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富硒及高谷胱甘肽酵母菌选育的研究

本文对高生物量富硒酵母的菌种选育和培养条件初步优化进行了研究;并对γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因GSH-I进行了克隆,在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中表达,有效提高了酿酒酵母的谷胱甘肽(GSH)生成量。从300株工业生产用酵母中,筛选出对亚硒酸钠抗性较高的菌株。再从中选出生物量较高的二倍体菌株S.cerevisiae ZY-67和细胞硒含量较高的二倍体菌株Saccharomyces kluyveri ZY-198,对其进行生孢子培养和单倍体分离。用亚硝基胍(NTG)对生物量较高的单倍体ZY-67-18(α)和细胞硒含量较高的单倍体ZY-198-21(α)进行诱变,从突变株中选出生物量较高的ZY-67-18-34(α,leu~-)和硒含量较高的ZY-198-21-6(α,trp~-)作为融合亲株。通过原生质体融合,选育具有双亲的优良性状,且遗传性状稳定的融合子ZFF-28,其硒总含量分别是原始亲株ZY  (本文共66页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中学生物教学》2017年13期
中学生物教学

摭谈中学生物实验中的“颜色”

1 还原糖的鉴定还原糖是指带有游离醛基(一CHO)的单糖或二糖,教材中涉及的葡萄糖、果糖、麦芽糖、半乳糖、乳糖和脱氧核糖等都是还原糖。在水浴加热的条件下,还原糖能与斐林试剂中的Cu(OH)2发生氧化还原反应,使Cu2+被氧化成Cu20沉淀。自于Cu2+是蓝色3 线粒体的观察线粒体是真核细胞进行有氧呼吸的主要场所,具有特殊的双层膜结构,尤其是其内膜向内折叠形成“嵴”,增大了表面积。线粒体内膜表面分布着多种特殊的呼吸酶(构成电子传递链),其也为线粒体的观察提供便利。其中有一种酶叫作细胞色素氧化酶,的,而Cu20是砖红_,顔反应体系_觸__賴粒胸_那绿(〗屢g_B)作为染料,蓝变棕再变成砖红色。非还原浦没有游离麵基,不能与斐林试剂发生类似飯应。人1的疋蛋,白质是自右干傾^細ffT脱,/嫌合反一触胃细胞的其他部位却无法与健那绿结合。4 DNA的检测与观察DNA是自鮮巾绝大錄生物(除傾病毒外)雌-种高分子聚合物細麵之间财謹隨传鍾,細紐向平...  (本文共2页) 阅读全文>>

《科学通报》1988年06期
科学通报

用YEPD丰富培养基筛选酵母PR03~+转化子的方法

‘1979年Brandriss首次分离到啤酒酵母的三株脯氨酸生物合成酶基因的突变型,并且发现凡是酵母脯氨酸缺陷株都不能在丰富培养基(YEPD)上生长[lJ.过了二年才搞清楚,这是二由于啤酒酵母的脯氨酸转运系统受到丰富培养基中大量按离子的阻遏而造成的切. 我们用穿梭质粒YRp7以,l(图la)构建的酵母基因库来转化大肠杆菌proC突变株,以互补法t,1克隆到了酵母PR 03基因〔图1),含PR 03基因的质粒定名为pCBy203t,](图lb). 通过醋酸锤转化方法’”,用peByZo3转化啤酒酵母MB299一7A(。,pro3,lys,Brandiss〔‘,)卜在丰富培养基上,pr。~突变株不能生长,而转化子由于含有PRO3基因的质粒而能够生长。用合成选择培基(sD+ly:)和丰富培养基(YEPD)都可以筛选到相同数目的MB299~7A的PRO3+转化子(~1 00/产gDNA),这说明丰富培养基能够直接用来筛选 PRo十转化子...  (本文共2页) 阅读全文>>

《遗传学报》1989年04期
遗传学报

萘质粒转移到大肠杆菌中合成靛蓝的研究

靛蓝是一种广泛用于印染、医药及食品工业的染料。这种染料最初是从槐蓝属(标digofor。)植物中提取的。1883年它的化学结构被阐明后,才用化学合成方法制备。微生物合成靛蓝的最早报道见于1928年,是从土壤中分离到一种氧化叫噪假单胞菌(pse,d000oas Iodoloxidoos)通过氧化名l噪生成的〔‘,。但是,合成机理直到六+年代中期才弄清楚。 近年来,随着遗传工程技术的迅速发展,国外一些研究者把假单胞菌蔡降解质粒上的蔡双加氧酶基因片段或二甲苯氧化酶基因片段克隆在pBR 322质粒上,转移到大肠杆菌中,选育产生靛蓝的菌株,取得了很好的结果l’..1。 我国用微生物合成靛蓝的研究,迄今尚无报道。我们利用含有蔡降解基因的质粒的假单胞菌,通过细菌接合和转化的方法,把这种质粒转移到大肠杆菌中,已经获得接合子和转化子。这些接合子和转化子不仅能降解蔡,而且能合成靛蓝。现将结果报告如下。材料与方法 (一)供试,株的主要特性 1.供体菌...  (本文共7页) 阅读全文>>

《生物技术通报》1989年01期
生物技术通报

生物防治因子

在枯草杆菌中的复制呈热敏感的二苏云金芽抱杆菌质粒的定性[英〕/Lerecl-ierobiol.Lett一理17~422[译自DBA,一1988, 1 988,88一05613二抱杆菌(Boe‘1105 ih“r‘,,91-2分离到2个隐蔽质粒pHT和pHT103o(分别长8.6和15 kb),接到载体质粒pJH 101并用以转化大HB101和枯草杆菌菌株168氨节青霉素或四环素的Luria-成培养基上筛选出转化子。物理图谱上迷8.6kb质粒带有转座子Tn4返30,而15kb质粒则携有丁n 4430外加一拷贝插人序列工5231因子。在限制性图谱上鉴定了复制区域,并分析了所获含复制区的质粒在枯草杆菌中的分离稳定性。这些质粒的稳定性不依赖于质粒的大小,与温度呈负相关;在无选择压力条件下,51℃培养30个世代之后,两种质粒全部消失。转座子的存在以及热敏感复制特性使得pHTlo00和pHTlo30成为研究苏云金芽抱杆菌和革兰氏阳性菌中的复...  (本文共3页) 阅读全文>>

福建农林大学
福建农林大学

银耳生物反应器的基础研究

本研究以银耳芽孢为材料,进行如下研究:采用分子标记筛选确定用作转化的银耳受体菌株;优化电激转化条件;构建蘑菇gpd启动子调控的egfp基因银耳表达载体,验证egfp基因在银耳中的表达;克隆银耳自身的gpd启动子,利用egfp基因验证银耳的启动子活性;构建银耳gpd启动子调控人胰岛素基因银耳表达载体转化银耳。具体结果如下:1银耳受体菌株的筛选菌株筛选结果表明,采用ISSR和RAPD两种分子标记,三个引物将14个菌株分为五类,其中第V类包含的9个菌株在DNA水平上没有任何差异,说明银耳菌种同种异名现象比较严重。根据树状分析图挑选出有一定差异的5个菌株,衡量生长速度,测定各菌株芽孢产量,结果表明T0006产量最高,生长速度最快,T0001和T0026次之。但经抗药性测定,T0006对卡那霉素和潮霉素有抗性,T0001对潮霉素敏感性较强,因此根据以上初步筛选的结果最后确定T0001作为转化受体菌株,潮霉素为筛选标记。2高效电激转化体系的...  (本文共128页) 本文目录 | 阅读全文>>