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HCC患者PBMCs中HBV逆转录酶P基因的表达与X、P基因整合的研究

目的:研究在原发性肝细胞癌(HCC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中乙型肝炎病毒(HBV)DNA多聚酶/逆转录酶P基因的表达与X、P基因整合的关系,阐明HBV的整合机制以及肝细胞癌的发病机制。方法:选择HBsAg阳性的原发性肝癌病人40例,其中Ⅰ期患者4例,Ⅱ期14例,Ⅲ期22例;血清HBVDNA阳性7例,HBVDNA阴性33例;另选择5例HBsAg阴性的原发性肝癌患者和5例HBsAg阴性的健康体检者作阴性对照和健康对照。提取全血中PBMCs,分别进行PBMCs中细胞基因组总DNA和总RNA提取,其中总RNA提取后经无RNA酶的DNA酶Ⅰ消化去除残存的基因组DNA后逆转录合成cDNA。设计并合成HBV的P基因及X基因引物P1 P2及X1 X2,以逆转录合成的cDNA为模板,用编码DNA多聚酶/逆转录酶的P基因引物行RT-PCR扩增,以检测HBV逆转录酶P基因在PBMCs中的表达情况;以提取的总DNA为模板,分别用P基因及X基  (本文共49页) 本文目录 | 阅读全文>>

第四军医大学
第四军医大学

HBV转基因小鼠孕前期及孕期应用乙肝疫苗的实验研究

乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染是母婴传播的一种主要途径,也是造成人群中大量HBV携带者的原因之一。研究表明,母血中的表面抗原(HBsAg)浓度与宫内感染发生率成正相关,即母血中的HBsAg浓度越高,宫内感染发生率越高。因而降低母血中的HBsAg浓度对于降低宫内感染发生率有重要作用。本研究运用免疫学、病理学和毒理学的技术方法,分析HBV转基因(HBVTg)鼠血清中HBsAg浓度在应用乙肝疫苗前后的变化,以及应用乙肝疫苗对孕鼠和子鼠的安全性影响,探讨应用乙肝疫苗孕期治疗的可能性,从而为孕期HBV的抗病毒治疗提供动物实验依据。方法①14只HBV Tg雌鼠随机分为A、B两组,12只普通BALB/C雌鼠亦随机分为C、D两组。其中,A组为试验组,B、C和D组为对照组。②A、C组鼠于孕前3wk和怀孕当天分别腹腔注射乙肝疫苗10μg/只,B、D组同时腹腔注射生理盐水1mL/只。③4组雌鼠均于首次给药前、首次给药3 wk后、首次给药6 wk后采血...  (本文共59页) 本文目录 | 阅读全文>>

《实用肝脏病杂志》2016年05期
实用肝脏病杂志

39例成人急性乙型肝炎患者血清HBV基因变异检测及其临床意义探讨

已有关于耐药变异病毒引起急性乙型肝炎(Acute hepatitis B,AHB)[1~4]、抗病毒药物相关的疫苗逃避变异病毒(Antiviral drug-associated potentialvaccine escape mutant,ADAP-VEMS)感染者再次接种乙肝疫苗而产生HBs Ab成功的报道[5,6]。本文对我院收治的明确诊断为AHB患者进行HBV S区、P区、前C区(Pre C)和基本核心启动子(Basal corepromoter,BCP)区基因序列测定,了解有无变异病毒,观察患者临床特点及转归情况。1资料与方法1.1研究对象2010年12月至2014年1月北京佑安医院国际医疗部收治的AHB患者39例,AHB诊断参照2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会和肝病学分会联合修订的《病毒性肝炎防治方案》的标准[7],同时本研究将其定义为:既往无乙型肝炎病毒感染史(发病前半年内体检HBs Ag阴性),无乙型肝...  (本文共4页) 阅读全文>>

《重庆医学》2017年16期
重庆医学

HBV宫内感染危险因素的病例对照研究

全球大约有2.4亿人感染乙型肝炎病毒(HBV)[1]。在中国,HBsAg阳性率为总人口的10%~15%[2-3]。据报道,中国孕妇的血清HBsAg阳性率在5.9%~21.3%[4-5]。胎儿或婴儿感染HBV后有90%的可能性发展为慢性乙肝,而其他人群的则不超过5%[6]。母婴传播的途径很多,如宫内感染、分娩、喂养、日常接触及免疫接种失败[7-8]。从1992年在全民推荐使用乙肝疫苗后,HBsAg阳性率明显下降。然而由于疫苗接种效果有限等各种原因[9-10],HBV宫内感染依然不能完全被阻断,依然有大约20%的婴儿在联合免疫接种后依然被感染[4,11-12]。关于HBV宫内感染的影响因素和机制尚不完全清楚,因此探索HBV宫内感染的危险因素对于预防和控制HBV宫内感染具有重要意义。本文采用了病例对照研究的方法对HBV宫内感染危险因素进行研究,为预防HBV宫内感染提供科学依据。1资料与方法1.1一般资料选择2013年4月至2015年5...  (本文共4页) 阅读全文>>

《广东医学》2017年13期
广东医学

HBV相关慢加急肝衰竭患者血浆抗可溶性肝抗原抗体的检测及意义

研究发现在急性肝衰竭患者中自身抗体的阳性率显著升高,其中抗可溶性肝抗原抗体(anti-solu-ble liver antigen antibody,抗SLA)阳性率在急性肝衰竭中达到21.9%,提示自身抗体的表达可能参与了肝衰竭的疾病进程[1]。在慢性乙型肝炎病毒(hepa-titis B virus,HBV)感染的患者中,抗SLA在慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B,CHB)、肝硬化(liver cirrhosis,LC)、肝细胞癌(hepatocellular carci-noma,HCC)患者中均能检测出[2-6]。然而,在HBV相关的慢加急性肝衰竭(HBV related acute-on-chronic liver failure,H-A)患者中,抗SLA的表达情况尚不清楚。1资料与方法1.1一般资料H-A患者为南方医院和广州市第八人民医院2015年3月至2016年2月的住院患者,诊断符合20...  (本文共4页) 阅读全文>>

《内蒙古中医药》2017年13期
内蒙古中医药

大剂赤芍治疗HBV相关慢加急性肝衰竭1例

慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic.liver.failure)临床主要表现为黄疸、腹水、凝血功能障碍及肝性脑病。是一组在慢性肝病的基础上,急性肝损害导致的以急性肝功能失代偿为主要表现的临床综合征[1]。HBV相关慢加急性肝衰竭约占肝衰竭的80%以上,是临床上最严重的肝病,其进展迅速,病情凶险,预后极差,病死率可达60%~80%,与肝细胞短时间大量坏死有关[2]。本文介绍我科院采用中西医结合办法大剂量应用赤芍中药成功治疗HBV相关慢加急性肝衰竭1例。患者女,27岁,农民,“间断乏力、纳差17年,加重伴目黄1周”为主诉于2016年9月3日入院。患者17年前查乙肝五项HBs Ag、HBe Ag、HBc Ab均阳性,曾先后口服拉米夫定片(0.1g,1次/日)及替卡韦分散片(0.5mg.1次/日)抗病毒治疗,均自行停药,后未定期复查及治疗。入院前1周因身困乏力,伴纳差,脘腹胀满,恶心、呕吐,于外院查:HBVDNA.2.54...  (本文共2页) 阅读全文>>