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纤维素酶高产菌筛选及产酶条件与酶学性质初探

木质纤维素是地球上丰富的生物质资源。利用微生物产生的纤维素酶将秸秆类木质纤维素转化为可用于发酵生产液体燃料的秸秆糖,对缓解人类社会面临的环境和能源危机具有重大的意义。目前,纤维素酶已被广泛的应用于食品、纺织、化工、造纸、中药提取、饲料等领域。但是,由于现有纤维素酶酶活力低,酶解效率有限,生产成本过高等因素,成为制约木质纤维素大规模利用的瓶颈问题。因此,通过筛选高产菌株而改善纤维素酶的工业化生产具有重大意义。桧状青霉(Penicillium piceum)9-3是本实验室从秸秆中分离得到的一株纤维素酶产生菌,它具有酶系平衡和酶产量较高的优势。本研究以桧状青霉9-3为出发菌株,通过硫酸二乙酯(DES)诱变,并对诱变菌株进行发酵培养,通过测定粗酶液的纤维素酶酶活力筛选得到一株纤维素酶高产菌株H16,其纤维素酶活力与发酵液中总蛋白产量均较出发菌株提高了4倍左右。并且,该菌株在传代6次后性能仍然保持良好。本研究还通过单因素实验对发酵培养基  (本文共63页) 本文目录 | 阅读全文>>

《江西化工》2017年03期
江西化工

腈水合酶生产菌株产酶条件的优化

丙烯酰胺(AM)作为最重要的酰胺类化合物之一,主要应用于生产聚丙烯酰胺及其衍生物[1]。聚丙烯酰胺可以广泛应用于石油、造纸、水处理、采煤、冶金等各个领域。腈水合酶(Nitrile hydratase,NHase,EC4.2.1.84)是一种可以催化丙烯腈(AN)水合生成丙烯酰胺的生物催化剂。其酶活力关系到AM的生产效率和产率,是微生物法生产丙烯酰胺的关键[2,3]。本文主要对影响腈水合酶发酵较大的三种培养基组分酵母膏、味精、尿素的添加量进行优化[4],通过正交试验研究最佳的培养基配比;并根据酶活和实际酶促反应效果确定适宜的p H条件,为丙烯酰胺的工业化生产提供理论参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1试验菌株诺卡氏菌Nocardia sp.购自清华大学,由本公司自行保存。1.1.2培养基配方1.1.2.1种子培养基葡萄糖20 g/L,K2HPO4·3H2O 1.2 g/L,KH2PO41.2 g/L,Mg SO4·7H2O ...  (本文共4页) 阅读全文>>

《微生物学杂志》2015年02期
微生物学杂志

产脂肪酶菌株筛选及柠檬酸杆菌产酶条件优化

Screening of Lipase-Producing Bacteria and Conditions Optimization ofLipase Production by Citrobacter sp.的脂肪酶是生物柴油生产的关键[4]。因此,为满足工业应用的要求,筛选高产脂肪酶菌株和提高脂肪酶产量成为脂肪酶研究的重要方向。1材料与方法1.1材料1.1.1土样来源华东理工大学食堂附近、上海炼油厂及烧烤附近被油脂污染的土样。1.1.2主要试剂和仪器1主要试剂:橄榄油购于上海凌峰化学试剂有限公司,对硝基苯酚棕榈酸酯购于上海谱振生物有限公司;基因组提取试剂盒和PCR扩增试剂盒均为Axygen公司产品;其他均为市售分析纯试剂;2主要仪器:立式压力蒸汽灭菌器LDZM-80KCS(上海申安医疗器械厂);垂直层流洁净工作台CJ-C-DI型(上海南华医用核子科技公司);恒温震荡培养箱ZHLY-180型(上海知楚仪器有限公司);低速大容量...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国生物制品学杂志》2011年01期
中国生物制品学杂志

产壳聚糖酶微生物的筛选及产酶条件的优化

甲壳素是地球上数量最多的含氮有机化合物,广泛存在于虾、蟹和昆虫等节肢动物的外壳及部分高等植物、真菌细胞壁中,是一种巨大的可再生资源。壳聚糖[β(-1→4)-2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖]是甲壳素N-脱乙酰基的产物。研究发现,壳聚糖的水解产物壳寡糖具有重要的生物活性。桂留中等[1]报道,6个以上残基的壳寡糖具有明显的抗癌活性,可抑制肿瘤细胞生长;壳聚糖也能抑制细菌的存活[2];另外,壳寡糖可作为植物调节剂,增强植物对病虫害的防御能力[3]。由于壳寡糖在农业、生物医药、食品工业、精细化工等领域的广泛应用,因此,筛选产几丁质酶和壳聚糖酶的微生物并制备甲壳低聚糖成为研究的热点[4]。虽然目前已从多种微生物中分离出壳聚糖酶,但还无法实现大批量生产,其中产酶量较低是主要原因之一[5]。本文通过平板法从土壤中筛选产壳聚糖酶的菌株,并对产酶条件进行优化,以期扩大壳聚糖酶的工业生产菌株资源,为壳寡糖的生产及应用奠定基础。1.材料与方法1.1土壤...  (本文共4页) 阅读全文>>

《化学与生物工程》2010年05期
化学与生物工程

几丁质酶高产菌的筛选及其产酶条件的优化研究

几丁质(Chitin)又名甲壳素,广泛存在于虾、蟹等甲壳动物的外壳中,是虾、蟹等甲壳动物可食用部分外的主要废弃物,自然界每年的产量估计约100亿t,是我国近海海域主要的有机污染源之一,同时又是一种用之不竭的生物资源。几丁质被誉为人体所必需的第六生命要素,其衍生物低分子量几丁寡糖因具有多种生物活性,可用于治疗艾滋病、癌症及心血管疾病,在口腔医学和人体保健等领域也有着广泛的应用[1,2]。几丁质酶产生菌是一类能利用几丁质作为碳源而生存、繁殖的特殊的微生物群体,它能通过分泌几丁质酶降解几丁质为几丁寡糖、几丁二糖直至几丁单糖,直接被人体吸收利用,从而使几丁质用途更加广泛。茂名是一个海滨城市,虾、蟹资源非常丰富,虾、蟹壳等废弃物一直影响着茂名地区的生态环境。作者在此筛选了一株几丁质酶活力高的菌株并对其产酶条件进行优化,拟为“渔业垃圾”虾、蟹等甲壳动物的外壳的再生利用提供理论基础。1实验1.1土样及试剂5份土样采自茂名沿海地区。几丁质粉,上...  (本文共4页) 阅读全文>>

《南京晓庄学院学报》2010年06期
南京晓庄学院学报

纤维素分解菌的分离筛选和产酶条件优化

资源和环境问题是人类在21世纪面临最主要的挑战,寻找再生能源替代不可再生能源是应对这一挑战的惟一途径.生物质能是再生能源[1],世界上约有25万种生物,潜力巨大.据推算,地球上每年光合作用的产物高达1.5×1011—2.0×1011吨,是人类社会赖以生存的基本物质资源,其中90%以上为木质纤维素类物质,它占植物干重的35%—50%[2].目前这部分资源尚未得到充分的开发利用[3].随着世界人口迅速增长,矿产资源日渐枯竭,开发高效转化木质纤维素类可再生资源的微生物技术,利用工农业废弃物等发酵生产人类急需的燃料、饲料及化工产品,即化工原料的“绿色化”,具有极其重要的意义和光明的发展前景.目前,对纤维素的降解利用主要采用生物手段,利用微生物可将纤维素材料转化为上述饲料、化工原料等,前景巨大,而这一应用前景的前提是要首先分离到能够有效分解纤维素的微生物菌种,但目前得到的纤维素酶无论是来自动物、植物还是微生物的,都不能满足大规模工业生产的...  (本文共4页) 阅读全文>>