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用花粉管通道法将豌豆DNA导入小麦及其后代的分子验证

在我国小麦产量已处于较高水平的前提下,改善和提高小麦品质就成为育种工作者一项迫切的任务。本研究通过花粉管通道法将豌豆基因组DNA导入高产低蛋白小麦品种鲁麦22号,以期提高其蛋白质含量,并探讨该方法在改良小麦品质方面的作用。以筛选的变异体T220X为材料,对其醇溶蛋白、同工酶表达和DNA水平上的差异以及蛋白质含量的变化等方面进行了研究,获得了如下结果:1.种子醇溶蛋白电泳结果显示,变异体T220X酶带与受体鲁麦22号相比,既有新的酶带增加,也有酶带缺失的情况。说明外源DNA的导入影响到醇溶蛋白组分的变化,根据醇溶蛋白基因定位,初步认定外源DNA影响到小麦的第一或者第六号染色体。2.小麦幼苗期过氧化物酶活性的测定显示,变异体T220X的酶活性高于受体鲁22;过氧化物酶电泳显示,T220X和鲁22过氧化物酶在酶带深浅和数目方面都存在差异,说明外源遗传物质已影响到过氧化物酶的变化。3.RAPD分析结果显示,变异体T220X和受体鲁22在  (本文共43页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京林业大学
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小盐芥总DNA导入紫薇的研究

本文在研究紫薇的生物学特性的基础上,将小盐芥总DNA通过花粉管通道导入紫薇,获得耐盐转化幼苗。(1)生殖生物学特性。苯胺蓝染色法显示,从授粉到花粉萌发不足0.5h,开花后24h花粉管进入子房进行受精,由此确定花粉管通道导入外源基因的最佳时机是开花后22~24h。此外,紫薇花粉量大,萌发率高,大量花粉管穿过花柱进入子房,子房内胚珠多数,为外源DNA的进入提供更多的通道和机遇。(2)花粉活力。碘-碘化钾法和过氧化物酶法可以根据染色深浅准确判断花粉活力的强弱。(3)种子萌发和育苗。水和化学试剂浸种都能够促进平皿中紫薇种子萌发,其中45℃温水恒温4h、共浸泡24h的种子萌发率最高。相同处理的种子在基质中的出苗率均低于平皿中的发芽率。(4)盐胁迫对种子萌发及幼苗的影Ⅱ向。0.1%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%NaCl溶液抑制紫薇种子萌发。0.1%NaCl是3~4cm高幼苗的最适胁迫。(5)DNA提取及RAPD-PCR反...  (本文共160页) 本文目录 | 阅读全文>>

内蒙古农业大学
内蒙古农业大学

利用RAPD技术对我国不同地区绒山羊主要品种(类群)核DNA的分析

分别用Shannon信息指数和Nei指数对阿尔巴斯白绒山羊、阿拉善绒山羊、二郎山绒山羊、乌珠穆沁绒山羊、辽宁复县绒山羊五个群体的RAPD标记进行了分析。结果如下:(1)利用筛选出的12条引物检测到了64个等位基因位点,33个多态性位点,多态频率为51.56%。表明RAPD技术用于研究绒山羊核DNA遗传变异具有较高的的检出率和灵敏度。在12条引物中,S159多态性位点最多,效果最佳。引物的碱基序列为5’ACGGCGTATG3’。(2)绒山羊总群体的平均遗传多样性指数(H_(sp))为0.4575,群体内遗传多样性比率为67.43%,说明群体内的遗传变异高于群体间的变异。(3)辽宁复县绒山羊和阿拉善绒山羊的遗传多样性指数较低,这与它们的选育效果相一致,而乌珠穆沁绒山羊的遗传多样性指数最高,整齐度较差。(4)五个群体遗传距离指数和分子聚类关系表明:阿尔巴斯绒山羊、阿拉善绒山羊、二郎山绒山羊分化不明显。乌珠穆沁绒山羊与阿尔巴斯绒山羊、阿...  (本文共43页) 本文目录 | 阅读全文>>

新疆大学
新疆大学

草原兔尾鼠种群数量动态预测和线粒体DNA遗传多态性的研究

草原兔尾鼠(lagurus lagurus)为荒漠草原等地段的重要害鼠,国内只分布于新疆。由于其种群数量变动较大,加之它对草场的危害严重,长期以来一直困扰着人们。本文以样方捕净法等对草原兔尾鼠长期危害严重的新疆木垒县草原观测站进行观测研究,共捕获鼠类标本396只(204雄性,192雌性),将所有标本进行生物学测量,记录胚胎、子宫斑数、睾丸大小和性别等资料。以草原兔尾鼠体重为指标参考上颚臼齿咀嚼面的磨损程度划分出4个年龄组。我们的研究证实2000年9月草原兔尾鼠种群中以Ⅱ龄和Ⅲ龄鼠为主,种群年龄比值为0:4.62:5.24:1;2001年4月的种群年龄结构是2000年9月草原兔尾鼠种群发展的结果,以Ⅰ龄和Ⅲ龄鼠为主,分别占48.5%和40.6%,种群年龄比为4.46:0:3.73:1;2001年7月草原兔尾鼠种群的年龄结构中Ⅰ龄鼠很少,占7.2%,Ⅱ龄、Ⅲ龄和Ⅳ龄鼠所占比例差异不大,种群年龄比为1:5.58:3.61:3.41;2...  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

蓖麻蚕线粒体DNA片段的克隆和序列分析

利用蓖麻蚕花篮的蚕蛹为材料,提取蓖麻蚕线粒体DNA(mtDNA),与质粒pSK(+)(Amp~r)载体分别经EcoRI和XbaI双酶解,再经过连接、转化等,筛选出两个重组体,经酶切鉴定,证明获得了蓖麻蚕mtDNA EcoRI-XbaI1.0kb和3.0kb两个克隆片段,并进一步进行序列分析。对两个克隆片段进行了部分序列测定、比较和分析,推定蓖麻蚕mtDNAEcoRI-XbaI 1.0kb中包含细胞色素氧化酶亚基Ⅲ(COX3)基因,甘氨酸tRNA基因(tRNA-Gly)和NADH氧化还原酶亚基Ⅲ(ND3)基因5’端的部分序列(GenBank Accession NO. AF288145)。蓖麻蚕线粒体COX3基因编码框包含789个核苷酸,编码262个氨基酸的蛋白质;tRNA-Gly基因长度为66bp,与家蚕线粒体tRNA-Gly基因同源性为98.48%,缺少可变环;ND3基因的部分序列含151个碱基,与家蚕线粒体ND3基因的对应的...  (本文共57页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川农业大学
四川农业大学

家鹅线粒体DNA控制区Ⅲ部分序列遗传分析

本研究测得中国鸿雁(Anser cygnoides)家鹅7个品种45个体和灰雁(Anser anser)家鹅3个品种16个个体共61条体线粒体DNA控制区Ⅲ长度为423bp的部分序列。通过序列多态分析表明有6种单倍型,鸿雁家鹅和灰雁家鹅无共享单倍型,同时表明狮头鹅除具有鸿雁家鹅的所有单倍型外,还有两种独有单倍型;鸿雁家鹅群体遗传多样度Pi=0.110%,低于马和猪的遗传多样度,高于鸡的遗传多样度。结合GenBank中已发表的相关序列片段,对家鹅和雁属(Anser)野生鹅种序列变异比较分析,发现无论是家鹅还是野生种其控制区Ⅲ序列的变异都符合中性理论,即突变和随机漂变在分子水平的进化起着主导作用;经饱和分析表明序列的变异都未达到饱和状态,但是野生鹅种的转换/颠换比值(R)更高,雁属野生鹅种R=12,家鹅R=6.4,都是转换大于颠换。通过多种方法重建雁属部分鹅种的系统发育关系,探索家鹅的起源;研究家鹅群体遗传结构,表明鸿雁家鹅大部分鹅...  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

陕西师范大学
陕西师范大学

部分水生甲虫线粒体DNA序列的分析及系统进化研究

本研究用线粒体DNA的蛋白质编码基因细胞色素b(Cytb)作为分子标记,基于PCR扩增和测序技术,对我国水生甲虫4科9种10个个体之间的系统进化关系进行了初步的探讨。本文共测定了9种水生甲虫的线粒体DNA细胞色素b基因编码区—485bp,并用粪金龟科的粪堆粪金龟作为外群构建分子系统树,以期从分子水平获得它们的系统进化关系,并为其利用与防治提供分子生物学方面的依据。1.实验共获得9种水生甲虫线粒体DNA细胞色素b基因中间485bp的序列,其中龙虱科三个种四个个体,分别为:R. suturalis Macleay(ID_1与IE_1)、H. grammicus Cermar(IEc)、A. japonicus Sharp(ID_2);牙甲科三个种:A. mater Sharp(CKS_4)、B. elogatulus Jorden(ⅡA)、H. acuminatus Motschulsky(ⅢA);沼梭甲科二个种:P. chinen...  (本文共61页) 本文目录 | 阅读全文>>