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人胚嗅鞘细胞的原代培养纯化和颅脑损伤的移植实验研究

第一部分:人胚嗅鞘细胞分离培养目的 建立体外培养纯化人胚嗅鞘细胞的模型,观察不同时期人胚嗅鞘细胞形态学变化。方法 采用无血清培养技术,差速贴壁+免疫吸附的纯化方法,培养并纯化取自3-7月人胚嗅球的嗅鞘细胞。根据免疫组化染色结果统计培养所得嗅鞘细胞纯度。结果 此培养方法可获得大量、高纯度的嗅鞘细胞。结论 本试验成功培养了人胚嗅鞘细胞,为进一步临床移植应用研究提供纯度较高的人胚嗅鞘细胞。第二部分:人胚嗅鞘细胞不同取材及培养方法对纯度的影响目的 通过对多种方法的比较获得较为理想的取材和纯化嗅鞘细胞的措施。方法 应用三种不同的取材方法各获取20份样本,对取材引起的细胞损伤以及同一条件下培养10天后细胞纯度进行对照;在将细胞接种密度统一调整到106/ml后应用三种纯化方法各对20份样本处理并作纯度比较;同样密度和接种数量的原代细胞各取10份种植于3种不同培养皿,对细胞贴壁速度和最终纯度进行检验;对3种常用的细胞接种密度104  (本文共53页) 本文目录 | 阅读全文>>

《解剖学杂志》1987年03期
解剖学杂志

人胚腮腺的组织化学研究

唾液腺的发生学、形态学、组化研究和超微结构巳有专著发表【”,近来有作者通过免疫细胞化学方法来探讨唾液腺的内分泌功能[2]。然而,这方面内容大多以动物材料为研究对象,人腮腺的组织化学研究不多,迄今尚未见到有关人胚腮腺的酶组织化学研究的报道。我们就人胚腮腺标本进行了一般形态学和几种酶的组织化学观察,为了解其生物学特性提供一些线索。材料和方法 组织标本收集医院治疗性流产的人胚(胚龄4~6月)15例,男10、女5。取新鲜腮腺在Brigbt冷冻切片机切片(5旧,空气中略干后10%中性缓冲福尔马林蔗搪液【3】固定10分钟,磷酸缓冲液漂洗后,分别作各种形态和组化染色。试剂a一醋酸蔡醋,Fabrik公司进口。乳酸钠由上海试剂三厂生产。蔡酚一A导BL一B--D一葡萄糖普酸由Sigma公司进口。方法常规苏木精一伊红染色(H.E.)观察细胞形态,高碘酸一雪夫氏反应(P As)显示中性粘多糖,阿利斯兰染色(AB)显示酸性粘多糖。镜下观察PAS与AB反应...  (本文共5页) 阅读全文>>

《生化药物杂志》1987年03期
生化药物杂志

不同活性人胚胸腺激素制剂的研究

胸腺是喃乳动物的中枢免疫器官,目前已从胸腺提取得到了具有免疫增强作用的因子〔’〕和具有免疫抑制作j寸」的因子〔“〕,它们对细胞免疫功能起着平衡和凋节作用。但以往的研究只限于功物胸腺,产品还有不同程度的过敏性,工艺也只是单纯提取免疫增强剂或抑制剂,较为复杂。 本研究根据同种不同个体的胸腺组织免疫原性较弱的原理,建立了一简易的工艺,从人胚胸腺同时提取得到了具有免疫增强作用和抑制作用的制剂,并研究了制剂的理化性质和生物学活性。 材料与方法 1.材料与试剂 (l)胸腺丙酮粉:无菌手续取胎1L.胸腺,除去脂肪组织及与其相连的结缔组织,冲去血污,剪碎,4℃冰箱内丙酮脱水至干,研成粉。 (2)趁H一胸腺啥睫脱氧核普(,H一TdR),中国科学院上海原子能研究所。 (3)植物血凝素(PHA),J‘州医药工业研究所。 (4)测分子量标准蛋白:牛血清清蛋白(Mwes,000),卵清蛋白(MW45,000),碳酸醉酶(MW32,000),日一乳球蛋白(...  (本文共5页) 阅读全文>>

《癌症》1988年03期
癌症

二亚硝基哌嗪诱发人胚鼻咽上皮姊妹染色单体交换的观察

鼻咽癌患者外周淋巴细胞有染色体数目和结构的异常〔‘,2]及自发性sCE濒率增高〔2,3],且3,4一苯并花、DN日秀发的SCE濒率也明显增高『3,‘,。但卖验中均采用淋巴细胞为材料,有一定局限性。虽然鼻咽癌活札准且织中发现标记染色体‘5〕,也无法区别上皮细胞和淋巴细胞,影响实验结论的可信性。现以人胚鼻咽上皮细胞为实验材料,弥补了用淋巴细胞观察鼻咽癌患者SCEs和某些细胞遗传学指标的不足,有可能更直接地探讨人类鼻咽癌病因学中某些因素的作用。材料和方法 一、试剂 5一澳脱氧尿哦吮(BrdU)系Sery铲品;新生小牛血清56℃灭活一小时;DNP系本室合成。 二、上皮细胞培养、染色体制备及SCE技术 水囊引产人胚19例,男性11例,女性8例。鼻咽上皮培养参见本室建立的方法〔6〕,待上皮细胞生长旺盛时加入1如岁训Brdu(终浓度),避光培养。按一般常规培养人胚肾上皮细胞,Brdu处理同上。待Brdu掺入两个细胞周期后,常规收获细胞制备染色...  (本文共4页) 阅读全文>>

权威出处: 《癌症》1988年03期
《生物化学杂志》1988年04期
生物化学杂志

人胚肝发育过程中染色质组份的变化

前古口 组织的正常分化与基因的调控及正确表达密切相关;基因表达受控于染色质中的蛋白质。染色质蛋白分谕类:HP与NHP。前者种类少,分子量小,种族及组织特异性较低,是染色质基本组成单位—核小体的结构成份。NHP种类多达数百种,它既与染色质的组织结构,也与基因表达的调节有关。在众多的NHP当中,有少数是某种组织所特有的,在不同的生理状态及胚胎发育阶段、细胞分化与细胞周期中,NHP发生定量及定性变化【‘]。Chytill:l曹报道大鼠出生前后皮肝脏染色质的改变。然而,有关人胚肝染色质在发育过程中的动态变化未见报道。我们以前的工作曹发现,人肝痛细胞核存在与人胚肝细胞有交叉免疫反应的染色质NHP抗原;_人胚肝NHP抗体可能是研究肝癌基因表达的免疫化学探针ca,4)。因此,分析人胚发育过程中肝细胞染色质组份的变化,不仅有助于揭示这类染色质抗原的生物学功能,而且有可能了解癌变和胚胎分化与发育之间的某些关系。 材料及方法 一、细胞核的制备 从医...  (本文共7页) 阅读全文>>

《氨基酸杂志》1988年04期
氨基酸杂志

人胚胸腺素的生物活性和理化性质

胸腺素由美国学者Goldstein等于1966年首次从小牛胸腺提取并命名。经一系列研究证实为一族生物活性多肤,一能增加E一玫瑰花形成细胞数,并能纠正各种免疫功能紊乱。以异种动物胸腺为原料制备的胸腺素在临床上存在着过敏问题,Sohulof等1983年报道:_轻度反应达20%,中度反应占10%之多。利用人胚胸腺为原料,采用简便工艺可望得到具有活性高、疗效好、不存在异种蛋白副作用的制品。同时,研究人胚胸腺索 (HET)对探讨人胸腺的:免疫学功能,具有重要的学术意义。 作者自198。年起,参照许德新等的工艺,在大量实验的基础上建泛立了HET制备工艺。1 984年正式组成研究协作组,展开制备、检验和临床应用的全面研究。现将HET生物活性和理化实验结果简要报告如下: 一、生物测定 (a)生物活性测定: ①淋巴细胞E一受体定量激活试验:从o.sxug~115ug不同浓...  (本文共2页) 阅读全文>>