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S受体激酶信号传导因子SSP和MLPK编码基因的克隆与序列分析

杂种优势在农业生产中的广泛应用,促使在自交不亲和(SI)研究领域不断涌现出新的科研成果,对于孢子体自交不亲和反应机理的研究,芸薹属植物无疑是研究最多、机理最为清楚的一类作物。继发现并阐明了由S-locus基因编码的引发SI信号传导途径的功能因子及其功能之后,又先后发现了几类与SI信号传导途径相关疑似为该途径下游组分的蛋白质,对其功能的研究已经取得了一定的成果,但尚有很多问题亟待解决。目前普遍认为,当具有相同单倍型时,来自花粉中的半胱氨酸富含蛋白SCR/SP11与柱头上的跨膜蛋白SRK相互识别,启动SRK自磷酸化反应,从而引发SI信号传导过程,而SRK下游信号由ARC1、THL1/THL2、MOD等因子传递,最终导致花粉不能在柱头上萌发。2003年,吴能表博士从自交不亲和甘蓝中分离出一分子量为22.2KD未知蛋白,2004年Murase在芜菁中发现了MLPK蛋白,他们虽然功能还不很清楚,但无疑为自交不亲和机理的研究提供了新的内容。  (本文共76页) 本文目录 | 阅读全文>>

《园艺学报》2015年02期
园艺学报

转MLPK反义基因对甘蓝自交不亲和性的影响

对反义MLPK基因在甘蓝柱头特异启动子SLR的驱动下,通过农杆菌介导转化法将其导入高度自交不亲和甘蓝材料‘TF’。转基因甘蓝T0代植株定量PCR分析结果显示,不同的转MLPK反义基因单株内源MLPK m RNA积累量具有明显差异,其中...  (本文共11页) 阅读全文>>

西南大学
西南大学

甘蓝自交不亲和性信号传导元件MLPK与SSP编码基因的FISH定位研究

甘蓝等芸薹属植物的自交不亲和性在遗传上受一个带有复等位基因的多态性S位点(S-locus)控制,并且存在着一个以S位点基因介导的自交不亲和信号传导途径。但是,关于这条信号传导途径相关元件编码基因之间的连锁关系、以及它们与S位点的连锁关系和在甘蓝染色体上的具体位置分布至今未见报道。另外,甘蓝是芸薹属的三个基本种之一,在芸薹属的自然和人工合成过程中,甘蓝的染色体组参与的染色体配对行为十分普遍,染色体之间的重排率很高,极大地影响着甘蓝自交不亲和基因在芸薹属间的转移和遗传变异。因此,对自交不亲和基因进行染色体定位和DNA纤维定位,对芸薹属物种自交不亲和性的研究和利用具有十分重要的意义。本研究采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术,以MLPK和SSP基因片段为探针,分别在甘蓝有丝分裂前中期染色体、减数分裂早粗线期染色体以及伸长DNA纤维(extended DNA fibers...  (本文共79页) 本文目录 | 阅读全文>>

《作物学报》2009年05期
作物学报

甘蓝自交不亲和基因MLPK与SSP的FISH定位

利用FISH技术,对自交不亲和基因MLPK与SSP在甘蓝有丝分裂前中期染色体、减数分裂早粗线期染色体以及伸长DNA纤维等3种分辨率水平的靶DNA载体上进行物理定位。结果表明,在有丝分裂前中期,MLPK探针信号位于一对近中着丝粒同源染色体的短臂中部,距着丝粒的百分距离约为53.41±3.16;SSP探...  (本文共7页) 阅读全文>>

西南大学
西南大学

甘蓝SRK激酶结构域编码区的克隆及其与MLPK的双色FISH定位研究

芸薹属自交不亲和性由S位点所控制。SRK基因是决定自交不亲和性反应的关键因子,前人已经从芸薹属中的甘蓝、甘蓝型油菜等物种中克隆出SRK基因。SRK基因的变异和表达量都会影响自交不亲和性。SRK基因的胞外域有着较大的多态性,变异常常发生在此编码区。相对于胞外域,激酶结构域的保守型较强。本文专门对SRK基因激酶结构域进行了克隆分析,以期从进化的角度探讨激酶结构域对于自交不亲和性的作用。除此之外,MLPK被证明也是SI反应中必不可少的一个因子,作为SRK下游元件起作用。本文针对这两个基因在SI中的重要性,利用FISH技术将SRK和MLPK进行物理定位,从而探索其在甘蓝基因组中的分布及其拷贝数。得到的主要研究结果如下:1.以结球甘蓝263、羽衣甘蓝AY627和甘蓝型油菜S11为材料,采用PCR、RT-PCR等技术,分别对SRK激酶结构域基因组DNA和cDNA进行了扩增、测序和序列分析,并构建了分子进化树。分别获得了1694bp和1307...  (本文共58页) 本文目录 | 阅读全文>>

《园艺学报》2015年12期
园艺学报

甘蓝MLPK的原核表达及其互作蛋白分离体系的建立

M–位点受体激酶(MLPK)是甘蓝自交不亲和反应的正向调控关键元件,其参与自交不亲和反应的分子机制尚不明确。为了分离与MLPK相互作用的蛋白,在分析了MLPK功能域的基础上采用PCR技术扩增了MLPK激酶结构域编码序列(记为MLPKK),通过体外定点突变技术构建了两种MLPK失活突变体(记为mlpk1和mlpk2),然后以p ET43.1a为载体构建了原核表达质粒p ET43.1a-MLPKK...  (本文共9页) 阅读全文>>