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镉诱导HEK293细胞凋亡机理的研究

镉可以诱导机体多种组织细胞发生凋亡。研究镉诱导的细胞凋亡对于镉的分子毒理学机制的阐明和镉所致的损伤与致癌机理的研究具有重要意义。本文对镉诱导细胞凋亡发生机制做了如下研究工作:1镉诱导HEK293细胞凋亡采用MTT法检测CdCl_2的细胞增殖抑制作用;通过倒置显微镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等综合鉴定CdCl_2诱导的细胞凋亡。结果显示:CdCl_2能显著地抑制细胞的增殖,并可导致典型的细胞凋亡。但CdCl_2诱导的细胞凋亡具有时间和浓度范围的依赖性,超出这一范围则主要表现为坏死。2镉诱导HEK293细胞凋亡的线粒体途径通过激光共聚焦检测线粒体膜电位,应用Western blot法和荧光免疫法测定Caspase-3酶原、Bcl-2蛋白的变化以及检测AIF蛋白在细胞中的定位,应用琼脂糖凝胶电泳和Western blot法分析Bcl-2的抑制凋亡作用。结果表明:CdCl_2诱导的HEK293细胞凋亡很大程度上是通过作用于线粒体  (本文共80页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京师范大学
南京师范大学

氧化应激及Bcl-2在镉诱导的HEK293细胞凋亡机制中的研究

镉可以诱导机体多种组织细胞发生凋亡。研究镉诱导细胞的凋亡对于镉的分子毒理学机制的阐明和镉所致的损伤与致癌机理的研究具有重要意义。本文对镉诱导细胞凋亡发生机制作了如下研究工作:1镉诱导HEK293细胞凋亡与氧化应激作用在37℃、5%CO_2条件下,HEK 293细胞分别在不同浓度氯化镉或经过不同处理时间孵育后,用流式细胞仪测细胞凋亡率,用分光光度法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase LDH)活性变化,胞浆内的活性氧(ROS)水平用流式细胞仪和激光共聚焦检测。结果显示:在一定浓度范围内随着镉浓度的升高,凋亡率升高,60μmol/L氯化镉诱导细胞6h,凋亡率达到最高;细胞内ROS生成量明显增多。镉处理后,细胞培养上清液LDH活性都有不同程度的升高,并呈现剂量-时间效应正相关。提示:镉诱导HEK293细胞凋亡的机制与ROS上升有关。2活性氧在镉致HEK293细胞凋亡中的作用机理用分光光度法检测细胞内丙...  (本文共74页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物学杂志》2017年05期
生物学杂志

重组人白细胞介素7在HEK293细胞中稳定分泌表达

通过构建人白细胞介素7的重组真核表达载体,转染HEK293细胞,实现IL-7在HEK293细胞中的稳定分泌表达,为生产试剂级的IL-7奠定基础。从质粒p LV-CMV-EF1-GP-r IL-7中扩增人IL-7全长基因,并将其构建于pc DNA3.1真核表达载体上。利用脂质体法将重...  (本文共5页) 阅读全文>>

中国医科大学
中国医科大学

非折叠蛋白质应答对HEK293细胞迁移与粘附的影响

目的非折叠蛋白质应答(the unfolded protein response,UPR)是一个复杂的从内质网到细胞核的信号传导过程,最早发现于酵母。当内质网中未折叠或错误折叠的蛋白质增加时,这种信息可以通过特定机制传递到细胞核从而调节内质网分子伴侣(molecular chaperone)如Grp(glucose regulated pro-tein,Grp)78、Grp94和PDI(protein-disulfate isomerase,PDI)等的表达,帮助未折叠或错误折叠的蛋白质折叠成正确的构象,恢复其功能。对于不能正确折叠的蛋白质或蛋白质前体,通过内质网相关的降解作用(ER associateddegeneration,ERAD)将其降解;PERK(PKR-like endoplasmic reticulum ki-nase,PERK)通过磷酸化eIF-2α而引起广泛的蛋白质合成抑制,从而减轻内质网的负荷;ATF6α(...  (本文共84页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物工程学报》2006年01期
生物工程学报

流体动力对HEK293细胞的细胞团形成及细胞生长和代谢的影响

利用HEK293细胞在悬浮培养中具有聚集成团的体外培养特性,在250mL的Bellco的搅拌培养体系中,以HEK293细胞团的粒径、细胞数、细胞活力、葡萄糖比消耗率(qglc)、乳酸比产率(qlac)和乳酸转化率(Ylacglc)为观察指标,考察HEK293细胞在搅拌速度分别设置为25、50、75和100rmin的培养条件下的细胞团形成、粒径分布以及细胞生...  (本文共6页) 阅读全文>>

《生物学杂志》2016年01期
生物学杂志

纳米氧化锌对HEK293细胞的毒性作用研究

探讨纳米氧化锌浓度和尺寸效应对HEK293细胞的毒性作用以及其产生毒性的原因。分别用不同浓度的纳米氧化锌(15 nm)和不同尺寸的纳米氧化锌:常规氧化锌(颗粒直径≤1μm)、15 nm氧化锌、30 nm氧化锌及90nm氧化锌处理HEK293细胞,48 h后,MTT检测纳米氧化锌对HEK293细胞活性的影响,流式细胞仪检测纳米氧化锌对HEK293细胞凋亡的影响,ROS检测试...  (本文共5页) 阅读全文>>

《农业生物技术学报》2012年03期
农业生物技术学报

纳米氧化锌对人胚肾HEK293细胞的遗传毒性

纳米氧化锌在人体内积蓄产生生物毒性,引起了人们对其安全性的重视。为了评价纳米氧化锌的遗传毒性,设置10、25、50、75和100mg/L5个剂量组的纳米氧化锌培养液与人胚肾细胞(HEK293细胞)分别接触培养12、24和48h后,采用单细胞凝胶电泳(SCGE)试验...  (本文共5页) 阅读全文>>