纤维素降解过程的关键酶,同时它也能水解其他有重要生理作用的β-葡萄糖苷[6-8]。但是β-葡萄糖苷酶含量却最低,不足1%,且活性普遍偏低,是纤维素酶解转化的关键酶[9]。许多国内外学者正致力于β-葡萄糖苷酶分子生物学方面的研究,以期改善纤维素酶的催化效率,实现纤维素资源的高效生物转化。天然纤维素酶由于酶活较低以及生产成本较高等因素的限制,大规模的工业化应用有一定的困难,对纤维素酶基因进行克隆,利用基因工程手段构建高效纤维素酶产生菌越来越受到人们的重视,同时也为纤维素酶的大规模生产提供了新途径...  (本文共4页) 阅读全文>>

《饲料工业》2007年02期
饲料工业

菌源性β-葡萄糖苷酶特性的研究

大豆异黄酮可调控动物机体养分代谢,改善饲料利用率,可改善动物产品的品质,并有抗氧化作用,提高动物免疫功能和生产机能。因此,大豆异黄酮在畜禽营养中的作用越来越受到关注。但是大豆异黄酮主要以结合型的糖苷(glucosides)形式存在,从大豆中提取的大豆异黄酮中游离型的苷元占总量的2%~3%,结合型的糖苷占总量的97%~98%。研究发现:结合型的糖苷不具有最佳的生理活性状态,只有大豆异黄酮糖苷被水解脱去糖基转化成游离型的苷元形式才能被动物体吸收,发挥生理调节作用。β-葡萄糖苷酶能使生物活性因子大豆异黄酮苷等生物苷类物质脱去糖基,变成分子量较小的高生物活性苷元,进而提高生物利用率。β-葡萄糖苷酶(bata-Glucosidase)系统名称为β-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶(bata-D-glucosideglucohydrolase;EC.3.2.1.21),它是纤维素酶系中的一个组分,主要作用于β-1,4糖苷键,还能作用于β-1,1、1...  (本文共3页) 阅读全文>>

《生物技术通报》2007年04期
生物技术通报

两种茶树β-葡萄糖苷酶基因cDNA在原核中表达的研究

β-葡萄糖苷酶与茶叶香气物质的形成[1]、茶树抗病虫害[2]等茶树生长和发育的生理过程直接相关。在茶叶加工过程中,β-葡萄糖苷酶与茶叶的增香有关[3]。近20年来,有关茶树β-葡萄糖苷酶的研究一直是茶叶生物化学与生物技术领域的研究热点[4~6]。以化学合成的β-葡萄糖苷酶的抑制剂β-葡萄糖脒为配体,通过N-糖苷键交联到支持物上,使糖脒N-糖苷键一侧的氨基保持带正电荷的活化状态,合成了一种β-葡萄糖苷酶的亲和层析树脂。利用这种亲和层析树脂,从茶树叶片中纯化出两种分子量分别为63和75kDa的β-葡萄糖苷酶单体酶(GluⅠ和GluⅡ),并证实这两种酶都能水解(Z)-3-己烯醇、苯甲醇和苯乙腈的β-D-葡萄糖苷[1]。此后,我们根据这两种酶蛋白的端基氨基酸序列设计寡聚核苷酸引物克隆了酶的基因cDNA阅读框全长(GluⅠ1899bp和GluⅡ1890bp)。本研究成功地在原核表达体系中表达了两种具有正常生物活性的茶树β-葡萄糖苷酶,为后...  (本文共5页) 阅读全文>>