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H9(N2)型禽流感病毒HA基因的克隆与序列分析

血凝素(HA)是禽流感病毒的两种表面糖蛋白之一,主要诱导机体产生体液免疫应答。本研究采用异硫氰酸胍法提取禽流感病毒分离株的SPF 鸡胚尿囊毒RNA,利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增出禽流感病毒(H9 亚型)血凝素的cDNA。用UNIQ-10 柱式DNA 胶回收试剂盒回收纯化目的片段,通过T-A 连接将已加A 尾的PCR 产物连接到线状克隆载体pGEM-T easy vector,转化JM109 感受态细胞,在含氨苄青霉素的LB 平板上筛选阳性克隆。经PCR 扩增,进一步确证为目的片段,并对目的片段进行测序,结果获得3个毒株的HA 基因全长。与已知序列进行同源性比较,同源性最高的都可达98%,表明这些分离株的亲缘关系较近;系统发育分析表明,这三个毒株均属欧亚种系;通过血凝素裂解位点的氨基酸序列分析可知,三分离株的HA 切割位点上均未见到典型的高致病力毒株H5、H7 所具有的一系列碱性氨基酸,其排列顺序均为-PAR  (本文共45页) 本文目录 | 阅读全文>>

《汽车之友》2017年15期
汽车之友

硬得出奇 试驾哈弗H9柴油版

傻大黑粗,这是传统柴油车给我们的印象。事实上,哈弗H9的柴油版除了大而硬之外,拥有更多的实用功能以及...  (本文共6页) 阅读全文>>

《现代畜牧兽医》2013年09期
现代畜牧兽医

辽宁省低致病性禽流感(H9)带毒情况调查

为确实掌握辽宁省家禽低致病性禽流感(H9)带毒或感染情况,2011~2012年,辽宁省动物疫病预防控制中心对全省共64个禽场(户)进行低致病...  (本文共7页) 阅读全文>>

《中国预防兽医学报》2011年06期
中国预防兽医学报

H9亚型禽流感病毒血凝素特异性单因子血清制备

为制备特异性的H9亚型禽流感病毒(AIV)单因子血清,本研究分别将6株不同亚群的H9亚型AIV的血凝素(HA)基因以鸡偏嗜的密码子进行优化,经全基因合成插入高效真核表达载体pCAGGS中,构建的真核...  (本文共4页) 阅读全文>>

《黑龙江畜牧兽医》2013年21期
黑龙江畜牧兽医

3株H9亚型禽流感病毒在3种传代细胞系上增殖效果研究

为了研究3株H9亚型禽流感病毒在3种传代细胞上的增殖效果,试验采用将WD98株、HN04株和ZD04株H9N2亚型禽流感病毒分别接种MDCK细胞、Vero细胞和DF-1细胞单层,加入含有2μg/mL TPCK胰蛋白酶浓度的DMEM维持液,每隔24 h观察细胞病变,并测定上清液HA效价。结果表明:3株H9N2亚型禽流感病...  (本文共3页) 阅读全文>>

《畜牧与兽医》2011年07期
畜牧与兽医

H9亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

根据H9亚型禽流感病毒HA基因上的保守序列,设计合成引物,以阳性H9亚型禽流感病毒HA基因重组质粒为标准品做标准曲线,建立了荧光定量逆转录聚合酶链反应检测方法。结果表明:本试验建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的线性关系,...  (本文共5页) 阅读全文>>