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大蒜拮抗内毒素作用的物质基础及生物学活性研究

目的:内毒素(LPS)是G~-细菌外膜的主要成分,是引起脓毒症的主要病原分子。LPS通过其活性中心Lipid A与细胞表面的受体结合,介导脓毒症的发生。因此,阻断Lipid A与其受体的结合是防治脓毒症的关键之一。大量的实践证明:某些药食两用植物具有拮抗脓毒症的功效,而且来源广泛、培植周期短、加工简便,有良好的应用前景。本课题以Lipid A为靶点,应用生物传感器技术平台,在药食两用植物中定向分离具有拮抗脓毒症作用的活性物质并对其生物学活性进行评价。方法:(1)应用生物传感器技术,对大蒜、苦瓜、鱼腥草、生姜、芫荽等5种药食两用植物进行与Lipid A结合活性的筛选。(2)利用生物传感器、硅胶柱层析、离子交换—HPLC等技术,对筛选出的药食两用植物中与Lipid A具有结合活性的组分进行定向分离。(3)在体外,观察活性组分与Lipid A结合的亲合力及对LPS刺激小鼠RAW264.7细胞分泌炎症介质的抑制作用。(4)在小鼠体内,观  (本文共81页) 本文目录 | 阅读全文>>

《饲料工业》2016年22期
饲料工业

植物多糖的生物学活性研究进展

多糖又称多聚糖(Polysaccharides),是由多个单糖分子缩合、失水而成的一类生物多聚物,主要包括植物多糖、动物多糖以及微生物多糖三类,是一类重要的生物活性物质,它与蛋白质、核酸和脂类一起被视为生命的四大基本物质。近年来,随着对植物多糖研究的不断深入,植物多糖所具有的抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、降血糖、降血脂、抗菌和抗病毒等生物活性不断被发掘出来。目前,已有近百种植物多糖被研究人员成功提取,并对其特殊生物活性进行了验证。1抗氧化活性近年来,大量研究表明许多疾病与自由基诱导的生物大分子氧化损伤有关,如细胞癌变、细胞老化、高血脂症和多种老年慢性疾病等。在机体代谢的过程中产生的自由基还可引起脂质、蛋白质和核酸分子的氧化性损伤,而植物多糖具有对羟基自由基、超氧自由基(O2·-)和DPPH自由基等的清除能力。在肉羊饲粮中添加沙葱多糖可显著提高肉羊血清中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国生物制品学杂志》2013年04期
中国生物制品学杂志

重组人粒细胞集落刺激因子的生物学活性分析

重组人粒细胞集落刺激因子(Recombinant humangranulocyte colony-stimulating factor,rhG-CSF)主要用于放、化疗及骨髓移植后中性粒细胞减少症[1]。1991年美国FDA批准rhG-CSF上市,目前,我国已批准18家企业生产rhG-CSF,批准文号为69个(包括480、450、300、250、200、150、125、100、75和50μg/支等多种规格及注射液和冻干注射剂两种剂型)。生物学活性是该类药品质量控制的重要指标,与产品质量密切相关。本实验采用mNFS-60细胞/MTT比色法检测不同来源rhG-CSF的生物学活性,从而评价市售rhG-CSF的生物学活性及其检测方法的应用情况。1材料与方法1.1细胞mNFS-60细胞由本院重组药物室保存。1.2样品及国家参考品rhG-CSF抽检样品来自北京、河北、山东等7省市的市场库房和企业成品库房的随机抽样(涉及11个企业,共18批产...  (本文共4页) 阅读全文>>

《山东医药》2006年14期
山东医药

重组人成骨蛋白-1的纯化及其生物学活性研究

成骨蛋白-1(OP-1)又称骨形态发生蛋白-7(BM P-7),是转化生长因子-β(TGF-β)超家族中的一员,其生物学活性广泛,不但可治疗骨及软骨组织缺损、骨不连、骨折等骨病,还具有一定的肾修复功能,可用于治疗急性肾衰竭,临床应用前景良好[1,2]。直接从其他动物组织提取纯化获得的OP-1量非常有限,方法复杂,成本较高,而且可能存在异源排斥反应。为此,我们利用基因工程技术将克隆的人成骨蛋白-1(hOP-1)基因片段通过载体转入大肠杆菌表达系统,经发酵和纯化后得到高纯度的重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)。研究表明,其刺激成骨或成软骨能力较强,能在体内外诱导未分化的间充质细胞向软骨细胞或成骨细胞分化,促进骨源性碱性磷酸酶(ALP)和胶原蛋白等mRNA的表达,并可刺激间充质细胞和成骨细胞的增生,诱导成纤维细胞分化为成骨细胞[3]。鉴于目前rhOP-1活性检测尚无统一方法,本实验在参考其他BM Ps测活方法的基础上,采用经典的小鼠肌...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国生化药物杂志》2001年01期
中国生化药物杂志

重组人粒细胞集落刺激因子生物学活性测定方法研究

粒细胞集落刺激因子 (G CSF)为世界卫生组织国际标准品 ,重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)的生物学活性是其科研和生产过程中重要的质量控制指标 ,但目前我国还没有部颁标准品。用NFS 60细胞测定rhG CSF的生物学活性由Naoki等[1] 提出 (用同位素法 ) ,我们通过对NFS 60细胞用溴化四唑蓝 (MTT)法测定rhG CSF生物学活性的方法研究[2 ] ,为制定rhG CSF生物学活性检定规程提供了依据 ,同时为标定rhG CSF生物学活性工作标准品奠定了理论基础。1 材 料  标准品 :世界卫生组织国际标准品G CSF标准品[3] (human ,rDNA derived) 88/ 50 2 ,10 0 0 0IU/支 ,用前按说明准确定容至 1ml;样品 :惠尔血 针剂 75GRAN 75,日本麒麟啤酒株式会社高崎医药工厂 ,标示量为 75μg/ 0 .3ml,批号 8X2B。NFS 60细胞...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中华肝脏病杂志》2001年S1期
中华肝脏病杂志

重组人肝再生增强因子的纯化及生物学活性研究

对经大肠杆菌表达的重组人肝再生增强因子进行纯化并观察其对肝损伤小鼠模型的促修复作用。 1.方法:pBV-hALR/JM109工程菌由本室构建,30℃培养至A600=0.6,42℃诱导表达5 h,收集不同诱导时间菌体鉴定rhALR的表达水平。包涵体的洗涤变性,复性后经 CM-Sepharose FF离子交换柱层析,收集洗脱峰,行SDS-PAGE,结果经UVP labwork扫描处理软件分析测定rhALR纯度,N端氨基酸分析采用手工Edman降解法。 CC14急性肝损伤小鼠模型的建立,动物 BALB/C小鼠,体重 18—20 g,雌雄各半.安静条件下饲养1周、将50% CC14液体石蜡按每千克体重腹腔注射 1.5 ml,隔 2 d后再注射一次,第 2次损伤后24 h分组,每组10只。(1)盐水对照组:0.5 ml/d;(2)PHGF组: 5mg/d;(3)重组人肝再生增强因子(rhA LR)纯度>95%,50μg/ d,连续治疗3d...  (本文共1页) 阅读全文>>