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小鼠原代细胞彗星试验的建立及应用

彗星试验(comet assay)又称单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis assay,SCGE),是一种在单细胞水平上检测DNA损伤与修复的方法。该方法具有简便、快速、灵敏、所需样品量少、重复性好、无需放射性标记等优点,可用于体内外各种实验,已迅速成为近年最广泛应用的DNA损伤检测方法。随着该技术的发展、成熟和完善,已被引进环境卫生学领域,在检测和评价环境因素的遗传毒性、环境与职业人群的生物监测、环境生态监测、环境流行病调查等方面,发挥着重要的作用。目前彗星试验多采用细胞株,细胞株可以通过细胞培养获得,相对说,细胞培养技术复杂、试验周期长、费用高。因此本研究试图筛选一种取材方便、制作简单、价格低廉、省时、经济、实用的动物原代细胞应用于彗星试验,同时与彗星试验常用的受试细胞V79细胞进行对比研究,拟建立小鼠原代细胞彗星试验,并用新建方法对泸州市饮用水遗传毒性进行检测,对新方法的可靠性和实  (本文共57页) 本文目录 | 阅读全文>>

新疆农业大学
新疆农业大学

彗星试验方法的初步研究

彗星试验方法的初步研究彗星试验(Comet assay)又称单细胞凝胶电泳试验(SCGE),是一种快速、灵敏的检测单个细胞DNA断裂的新技术,由于其具备其它试验无可比拟的优越性,因此应用前景十分广泛。为了在本实验室建立该方法,扩展该方法在农药安全性评价中的应用,本研究采用公认的DNA断裂剂重铬酸钾溶液为试验材料,设5个试验剂量,分别为12.5、25.0、50.0、100.0、500.0μmol/L, 处理CHL细胞2个小时,然后对CHL细胞进行单细胞凝胶电泳试验。从细胞的彗星图和试验数据分析可以看出,随着重铬酸钾溶液浓度的增大,彗星尾长明显增长,说明重铬酸钾溶液剂量越大,对CHL细胞DNA的损伤越严重,且不同浓度重铬酸钾溶液与CHL细胞DNA损伤之间存在着明显的剂量-效应关系。这些结果表明在本实验室条件下基本建立起来了该方法,并且找出了适合本实验室条件下的CHL细胞彗星试验方法的条件:最合适的制片条件,改良的细胞染毒方式,受试物...  (本文共67页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国食品卫生杂志》2019年04期
中国食品卫生杂志

体内碱性彗星试验法检测纳米氧化锌遗传毒性

目的利用体内碱性彗星试验方法,检测长期给予纳米氧化锌颗粒(ZnO NPs)对大鼠的遗传毒性作用。方法结合扩展一代生殖毒性试验,使用13周龄的亲代SD大鼠,经口每天灌胃给予ZnO NPs 0、7、50、350 mg/kg(纳米尺度分散状态最大浓度),记录体质量变化并观察。70 d后每个剂量组取亲代大鼠雌雄各10只处死后取乙二...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国新药杂志》2015年23期
中国新药杂志

对碱性彗星试验主要影响因素的探讨

彗星试验在化合物遗传毒性评价中的应用日益广泛,ICH S2(R1)已将肝脏彗星试验列为第2个组织/终点的体内试验;经济合作与发展组织(Organization for Economic Co-operation and Development,OECD)体内哺乳动物碱性彗星试验的指导原...  (本文共5页) 阅读全文>>

《药物评价研究》2014年03期
药物评价研究

体内彗星试验在药物遗传毒性评价中的研究方法

体内彗星试验是采用单细胞凝胶电泳的方法检测体内DNA损伤的技术。具有灵敏度高、操作简便、经济快速等优点。随着遗传毒性研究的发展,体内彗...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国新药杂志》2014年17期
中国新药杂志

体内彗星试验方法学研究进展

体内彗星试验是一种简单的DNA损伤检测方法,可检测单链断裂、双链断裂、碱不稳定位点、DNA-DNA和DNA-蛋白质交联等。2011年11月,修订完成的ICH S2(R1)指导原则将体内彗星试验列入遗传毒性标准组合体内首选的第...  (本文共4页) 阅读全文>>