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产漆酶杏鲍菇原生质体紫外线诱变育种及其发酵条件研究

杏鲍菇(Pleurotus erygii)又名刺芹侧耳,隶属于担子菌亚门(Basidio mycotina ), 层菌纲( Hymenomycetes ) , 无隔担子菌亚纲(Homobasidiomycetidae),伞菌目(Agaricales),侧耳科(Pleurotaceae),侧耳属(Pleurotus)。杏鲍菇菌肉肥厚,营养丰富,有降血压和降血脂的作用。(陈士瑜,陈海英,2000)。杏鲍菇有多种胞外酶,漆酶(Laccasse)、过氧化物酶、芳基乙醇氧化酶(Aryl-alcohol oxidase,AAO)等,其中漆酶引起人们的大量关注。漆酶是一种含有4 个铜离子(Ⅱ)的胞外多酚氧化酶,属于铜蓝蛋白家族,普遍存在于白腐菌中。杏鲍菇降解木质素能力强,与所含漆酶活性高密切相关。C Mu?oz 等(C Mu?oz, F Guillén, A T Martínez,1997)纯化了两种杏鲍菇漆酶同工酶:漆酶I和漆酶Ⅱ。两者都是  (本文共60页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国农业科技导报》2014年05期
中国农业科技导报

玉米生长条件对玉米原生质体转化的影响研究

玉米是目前我国和世界第一大粮食作物,具 长足进步,而玉米由于基因组大、遗传转化难、缺有高产、耐旱等特点,还可以作为动物饲料及工业 乏覆盖全基因组的突变体库等原因,其功能基因原料,在国民经济中有着重要作用。近些年来,随 组学研究则滞后了很多。原生质体瞬时转化技术着植物基因组学的快速发展,许多模式植物如拟 不依赖于稳定的遗传转化,而且可以使外源基因南芥、烟草、水稻等功能基因组学的研究都取得了 在细胞中快速表达,并通过检测目的基因或报告基因的表达情况,可以很好的观察到基因在细胞中的行为,是一种非常适合于玉米基因功能研究 1实验材料与方法的方法11]。由于具有方便、快捷等优点,目前原生质体瞬 1.1实验材料时转化技术已经广泛应用于植物的蛋白亚细胞定玉米自交系Q319种子由本实验室保存,纤位「2—41、启动子分析…7:、蛋白互作[8-1]、信号传 维素酶RIO(cellulase RIO)和离析酶R10导通路[11~131等研究领域。除玉...  (本文共7页) 阅读全文>>

《果树学报》2013年06期
果树学报

板栗下胚轴原生质体的分离与纯化

植物原生质体是细胞去除细胞壁后获得的“裸露细胞”。自1960年英国植物生理学家Cocking首次采用酶解法从番茄根尖分离出有活力的原生质体以来,至今已有数百种植物以不同组织器官为材料成功获得了原生质体[1-3]。原生质体可以高效摄入外源DNA、RNA、蛋白质等大分子。通过向原生质体中导入GUS、GFP等报告基因,可以快速准确地进行启动子活性分析、蛋白质及细胞器定位等研究[4-6]。原生质体瞬时表达体系还可以有效地评价内外因素(包括渗透胁迫、光照强度等)对植物细胞内基因表达的影响[7-8]。原生质体培养最先在烟草上获得成功,并广泛应用于草本植物中;就木本植物而言,其原生质体研究起步较晚,以苹果、香蕉、桑树为代表的果树和林木也相继在原生质体培养研究中取得了成功[9-12]。此外,在原生质体培养基础上,还开展了原生质体融合研究。柑橘、猕猴桃和杧果等果树上通过PEG融合和电融合技术获得了多个种间、种内、属间等体细胞杂种[13-15]。这...  (本文共5页) 阅读全文>>

《西北农业学报》2009年06期
西北农业学报

从蚕豆叶片中提取保卫细胞原生质体方法的改进

原生质体是去除细胞壁,由质膜包裹的裸露细胞。失去细胞壁的原生质体具有其特殊的优点,可作为一个单细胞系统用于细胞壁再生、膜的透性及离子转运、细胞分裂与分化、细胞器摄入等基础理论的研究。保卫细胞原生质体(GuardCell Protoplasts,GCP)是研究气孔运动、膜透性和离子转运过程的重要材料。但因物种的不同,表皮的获得及保卫细胞壁抵御细胞壁降解酶或机械破损的能力不同,使保卫细胞原生质体的提取难易也不同。提取保卫细胞原生质体通常采用两步酶解法,大多是直接撕取叶片下表皮后将表皮条置纤维素酶中进行两步酶解;当GCP游离出后进行低速离心洗涤,最后获得较为纯净的保卫细胞原生质体。由于蚕豆叶片本身质地较为柔软,直接撕取表皮的难度较大,对后续酶解过程有较多的影响,而后期分离纯化过程仅靠低速离心洗涤的效果一般。本文以蚕豆(Vicia faba)叶片为试验材料,从叶片表皮的撕取方式和后期分离纯化两个方面对保卫细胞原生质体的提取方法进行了改进...  (本文共5页) 阅读全文>>

《重庆大学学报(自然科学版)》2005年12期
重庆大学学报(自然科学版)

紫锥菊愈伤组织原生质体分离方法初探

紫锥菊属(Echinacea purpuce moench)是原产于美洲的一类菊科野生花卉,也称“松果菊”.其使用历史可追溯到北美印地安人时期,该属植物被作为治疗外伤、蛇咬、头痛及感冒.紫锥菊属作为药用品种已开发的有3种,即紫锥菊(Echinacea purpurea),狭叶紫锥菊(Echinacea augustifolia)和淡白紫锥菊(Echinacea palli-da),其全草均可入药,现代药理学研究显示紫锥菊稀醇提取物具有增强免疫、抗感染、抗炎等活性.近年来,紫锥菊在我国也引种成功,并对其药用成分展开了研究[1-6],但对其原生质体分离方面的报道比较少.原生质体是指植物细胞通过质壁分离后与细胞壁分开的那部分物质,质膜包裹着的、具有生物活性的裸露细胞[7].在过去的几十年中,随着原生质体培养研究的不断发展,原生质体已被广泛用于植物生理学、植物细胞生物学、植物组织和细胞培养的许多研究领域.本研究以紫锥菊愈伤组织为材料研究...  (本文共4页) 阅读全文>>

《云南农业大学学报》2005年02期
云南农业大学学报

紫罗兰下胚轴原生质体分离条件的研究

紫罗兰(Matthiolaincana)是十字花科紫罗兰属植物。可供观赏,其花可入药,有泻下通经功效。近年来有关学者对紫罗兰开展了系统研究[1~3],1994年YANIV等[4]提出紫罗兰是新的特用油料植物,种子油富含ω-3-亚麻酸,为保健珍品。罗鹏等[3]对紫罗兰与甘蓝型油菜杂交后的子房进行了培养,从杂种后代中获得种子油分品质较好的植株。为了利用紫罗兰的有益基因资源进行油菜品质改良,作者对其原生质体分离条件和技术进行了研究,旨在建立高效的紫罗兰原生质体分离技术体系。为以后的紫罗兰原生质体植株再生以及与油菜进行体细胞杂交等奠定基础。1 材料与方法1 1 材料供试材料紫罗兰(Mathiolaincana)来自北京缤纷种子公司。1 2 方法1 2 1 无菌苗体系的建立紫罗兰种子在水中浸泡1h后,用70%乙醇表面消毒1~2min,再用0 1%的升汞溶液消毒12min,无菌水漂洗3~4次,接种于不含任何激素的MS固体培养基上,萌发出苗。...  (本文共4页) 阅读全文>>