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野外放归大熊猫和圈养大熊猫肠道正常菌群的研究

本工作采用常规细菌培养和鉴定方法对四川卧龙中国保护大熊猫研究中心1只放归亚成体大熊猫(祥祥)和3只圈养亚成体大熊猫(福福、林阳、林蕙)肠道正常菌群的种类和数量进行了比较研究,结果鉴定出14种菌种。它们分别是埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、变形杆菌(Proteus)、沙门氏菌(Salmonella)、小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersiniaenterocolitica)、粪链球菌(Streptococcus faecalis)、葡萄球菌(Staphylococcus sp.)、芽孢杆菌(Bacillus sp.)、酵母菌(Yeasts)、乳杆菌(Lactobacillus)、类杆菌(Bacteroides)、双歧杆菌(Bifidobacterium),小韦荣氏球菌(Veillonella parvula),空肠弯曲杆菌(Campylobacter jej  (本文共72页) 本文目录 | 阅读全文>>

《四川大学学报(自然科学版)》2004年06期
四川大学学报(自然科学版)

野外放归大熊猫和圈养大熊猫肠道正常菌群的研究

为更好地保护大熊猫这一中国特有的濒危物种,2003年7月四川卧龙中国保护大熊猫研究中心启动了大熊猫野外放归工程,这项工程旨在将人工圈养的大熊猫放归大自然,补充野生大熊猫种群数量,改善野生大熊猫遗传的多样性,同时进一步壮大圈养种群,达到长期保存这个物种的目的,这项实验的关键在于要提高圈养大熊猫在野外的存活率.研究表明,大熊猫趋于濒危的主要原因之一是疾病致死,在致死大熊猫的各种疾病中,以肠道疾病最为严重[1].因此,研究放归大熊猫和圈养大熊猫的肠道菌群的种类和分布对预防和诊断大熊猫胃肠道疾病,提高野外放归的存活率具有十分重要的意义.目前,圈养大熊猫的饲料主要由高蛋白高热量的精饲料构成,食谱丰富,营养水平高,而放归后大熊猫的主食将变为以竹子为主的高纤维低热量野生植物,食物结构发生很大转变.研究表明,大熊猫易因食物结构的转变而发生胃肠道疾病,并影响其生长发育,甚至造成死亡[1,2].本实验的目的就是要研究放归大熊猫和圈养大熊猫的肠道菌群...  (本文共4页) 阅读全文>>

四川大学
四川大学

野外放归大熊猫肠道菌群变化的研究

本工作主要研究大熊猫放归野外后肠道菌群的变化,包括菌群的种类、分布以及随季节的变化规律,为四川卧龙中国保护大熊猫研究中心启动的大熊猫野外放归工程提供放归大熊猫肠道菌群变化情况的资料,以保证放归后大熊猫饲料的合理搭配,使放归大熊猫能够顺利地度过环境和食物结构的转换期,避免肠道疾病的发生,从而提高其存活率。选择四川卧龙中国保护大熊猫研究中心的一只野外放归亚成体大熊猫和其圈养双胞胎兄弟作为研究对象。粪样采集从2004年1月至12月,运送采用好氧和厌氧两种运送培养基分别运送的方法,样品立即于当日按常规方法进行稀释,接种和计数。根据已报道的肠道常见菌,选择15种选择性培养基,按照检测对象的不同,分别在不同温度下进行需氧或厌氧培养。其中,厌氧培养采用碱性焦性没食子酸法。鉴定主要依据伯杰细菌鉴定手册,采用传统的形态和生理生化特征相结合的方法。结果从放归大熊猫粪便中分离出13种菌,它们分别是埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli)、产...  (本文共72页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川农业大学
四川农业大学

PCR-DGGE技术分析大熊猫放归过程中肠道菌群的变化

大熊猫属于世界濒危旗舰物种,由于栖息地的破碎化使得其种群孤立,甚至出现小种群灭绝。为了补充或者复壮小种群,野化放归成为保存其种群数量的重要手段。野化放归过程中,为了确定放归时间,除了观察大熊猫的行为特征等生物学数据之外,了解其肠道菌群的状况,是作为评估其野化状态的指标之一。肠道菌群研究方法主要有传统鉴定方法和分子生物学鉴定方法,其中分子鉴定方法是传统方法的有益补充与拓展,为肠道菌群的研究提供了更加精确的工具;PCR-DGGE技术是目前较为实用、图谱分辨率较高、方便快捷的一种方法。本试验首次连续跟踪采集野化培训过程中大熊猫粪便样品,即在2011年9月至2012年11月15个月期间,分别采集野生、圈养和野化培训大熊猫粪便样品8份、21份、39份,按照四季分组,分为5组。提取各样品总DNA,利用巢氏PCR、降落PCR扩增16S rRNA基因中的V3区基因片段,PCR-DGGE电泳得到各季节大熊猫肠道菌群多样性图谱,利用Quantity...  (本文共78页) 本文目录 | 阅读全文>>

西北农林科技大学
西北农林科技大学

大熊猫消化道正常菌群的分离鉴定及药敏性研究

无菌采集健康大熊猫的新鲜粪便,分别接种于新鲜肉汤和厌氧肉肝汤内,37℃培养24~48 h。将液体培养物稀释到同一梯度,定量接种于固体培养基上(绵羊血琼脂平板和特殊培养基),分别进行需氧和厌氧培养24~48 h。根据培养基上的不同类细菌进行分离挑纯及显微镜观察,初步确定了G+芽孢杆菌、G+无芽孢杆菌、G+球菌及G-杆菌。然后分别对纯培养物进行生化试验,包括需氧性鉴定、M.R与V-P、接触酶试验、明胶试验、硝酸盐还原试验、吲哚试验、糖醇发酵试验、柠檬酸盐利用试验、嗜盐性试验等,结果从大熊猫粪便中分离鉴定了12种细菌,依次为鼠李糖乳杆菌、短乳杆菌、多粘芽孢杆菌、耐久肠球菌、两歧双歧杆菌、四联消化链球菌、稍变棒杆菌、面包乳杆菌、大肠埃希氏菌、变形杆菌、奇异菌、梭菌。之后进行了毒性试验和药敏试验,毒性试验结果显示四联消化链球菌、鼠李糖乳杆菌、短乳杆菌、耐久肠球菌、两歧双歧杆菌对小白鼠无致病性,而奇异菌及多粘芽孢杆菌使小白鼠死亡。用26种抗...  (本文共51页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川农业大学
四川农业大学

成年与老年大熊猫肠道菌群16S rDNA-RFLP技术分析

大熊猫是我国特有的珍贵濒危动物,有“国宝”和“活化石”之称,被列为国家Ⅰ级重点保护野生动物和《濒危野生动植物种国际贸易公约》附录Ⅰ物种。大熊猫濒危的原因很多,但是疾病,特别是肠道疾病占很大比例。大熊猫肠道菌群在正常情况下保持着数量和比例的平衡,维持肠道微生态系统平衡和稳定作用,对大熊猫的消化、免疫等生理活动有重要影响。目前关于大熊猫肠道菌群的研究还较少,为了探讨成年大熊猫与老年大熊猫肠道菌群的异同,为以后综合分析各年龄层大熊猫肠道菌群的异同提供依据。本文采用16SrDNA-RFLP技术对圈养成年大熊猫和老年大熊猫肠道菌群的多样性进行研究。构建了成年与老年大熊猫肠道菌群的16SrDNA克隆文库;采用MspI和HinfI两种限制性内切酶进行RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphisma)分析;对聚类结果进行多样性分析:最后对所得菌群进行测序分析。研究结果表明:1.构建的成年与老年大熊猫肠...  (本文共73页) 本文目录 | 阅读全文>>