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不同培养条件对鸭疫里氏杆菌外膜蛋白表达的影响及外膜蛋白A基因片段克隆与表达

鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)感染是养鸭业重要疾病。现发现有21个血清型,各血清型之间的保护力很弱。国内外虽然已经有较多的研究,但对毒力因子,及保护性抗原的研究还未充分展开。外膜(Outer membrane)是革兰氏阴性菌细胞壁中的特有结构,位于外膜上的蛋白总称为外膜蛋白(Outer membrane proteins,Omps)。某些外膜蛋白与细菌的毒力及免疫原性有关。用加入金属离子螯合剂EDTA的TSB(胰酪胨大豆肉汤)培养基,培养鸭疫里氏杆菌RA1型,将未加入EDTA的TSB培养的RA1型菌作对照。比较后发现,加入EDTA组的Omp的SDS-PAGE图谱发生改变,从34kD-100kD增加了多条蛋白条带,特别是39 kD,60kD和110kD蛋白浓度较大。用鸭康复血清作为一抗,自制酶标兔抗鸭为二抗作Western-blot,与对照组相比,实验组增加了39kD条带。实验证明,加入金属  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物工程学报》2016年04期
生物工程学报

基于基因组编辑技术的大片段克隆新策略

基因组大片段克隆技术是合成生物学研究领域关键的使能技术。传统的大片段克隆技术获取目的大片段的手段存在各种缺陷,比如随机建库克隆需要依靠高通量筛选;PCR难以扩增10 kb以上片段,从小片段拼装费时费力且突变率高;基于限制性酶切连接难以找到片段两...  (本文共8页) 阅读全文>>

《种子》2007年05期
种子

贵农775抗条锈病基因标记的相关片段克隆及荧光原位杂交

小麦抗病种质贵农775是原贵州大学张庆勤教授利用远缘杂交育成的著名抗源材料,在抗病育种和生产上具有重要的应用价值,本研究利用分子标记的相关片段克隆和荧光原位杂交技...  (本文共4页) 阅读全文>>

权威出处: 《种子》2007年05期
《中国生物工程杂志》2004年03期
中国生物工程杂志

大片段克隆载体研究进展

DNA克隆技术是分子生物学研究中一项重要的技术手段。自第一个质粒载体pSC1 0 1作为克隆载体以来 ,随着分子生物学技术的发展 ,克隆载体的整体结构、容载能力和转化效率都有了很大的改善。尤...  (本文共5页) 阅读全文>>

《南京师大学报(自然科学版)》2007年04期
南京师大学报(自然科学版)

DNA克隆载体的“三片段克隆法”改造策略

将一个或多个DNA片段克隆至载体是分子生物学研究中最常用的技术之一.本研究使用新颖的Red/ETDNA重组克隆技术原理一步法将结合转移片段oriT,阿普霉素抗性基因Am和链霉素抗性基因(rpsL)克隆至常用的克隆载体pBlues...  (本文共4页) 阅读全文>>

《第三军医大学学报》2006年06期
第三军医大学学报

难测序噬菌体基因组PaP1的大片段克隆及测序

目的采用大片段克隆策略对难测序铜绿假单胞菌噬菌体PaP1基因组进行克隆及测序。方法用限制性内切酶AatⅡ将噬菌体PaP1基因组DNA切成几个大片段,分别进行末端修饰后与线性化的大片段克隆载体pYLTAC7连接,将连...  (本文共4页) 阅读全文>>