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苦荞过敏蛋白C端结构域的原核表达及其免疫学活性的鉴定

荞麦(Fagopyrum esculentum)作为一种功能性食物,越来越受到人们的广泛关注。它不仅具有丰富的营养价值,而且还有很高的药用价值。荞麦蛋白由较为独特的氨基酸组成。许多实验表明荞麦中的黄酮类物质含量较高,其产品具有明显的降低胆固醇和降血压等生物学作用,而且对糖尿病也有一定的疗效。然而,近年来的研究发现,荞麦中含有的过敏性成分通常可使接触或食用它的人产生过敏症状。日本和韩国学者先后从甜荞麦中分离获得16kDa、22-24 kDa、34-38 kDa及69 kDa等分子量不等的过敏蛋白。虽然对荞麦主要过敏原的确定还没有得到统一,各个研究小组的报道也存在一些差异,但一般认为22-24 kDa蛋白是荞麦中的主要过敏原。目前,国内外关于苦荞麦过敏的研究较少。本实验室曾以我国云南苦荞种子为原料,经分离纯化获得纯度均一的24 kDa天然蛋白,命名为TBa(tartary buckwheat allergen),通过免疫学检测发现其  (本文共60页) 本文目录 | 阅读全文>>

《食品科学》2009年01期
食品科学

苦荞过敏蛋白全长基因的克隆、表达及免疫学活性研究

近年来,农业、医学及食品营养学等方面的研究表明,荞麦特别是苦荞,营养价值居所有粮食作物之首,不仅营养成分丰富,营养价值高,而且还含有其他粮食作物所缺乏的多种微量元素及药用成分[’]。然而,有报道表明,部分人在接触或食用荞麦食品后会产生哮喘、皮症等过敏症状[2]。目前,科学家已从甜荞(eommon buekwheat)中分离获得了分子量为16、19、24、60一70 kD等过敏蛋白l,·,]。对苦荞(tartary buckwheat,TB)过敏成分的研究报道主要来自本实验室。2002年笔者首次采用基因克隆方法获得苦荞过敏蛋白的C端结构基因序列,并在GonBank登录(登录号为AY044918)16一7]。之后,采用5’一RACE法进4步获得苦荞过敏蛋白的N一端部分基因序列181,并对其基因序列进行了分析。这些结果为荞麦过敏蛋白的研究增加了新内容。为了获得苦荞主要过敏蛋白的全长基因,本研究采用RT一PCR、5’.RACE等技术,以...  (本文共4页) 阅读全文>>

山西大学
山西大学

苦荞过敏蛋白TB22kDa的cDNA片断克隆、原核表达及初步纯化

荞麦具有较高营养品质和药用价值,并富含多种生物活性物质,在防治现代文明病诸如糖尿病、高血压等心脑血管疾病和风湿性关节炎等方面有一定的功效。然而荞麦中含有的过敏性成份又使许多接触或食用它的人产生过敏症状。近些年来,一些国外的科学家对甜荞(common buckwheat CB)中的过敏成分进行了研究。但在苦荞(tartary buckwheat TB)过敏成分研究方面的报道却不多,有关苦荞过敏蛋白的基因克隆及表达调控的研究尚属空白。TB22kDa蛋白是苦荞中的主要过敏蛋白,对此蛋白中抗原决定簇免疫学和分子遗传学的深入研究,将有助于了解过敏反应机制并设计抑制荞麦过敏蛋白的表达或使患者脱敏的方法。本研究的目的在于分离克隆苦荞中的主要过敏蛋白(TB22kDa)基因,并表达纯化出其结构基因编码的蛋白。从而为进一步研究过敏蛋白TB22kDa的结构与功能,寻找其中的抗原决定簇,探讨过敏原与其相应抗体相互作用机理提供依据。本研究根据先前分离纯化...  (本文共51页) 本文目录 | 阅读全文>>

山西大学
山西大学

苦荞过敏蛋白TB24kDa的原核表达纯化及免疫活性的鉴定

荞麦具有较高营养品质和药用价值,并富含多种生物活性物质,在防治现代文明病诸如糖尿病、高血压等心脑血管疾病和风湿性关节炎等方面有一定的功效。然而荞麦中含有的过敏性成份又使许多接触或食用它的人产生过敏症状。近些年来,一些国外的科学家对甜荞(common buckwheat CB)中的过敏成分进行了研究。但在苦荞(tartary buckwheat TB)过敏成分研究方面的报道却不多,有关苦荞过敏蛋白基因的重组表达和抗原决定簇的研究尚属空白。TB24kDa蛋白是苦荞中的主要过敏蛋白,确定此蛋白中的抗原决定簇并对其进行免疫学和分子遗传学上的研究,将有助于了解过敏反应机制并为荞麦过敏症的免疫治疗和低敏品种的培育提供科学依据。本研究的目的在于表达重组的苦荞主要过敏蛋白(TB24kDa),并对其进行纯化和免疫活性的测定,从而为进一步寻找其抗原决定簇奠定坚实的基础。本实验以pQE-31为表达载体,M15为表达菌株,使用IPTG诱导,在37℃获得...  (本文共41页) 本文目录 | 阅读全文>>

《基因组学与应用生物学》2016年12期
基因组学与应用生物学

苦荞过敏蛋白TBW17基因克隆及其抗原表位分析

*通讯作者,wangxiaoli288@163.comCloning and Epitope Analysis of a Novel Allergy Protein TBW17 fromTartary BuckwheatZhang Runmin Liu Haining Yao Huipeng Wang Xiaoli*Li ChengleiCollege of Life Science,Sichuan Agricultural University,Ya'an,625014*Corresponding author,wangxiaoli288@163.com苦荞(Fagopyrum tatacuricum)是双子叶蓼科(Pol-ygonaceae)荞麦属(Fagopyrum Mill)一年生草本植物(中国植物志,2004)。栽培种苦荞有着较长的栽培历史,广泛种植于亚洲等地,在我国主要分布在西南山区、云贵高原及陕西和山西等(莫日更朝...  (本文共6页) 阅读全文>>