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滇重楼茎叶皂甙Ⅱ诱导白血病细胞凋亡及其机制的研究

目的:探讨从滇重楼茎叶中提取的化学结构明确的滇重楼茎叶皂甙Ⅱ(DRGⅡ)诱导白血病细胞凋亡及其作用机制。方法:采用倒置相差显微镜、荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化:流式细胞术检测细胞周期与凋亡及磷脂酰丝氨酸(PS)转位;免疫组织化学法分析DRGⅡ对K562细胞Bcl-2、Bax、Fas蛋白表达的影响。结果:①5ug/mlDRGⅡ处理K562、HL60细胞24h时,细胞出现大小不等,形状不规整,胞核分裂固缩,染色质浓集等形态特征。②5ug/mlDRGⅡ分别处理K562、HL60细胞24h、48h及72h时均出现亚二倍体峰,并随作用时间的延长而增加。K562细胞出现G2/M期阻滞,HL60细胞出现S期阻滞。③5ug/mlDRGⅡ处理K562细胞24h时,11.2%的细胞出现PS转位,阳性对照组仅3.55%。④免疫组织化学染色表明处理组K562细胞低表达Bcl-2蛋白,Bax蛋白无明显变化,Fas蛋白表达较对照组无明显上升。结论:D  (本文共32页) 本文目录 | 阅读全文>>

昆明医科大学
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滇重楼茎叶总皂甙抗人白血病祖细胞作用的研究

目的:探讨从滇重楼茎叶中提取的滇重楼茎叶总皂甙抑制人白血病祖细胞并诱导白血病祖细胞凋亡及其作用机制。方法:①:取20例髓系白血病(AML,CML)患者与20例淋巴细胞白血病(ALL,CLL)患者的新鲜骨髓标本,用淋巴细胞分离液分离出其骨髓中的白血病祖细胞;并用流式细胞仪检测白血病祖细胞的含量。②:采用四甲基偶氮哇蓝(MTT)法测定不同时间和不同浓度的滇重楼茎叶总皂甙对白血病祖细胞的生长抑制作用,计数半数抑制浓度(IC50);③流式细胞术(FCM)检测滇重楼茎叶总皂甙(3μg/ml)作用髓系白血病祖细胞24,48小时后的凋亡及磷脂酰丝氨酸转位(PS)。结果:①分别用5个浓度的滇重楼茎叶总皂甙(5μg/mL、4μg/mL、3μg/mL、2μg/mL、1μg/mL)处理20例髓系白血病(AML,CML)患者的髓系白血病祖细胞24,48,72小时,并用相同浓度的表柔比星作对比,发现滇重楼茎叶总皂甙可以抑制髓系白血病祖细胞的增殖,其抑制作...  (本文共54页) 本文目录 | 阅读全文>>

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滇重楼茎叶总皂苷抑制白血病K562细胞分子机制的研究

[目的]探讨从滇重楼地上部分中提取的滇重楼茎叶总皂苷抑制白血病细胞株K562的分子作用机制。[方法]①:滇重楼茎叶总皂苷处理K562细胞株并设立实验组和对照组②:收集细胞,提取细胞总RNA,搜索人β-catenin基因及β-actin基因(?)nRNA全长序列,设计引物,以Trizol法提取总RNA,逆转录,SYBR法real-time PCR检测人β-catenin基因mRNA水平相对表达差异,实验以人内参基因β-actin为对照,每样品进行3次平行实验重复,每次检测设置3个复孔③收集细胞,提取总蛋白,以BCA法测定蛋白浓度,蛋白进行SDS-PAGE,转膜,抗人β-catenin抗体孵育,二抗孵育,ECL显色,压片曝光,拍照记录结果,分析人β-catenin蛋白水平相对表达差异,实验以人内参P-actin蛋白为对照,每样品进行3次平行实验重复。[结果]①分别用0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/...  (本文共51页) 本文目录 | 阅读全文>>

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滇重楼皂甙对白血病K562细胞抑制作用的研究

[目的]以滇重楼皂甙Ⅱ为对照,通过检测细胞增殖抑制、细胞形态、周期和凋亡,探讨滇重楼皂甙Ⅴ对白血病K562细胞的影响。[方法]1.取培养好的K562细胞,分别加入滇重楼皂甙Ⅴ和滇重楼皂甙Ⅱ,电镜下观察细胞形态的差异;2.取培养好的K562细胞,分别加入滇重楼皂甙Ⅴ和滇重楼皂甙Ⅱ,设置5个浓度梯度:1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml,取4个时间点:24小时、48小时、72小时、96小时,观察药物对细胞的增殖和抑制作用。3.取培养好的K562细胞,加入滇重楼皂甙Ⅴ,设置4个浓度梯度:2.5ug/ml,5μg/ml,7.5μg/ml,10μg/ml,观察滇重楼皂甙Ⅴ对细胞周期抑制的最佳药物浓度,并以此浓度为标准,分别加入滇重楼皂甙Ⅴ和滇重楼皂甙Ⅱ,设置5个时间点:0小时、24小时、48小时、72小时、96小时,观察两种药物对K562细胞G2/M期的影响。4.根据前研究中的最佳药物浓度,分别加入滇重楼皂...  (本文共53页) 本文目录 | 阅读全文>>

《德宏师范高等专科学校学报》2017年02期
德宏师范高等专科学校学报

滇重楼主要病虫害及其防治

滇重楼是重要的名贵中草药,在云南白药中具有不可代替的作用。滇重楼主要来自野生,目前尚无大规模人工种植...  (本文共4页) 阅读全文>>

《致富天地》2019年12期
致富天地

玉龙 着力打造“云药之乡”

丽江市玉龙县中药材种植历史悠久,因资源禀赋独特、推进有力、技术成熟,目前已成为云南最大的滇重楼种植基地。截至2018年底,全县滇重楼种植面积达1.27万亩,总...  (本文共2页) 阅读全文>>

《世界中医药》2018年12期
世界中医药

滇重楼无公害栽培关键技术

滇重楼产区由于长期缺乏系统、科学的种植技术规范,规范化生产程度较低、病虫害严重、滥用化肥和农药等情况普遍存在,严重制约了滇重楼的可持续利用和...  (本文共5页) 阅读全文>>