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丹皮酚及氧化苦参碱对RBL-2H3细胞活化脱颗粒的影响

目的:通过建立体外抑制MC脱颗粒的药效学模型,从MC的角度探讨Pae及Oxy的抗Ⅰ型变态反应作用机制。方法:一,用MTT比色法检测不同浓度的Pae和Oxy对RBL-2H3细胞活化的影响,并求出IC_(50)值。二,建立体外抑制RBL-2H3细胞脱颗粒的药效学模型。取对数生长的RBL-2H3细胞,以C48/80刺激细胞活化脱颗粒,分别检测0min、5min、15min、30min、1h分泌组胺的量和0min、5min、15min、30min、1h、2h、4h、8h、16h、24h分泌TNF-α的量。三,根据MTT比色法分别选择Pae和Oxy 5个不同的实验浓度,并以色甘酸钠作为阳性对照。以C48/80刺激RBL-2H3细胞活化脱颗粒,测不同浓度药物对RBL-2H3细胞分泌组胺及TNF-α变化。结果:一,Pae在浓度(mg/ml)为0.025、0.05、0.1、0.2、0.4时,对RBL-2H3细胞的增值抑制率(%)各为13.52、  (本文共43页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国免疫学杂志》2002年09期
中国免疫学杂志

RBL-2H3细胞诊断过敏性休克的可行性初探

过敏性休克属于速发型变态反应 ,也称过敏型变型反应 (anaphylactictypeofallergy) ,是IgE介导的Ⅰ型变态反应最危重的一种。由于它发病突然 ,难以预见 ,且危及生命。多年来是法医学鉴定中对突然死亡尸检的一大难题 ,常规尸检无特异性病变 ,是否为速发型变态反应。目前法医学鉴定过敏性休克多采用排除法 ,结合用药史来确定。为此 ,我们拟建立一种特异灵敏的体外检测系统 ,模拟体内脱颗粒过程 ,通过检测组胺释放及AnnexinV阳性率 ,以证实过敏性休克豚鼠血清中含特异性IgE ,并可用于过敏原的筛选。RBL 2H3是大鼠嗜碱粒细胞肿瘤株 ,表面有高亲和力IgE受体 ,活化后可以发生脱颗粒反应[1] ,是建立体外检测系统的最佳选择。1 材料与方法1 1 主要试剂和仪器 组胺标准品 ,邻苯二甲醛(OPT)购自Sigma公司 ,AnnexinVFluosStainningki购自罗氏公司 ,EMEM培养基购自Gibc...  (本文共3页) 阅读全文>>

《广东医学》2016年04期
广东医学

青藤碱对大鼠肥大细胞RBL-2H3活化的影响及机制

节炎症并逐渐导致关节变形,最终对患者日常生活造成影响[1-2]。RA患者的滑膜组织和滑膜液中通常有多种炎性细胞浸润,包括T细胞、树突状细胞、肥大细胞等,其中肥大细胞在RA发病过程中具有重要作用[3]。研究发现在RA患者的滑膜中,肥大细胞的数量明显增加了6~25倍,并且其增加程度与病情活动度相关[4]。青藤碱是一种从防己科防己属植物青藤的茎及其根茎中提取分离获得的天然药物,具有抗炎镇痛、抗类风湿及免疫抑制作用[5]。Huang等[6]研究发现青藤碱能够抑制肥大细胞的体外活化。然而,青藤碱调节肥大细胞活化的具体机制还不明确。2013年4月至2014年12月,本研究通过观察体外培养的肥大细胞经青藤碱处理后相关基因的表达变化,以期为阐明青藤碱的作用机制提供实验依据。1材料与方法1.1材料大鼠肥大细胞RBL-2H3由美国模式培养物保藏所(American Type Culture Collection)提供,青藤碱为湖南正清公司产品,胎牛...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国皮肤性病学杂志》2006年10期
中国皮肤性病学杂志

丹皮酚对RBL-2H3肥大细胞活化脱颗粒的影响

变态反应性皮肤病是皮肤科的常见病和多发病,发病率高。肥大细胞(MC)是I型变态反应速发相的主要靶细胞,也是Ⅰ型变态反应性炎症的主要启动细胞。治疗变态反应的药物作用主要靶点大多围绕MC而产生。丹皮酚(paeonol,Pae)是中药徐长卿、丹皮中提取的重要活性成分,徐长卿、丹皮均是祖国医学治疗变态反应性疾病的常用药物。为探讨Pae治疗变态反应性疾病的机制,笔者观察了Pae对RBL-2H3肥大细胞活化分泌组胺和TNF-α的影响。结果报告如下。1材料和方法1.1材料1.1.1主要试剂RPM I 1640(Sigma),Hepes(Am res-co),L-谷氨酰胺(武汉天远生物技术有限公司),标准新生小牛血清(杭州四季青生物工程有限公司),丹皮酚(标准品,购自武汉市药检所),色甘酸钠(Sigma),MTT(Am resco),Compound 48/80(C 48/80,深圳晶美),二甲基亚砜(DMSO,分析纯),台盼蓝(Sigma),...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中华中医药杂志》2015年01期
中华中医药杂志

清开灵注射液及其中间品对RBL-2H3细胞增殖的影响

清开灵注射液是由北京中医药大学研制[1],治疗中风、肝炎、病毒性脑炎疗效确切的中药复方注射剂,近年来,其临床应用也拓展至急性中毒、肿瘤、慢性肾功能不全等疾病的救治[2]。但因用药同时产生较多不良反应,限制了其在临床的广泛应用。对其所导致的不良反应分析发现,大部分患者为首次用药30min内即产生过敏反应症状[3]。根据其首发性与速发型,推测其不良反应与类过敏反应有关。目前我国尚无中药注射剂类过敏反应检测的指导原则和检测模型[4-5],建立敏感可靠的类过敏反应研究模型是解决中药注射剂临床不良反应问题的当务之急。根据类过敏反应发生的机制,体外细胞模型需模拟肥大细胞(mast cell,MC)释放过敏介质。大鼠嗜碱性白血病细胞株(rat basophilic leukemia cell 1ine,RBL-2H3)是MC的理想替代模型,能模拟有关MC的生理、病理反应,是研究介质释放和鉴定抗过敏药物的重要模型。本研究通过有效组分特征性研究以...  (本文共4页) 阅读全文>>

《时珍国医国药》2015年09期
时珍国医国药

红花注射液致敏成分的RBL-2H3细胞模型筛选

红花注射液是从中药红花中提取的有效成分,功能主治为活血化瘀,用于治疗闭塞性脑血管疾病、冠心病、脉管炎等。随着临床应用日益广泛,不良反应的报告越来越多[1~3],严重不良反应时有发生,2013年国家药品不良反应监测中心第52期发布红花注射液安全性警示数据,显示2012年全国共报告红花注射剂不良反应3306例,严重不良反应占整体报告的4.66%,危及生命的严重不良反应多为过敏反应。中药注射剂过敏反应高发的因素之一就是其化学成分复杂,致敏成分不明确,包括红花注射液在内的大部分中药注射剂在上市前进行的研究并不足以预防其过敏反应的发生,因此红花注射液中致敏原的筛查是中药注射剂安全性评价急需解决的问题之一。针对注射剂的过敏反应筛查,《中国药典》(2010版)仅收录动物实验,动物实验结果判定多依据行为学观察,带有主观性,容易产生假阳性和假阴性结果[4],另外动物实验筛选过敏反应主要原理是针对依赖Ig E介导的经典途径过敏反应,但近年研究显示与...  (本文共3页) 阅读全文>>