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卡氏肺孢子虫特异性DNA探针的制备及其实验应用

核酸分子杂交作为分子生物学的基本技术已被广泛用于医学基础和临床研究。因其具有灵敏度高、特异性好和相对简易的优点,已被用于多种病原体的检测。本研究采用醋酸泼尼松龙诱导建立卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocystis carinii pneumonia,PCP)大鼠模型,获得实验所需的基本材料。以随机引物法制备地高辛标记的非放射性探针,采用斑点杂交检测大鼠模型肺组织和患者临床标本中的卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carinii,Pc)DNA。1.PCP大鼠模型的建立、Pc检测及实验标本的采集采用SD大鼠,醋酸泼尼松龙腹股沟皮下注射2个月,诱导建立PCP动物模型。无菌操作取出死亡大鼠的肺组织,切面做印片,分别进行吉氏染色和快速银染,显微镜下查找Pc。从每只大鼠的肺组织中分离Pc包囊和滋养体,提取DNA用于PCR反应。琼脂糖凝胶电泳后紫外灯下观察,见到约350bp大小的DNA条带为阳性。其余的肺组织保存于-20℃备用。结果:病原  (本文共56页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国人兽共患病杂志》2005年06期
中国人兽共患病杂志

卡氏肺孢子虫特异性DNA探针的制备及其实验应用

卡氏肺孢子虫(Pneumocystiscarinii,Pc)肺炎(PCP)是艾滋病患者最常见的机会性感染,也是导致其死亡的主要原因。PCP在恶性肿瘤、器官移植、自发或原发免疫缺陷和自身免疫性疾病等免疫低下患者中也很容易发生。PCP患者症状重,体症轻,病死率高,早期诊断尤为重要。目前的诊断方法有病原学、抗原抗体检测以及PCR等分子生物学技术,但各种方法因其各自的局限性而不能被推广应用。本研究采用半抗原地高辛标记制备随机引物探针,检测其敏感性和特异性后用斑点杂交法检测感染Pc的大鼠肺组织和PCP患者临床标本中的PcDNA。1材料与方法1.1材料1.1.1标本来源大鼠PcDNA:大鼠模型的建立及PcDNA的获得见参考文献〔1〕。参照标本:伯氏疟原虫由南京医科大学形态学实验室提供,恶性疟原虫由江苏省血吸虫病防治研究所提供,弓形虫由南京医科大学附属医院妇产科提供,白细胞DNA由南京医科大学流行病学教研室提供。PCP患者临床标本由南京医科大...  (本文共3页) 阅读全文>>

《包头医学院学报》2015年11期
包头医学院学报

染色体核型分析与八探针间期荧光原位杂交检测急性淋巴细胞白血病儿童细胞遗传学异常

急性白血病是一类造血干细胞异常的克隆性恶性疾病,在骨髓和其他造血组织中,白血病细胞大量增生、积聚并浸润其他器官和组织,抑制正常造血功能,临床表现为贫血、出血、感染及各器官浸润。白血病在儿科恶性肿瘤的发病率中居第1位[1],急性白血病常进展迅速。根据白血病细胞的类型,临床上又分为急性淋巴细胞性白血病(acute lymphoblas-tic leukemia,ALL)和急性非淋巴细胞性白血病(acute non-lymphocytic leukemia,,ANLL)两大类。ALL是一种起源于B系或T系淋巴祖细胞的肿瘤性疾病,其细胞遗传学表现对于临床治疗方案的确定具有重要的指导意义[2]。检测白血病患者细胞遗传学异常的传统方法为染色体核型分析,但急性白血病患者的染色体制备较难,尤其是ALL患者的染色体易成团、不易辨别且显带不清,导致常规细胞遗传学分析常出现困难[3]。间期荧光原位杂交技术(fluorescence in situ h...  (本文共2页) 阅读全文>>

《现代检验医学杂志》2006年05期
现代检验医学杂志

Lisa-500全自动生化分析仪吸样探针的修复

我科在使用法国L isa-500全自动生化分析仪过程中,发生了吸样探针与试剂盘碰撞而发生弯曲,由于吸样探针为特殊金属制成,可塑性差,难以复原,复原过程中发生了吸样探针断移,由于吸样探针价格昂贵,重新购置又不易及时获得,故我们采取以下方法修复吸样探针,效果满意。现将修复过程介绍于下。吸样探针断移易发生在上端近螺帽接口处,旋下吸样探针螺帽接口,先将断移处用302胶粘剂(哥俩好)吻合粘接并封牢,为防胶剂堵塞管腔,可用针灸针来回...  (本文共1页) 阅读全文>>

《中国集成电路》2002年03期
中国集成电路

探针台技术

半导体测试在半导体制造工程中的作用越来越重要。探针台作为硅片测试中重要的辅助设备,起着非常重要的作用。随着集成电路制造的不断发展,集 一、X、Y轴控制采用摩尔光栅闭环控制系统;成电路变得越来越小,IC的内部结构越来越复杂,加工要求也越来越高。IC加工的小型化,复杂化对用于测试摆正用的探针台提出了以下要求(如表l)。 针对IC制造不断发展的要求,各个探针台生产厂家,有着不同的解决方法。本文介绍东京精密公司在探针台制造中采用的技术,说明如何满足的要求。 Y驯-冷尔光姗,’鑫{命黄数拟‘今达控制器叫卜~~..今 X轴亡匕墨匕了匀一编扩二器反馈致据,.rl们台移动闭环控制交流’今达编码斟IC制造┌──────────────┬─────────────┐│lc’制造的发展 │对探针台的要求 │├──────────────┼─────────────┤│引线抓娜l又以D尺寸小.竹即窄 │提!拓X一Y摆正位置精度 ││ │提高探针对准性能...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国计量》1997年11期
中国计量

基于QVINDOS的斜向探针校正方案

德国莱茨(Leitz)三坐标测量机所配QVINDOS语言系统中,对于探针校正设计了CNC自动校正功能。只要操作者控制被校探针,沿针杆方向探测一下校正球的极点(最高点),CNC程序就会控制其后的校正探测过程,直至过程结束。这一功能对于横平竖直的探针使用十分方便。但是,对于斜向探针如下图,操作者在球极点处探测一点之后,往往会出现探针碰撞问题,经常需要反复尝试多次,才能成功地完成校正。这样既影响了测量工作,也会因为经常碰撞而对探针和校正球造成损害。笔者发现,要使斜向探针正常校正,关键在于手动探测极点时控制好探测的法向方向,也就是说,探测极点既要保证点的坐标位置上确,还要保证探测的法向方向正确。为此,每次都应极小心地控制操作手柄...  (本文共1页) 阅读全文>>

《微电子技术》1995年02期
微电子技术

探针软接触技术

一、引言研究探针软接触技术的目的是研制软探针,解决P/P”外延片电阻率的无损伤监控测试问题。根据国际族材料制造技术的发展趋势,结合我国硅材料制造中的无损伤监控测试的现状和发展,联系到我公司大规模和超大规模集成电路生产技术的成熟和发展,测试手段必须走在生产、监控和测试技术的前面。因此,研究探针的软接触技术和制造软探针的任务,就迫在眉睫了。探针的软接触技术必须具备三个条件:①探针的针头与被测物进行机械和电气性能接触时,探针本身必须是良导体,即接触测试时由软银针引入的串联体电阻,对测试结果的影响可以忽略不计;②软探针与被测物表面重复接触时,不划伤、不破坏、不沾污被测物表面,并且保持被测物表的理化特性不变;③必须能够严格控制软探针针头与被测物表面的接触面积保持常数。总之,新研制的软探针必须满足空间分群力高、重复性好、稳定可靠等要求。目前,国外有几家大公司投入相当大的力量对探针软接触技术进行研究,他们已经制成的软探针,大都是毛细管结构的汞...  (本文共3页) 阅读全文>>