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海藻糖合成酶的固定化研究

海藻糖在自然界中广泛存在于低等植物、细菌、真菌、酵母、昆虫及无脊椎动物中,在许多情况下,该糖是昆虫血糖的主要成分。海藻糖是一种非特异性的保护剂,似乎对所有的生物分子都具有一定的保护功能。它可以保护生物膜、蛋白质、脂质体及敏感细胞壁免受干旱、冷冻、渗透压的变化等造成的伤害,由于这些独特的生物学功能,海藻糖在工业上可用于不稳定食品、化妆品和医药的保存。本课题目的在于寻找一条可行的海藻糖生产途径—固定化酶法。具体的步骤包括:1、从土壤中分离获得菌株GX—0012,产生一种海藻糖合成酶,能转化麦芽糖合成海藻糖,进一步研究表明该酶是一种胞内酶。2、将菌株GX—0012进行大量的培养,富集发酵菌丝体,经超声破碎、浸提、离心后获得粗酶液。3、粗酶液经硫酸铵分级沉淀后,收集相应的活性部分,用葡聚糖凝胶进一步纯化,通过电泳来测定海藻糖合成酶的纯度和分子量。4、将粗酶液用壳聚糖凝胶固定化,制得固定化酶,固定化酶的活性分析是通过测定固定化酶与麦芽糖反  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

北京化工大学
北京化工大学

多孔硅表面修饰改性及其在海藻糖合成酶固定和正丁醇分离方面的应用

硅材料由于具有很好的生物亲和性,并且作为无机材料的一种,硅材料能够很容易的被修饰、改性以及功能化。同时,修饰改性的操作过程相对来说比较简单。硅材料具有很好的孔道结构,具有微孔、介孔以及大孔等不同的孔道分布;硅材料具有大的比表面积,较好的的尺寸分布以及比较好的机械强度。硅基材料表面很容易活化出大量的硅羟基,这为后续的一系列化学修饰提供了可能。所以说硅材料具有非常好的应用前景。正丁醇由于具有很好的工业化价值,不仅在生化领域有很好的应用,并且作为一种潜在的替代能源引起了越来越多人的关注。课题组通过重组大肠杆菌并且发酵生产了高温稳定性(50℃)的海藻糖合成酶。为了实现海藻糖的连续生产以及提高海藻糖合成酶的稳定性,采用固定化酶的工艺,通过共价偶联的方式,在提高海藻糖合成酶稳定性的同时,实现海藻糖的生产。这里选用硅材料来帮助实现海藻糖合成酶的固定化以及丁醇的分离。主要研究成果如下:使用吸附工艺实现对正丁醇的分离,所以在分离过程中吸附剂的选择...  (本文共71页) 本文目录 | 阅读全文>>

江南大学
江南大学

海藻糖合成酶的固定化研究

海藻糖是一种非还原性二糖,具有良好的理化性质以及特殊的生物学特性,在众多领域日益发挥重要作用。海藻糖合成酶是一种分子内转糖基酶,能以麦芽糖为底物,通过转糖基作用一步法生成海藻糖,工艺简单、易于调控、底物价廉,是工业化生产海藻糖一条重要途径。酶作为生物催化剂,具有高效、专一的催化特性,广泛应用于诸多领域。但游离酶易失活、纯化困难、难以重复利用等,增加了工业化应用难度和成本。固定化酶的应用提高了酶稳定性、可重复利用、易于底物分离等特性,为生物酶制剂的应用提供了更广泛的应用。固定化海藻糖合成酶生产海藻糖,结合海藻糖合成酶的简易工艺与固定化技术的优良特性,为工业化生产海藻糖提供新的途径。本文目的在于寻找一种固定化酶制备简易、固定化酶学性质良好的固定化方法,为海藻糖生产提供有效可行方案。通过分析固定化缓冲液体系以及固定化酶操作稳定性等因素,选择适宜的缓冲液和载体;通过考察载体制备工艺、固定化条件、固定化酶酶学性质,分析固定化酶可使用性。结...  (本文共53页) 本文目录 | 阅读全文>>

《化工进展》2004年10期
化工进展

以壳聚糖为载体固定化海藻糖合成酶

以壳聚糖为载体 ,采用戊二醛为交联剂的方法来固定海藻糖合成酶。研究结果表明 :在戊二醛质量分数为 0 5 %、液态酶与壳聚糖凝胶的配比为 1∶1、交联pH值为...  (本文共4页) 阅读全文>>

《安徽农业科学》2012年10期
安徽农业科学

介孔分子筛固定化海藻糖合酶的研究

[目的]对介孔分子筛固定化海藻糖合酶进行研究。[方法]以基因工程菌所产海藻糖合成酶为材料,利用介孔分子筛MCM-41作为载体固定化海藻糖合成酶,并对固定化条件和固定化前后的海藻糖合酶性质进行比较研究。[结果]海...  (本文共4页) 阅读全文>>

《微生物学通报》2003年06期
微生物学通报

海藻糖合成酶活性受固定化处理过程影响的研究

在麦芽糖苷基海藻糖合成酶(MTSase)和麦芽糖苷基海藻糖水解酶(MTHase)双酶的作用下,淀粉可转化为海藻糖,但是其转化率较低。文中采用多种固定化载体进行酶固定化研究,发现通过经戊二醛与壳聚糖交联后的载体与酶液作...  (本文共5页) 阅读全文>>