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苏云金芽孢杆菌CrylAa、CrylC的协同作用和同源重组的研究

鳞翅目夜蛾科害虫甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)是一类危害极其严重、抗性上升较快的世界性害虫。目前发现的大部分苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)晶体蛋白对其无毒或毒力较低,特别是对高龄幼虫的毒力更低。Cry1Ca是一种对甜菜夜蛾具有毒杀作用的晶体蛋白,但毒力依然较低,难以达到野外应用的要求。而Cry1A类蛋白对鳞翅目其他昆虫具有很高的毒杀作用,并广泛用于农业害虫的控制中,但对甜菜夜蛾等害虫的毒力很低。已有的研究结果表明Cry1Ca蛋白的结构域(Domain)III决定晶体蛋白对甜菜夜蛾的特异性,因此,在研究和确定Cry1Aa与Cry1Ca蛋白对甜菜夜蛾协同杀虫作用的基础上,利用同源重组技术进行Cry1Aa和Cry1C之间的Domain替换,可望获得高效的融合蛋白,为甜菜夜蛾等夜蛾科害虫的控制提供工程菌株。cry1Aa基因和cry1C基因分别来源于质粒pMPCV1和pMPCV2。p  (本文共46页) 本文目录 | 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

斑马鱼中受生物钟调控及光应答的转录因子E4bp4-2b通过D-box抑制crylaa的表达

生物钟是生物体内的计时机制,在生理、生化和行为等水平调节生物体的生命活动。生物钟的异常可以导致失眠、精神障碍甚至癌症等许多疾病。生物钟调节的分子机制主要是CLOCK:BMAL1异二聚体做为正向调节因子绑定到负向调节因子(per,cry)的启动子区域的E-box,启动负向调节因子的转录。负向调节因子在细胞浆内翻译后,形成PER:CRY异二聚体,入核与CLOCK:BMAL1相互作用,解除了CLOCK:BMAL1的转录激活作用,完成一个周期的运行。在鸡和小鼠的研究中发现,E4bp4作为亮氨酸拉链转录因子,能够识别绑定生物钟基因的D-box元件抑制其表达,由此参与生物钟调节。在斑马鱼中,由于基因组的大复制,存在六个e4bp4的同源基因。斑马鱼e4bp4如何参与生物钟调节目前尚不清楚。本研究深入研究了其中的e4bp4-2b(e4bp4-5)。荧光定量PCR的方法表明,在LD(light/dark)和DD(dark/dark)的情况下,e4...  (本文共83页) 本文目录 | 阅读全文>>