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大鼠脑出血后AQP4mRNA表达与血脑屏障通透性、脑水含量的关系及水蛭素的干预作用

目的脑出血是指非外伤性脑实质出血,是一种发病率和致死率非常高的疾病。ICH后脑水肿是加重病情的原因之一,目前有关ICH后脑水肿的发病机制的研究,为ICH的治疗提供了崭新的途径。近年来ICH后血液凝固过程中释放的凝血酶(Thrombin)的毒性作用正日益受到重视,凝血酶是一种血清丝氨酸蛋白酶,除了参与凝血级联反应外,还参与一系列受体介导的过程。ICH大量释放的凝血酶引起脑水肿的病理生理机制尚未完全阐明。最近有关AQP4在ICH后脑水肿中的作用机制成为研究的热点,AQPs是最近十余年来发现的一种膜通道蛋白,仅对水分子及一些小分子物质有通透性,是水分子跨膜运动的主要分子基础。研究发现分布于中枢神经系统的AQPs主要为AQP4,AQP4蛋白在星形胶质细胞和室管膜细胞内表达丰富,它可能在水代谢和调节中起主要作用。本实验旨在探讨大鼠ICH后脑水含量的改变、血脑屏障通透性与AQP4mRNA表达之间的关系,研究凝血酶在ICH后脑水肿形成机制中的  (本文共42页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川大学
四川大学

新生鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织AQP4mRNA和AQP4蛋白表达及地塞米松对其表达的影响

目的:了解新生大鼠缺氧缺血脑损伤时,脑组织病理学及脑含水量的改变。方法:7日龄SD大鼠经右侧颈总动脉结扎加8%氧气和92%氮气低氧处理1h,拟建立缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的动物模型。用HE染色,作病理检测。用干湿重法检测脑组织含水量。统计方法单因素的方差分析。结果:(1) 缺氧缺血后6h-24h,右侧脑组织肿胀,神经细胞肿胀。24h-48h病理改变加重,72h出现明显的脑梗塞。(2) 6h开始右侧脑组织的含水量较正常对照组显著增加(P0.05),并随时间呈进行性增加的趋势,72h脑组织的含水量最多,均与对照组有显著性差异(P均0.05)。HIBD组各时间段之间脑含水量比较均有显著性差异(P均0.05)结论:(1) 结扎新生SD大鼠右侧颈总动脉加8%氧气低氧处理1h,经光镜检查脑组织证实符合HIBD的病理改变;(2) HIBD时脑含水量增加,而且脑含水量增多的时段与病理改变一致。表明本研究HIBD动物模型制作成功。  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>

南华大学
南华大学

布美他尼影响缺氧/复氧损伤后星形胶质细胞的活性及其AQP4mRNA的表达

目的:研究布美他尼对缺氧/复氧损伤后星形胶质细胞活性及其AQP4m RNA表达的影响。方法:使用新生48小时内的SD大鼠,提取脑组织星形胶质细胞进行原代培养,并传代。星形胶质细胞传至第4代后进行细胞鉴定。使用5%CO2+95%N2制造缺氧环境。检测各组星形胶质细胞活性和AQP4表达,星形胶质细胞活性检测:分为正常对照组、缺氧/复氧组(H/R组)、布美他尼干预组(50umol/L)、布美他尼干预组(100umol/L),采用噻唑蓝(thiazoyl blue tetrazolium bromide,MTT)染色法以及检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的释放量,判定星形胶质细胞的受损害程度,比较各组星形胶质细胞活力;AQP4m RNA表达的检测:分为正常对照组、缺氧/复氧组(H/R组)、布美他尼干预组(100umol/L),采用Q-PCR技术分别检测各组AQP4m RNA的转录水平,比较各组间及各组...  (本文共52页) 本文目录 | 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

甲基强的松龙对体外培养的星形胶质细胞AQP4mRNA表达影响的研究

第一部分大鼠星形胶质细胞的培养及鉴定目的采用新生大鼠大脑皮质制作原代星形胶质细胞,并培养传代进行鉴定和星形胶质细胞的纯度测定。方法使用生后3天内的SD乳鼠大脑皮质制成细胞悬液后,按107~109 /L个细胞接种于已用0.01%多聚左旋赖氨酸包被好的底面积为75cm2培养瓶中,放置于培养箱中(5%CO2,37OC)培养,采用含15%的胎牛血清的DMEM/F12培养基培养8天,通过差速贴壁和不同速度的摇床及逐渐传代纯化星形胶质细胞,观察细胞形态的变化,通过免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞。结果使用差速贴壁法与摇床技术相结合可获得高纯度星形胶质细胞,并随逐渐传代更加纯化,细胞的形态逐渐发生变化,培养的细胞GFAP染色呈阳性,显示正常星形胶质细胞胞体呈多角星形,胞膜光滑,边界清晰,胞突较长,荧光染色显示GFAP阳性细胞占总细胞数比例在95%以上。结论通过新生乳鼠大脑皮质制作原代星形胶质细胞,使用差速贴壁法与摇床技术培养后可获得高纯度的星形胶...  (本文共53页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国医学工程》2008年03期
中国医学工程

抑肽酶对大鼠实验性脑出血后AQP4mRNA表达及脑水肿的作用

目的研究脑出血后的脑水肿形成与水孔蛋白-4(AQP4) mRNA表达的关系,以及抑肽酶的干预作用。方法采用自体动脉血注入法制作大鼠脑出血模型,RT-PCR法检测AQP4 mRNA表达,并观察给予抑肽酶处置后脑水肿(脑含水量)的变化。结果与对照组相比,脑出血组和抑肽酶组均从脑出血后6h开始出现脑水肿(P0...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中风与神经疾病杂志》2005年04期
中风与神经疾病杂志

低渗状态下星形胶质细胞AQP4mRNA的表达和Ca~(2+)浓度的关系

目的探讨低渗培养液对星形胶质细胞AQP4mRNA的表达变化和Ca2+浓度的影响及其之间的关系。方法取生后2d的Wistar大鼠大脑皮层进行星形胶质细胞纯培养,分别予不同程度的低渗培养液作用于细胞,建立细胞对低渗液反应的实验模型。应用台盼蓝测定细胞存活率,采用原位杂交检测AQP4mRNA的表达,Fura-2/AM荧光法测定细胞内Ca2...  (本文共5页) 阅读全文>>