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脂质体佐剂的应用前景

自从1964年第一次制备出脂质作以后,脂质体作为免疫佐剂  (本文共1页) 阅读全文>>

南京农业大学
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肌肉生长抑素基因的克隆、表达和基因工程疫苗的研制及在猪体上的应用

肌肉生长抑制激素(myostatin,MSTN)是骨骼肌的负调控因子,是影响肌肉生长与发育的重要因素。为了促进猪生长后期肌肉的快速增长,就需要消除MSTN对肌肉的负调控作用。本研究通过基因工程的手段,从狮头鹅大腿肌肉中获得MSTN作为免疫原,并采用不同的免疫佐剂,制备了肌肉生长抑制激素的基因工程疫苗,对生长肥育猪进行主动免疫,使猪产生抗MSTN抗体,以颉颃体内产生的肌肉生长抑制激素,促进猪肌肉的生长,并分别比较以油乳剂和脂质体为免疫佐剂的两种疫苗免疫效果。1.狮头鹅肌肉生长抑制素基因成熟肽的克隆及其在大肠杆菌中的表达根据扩增的狮头鹅的MSTN基因cDNA全长序列以及成熟肽序列,设计一对引物,并分别在两引物前设计2个酶切位点BamH Ⅰ和Sac Ⅰ,亚克隆狮头鹅肌肉生长抑制激素的成熟肽蛋白编码基因,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,经酶切、PCR鉴定后,构建了狮头鹅原核单纯表达载体pRSETA-MSTN-m,经测序鉴定表明...  (本文共95页) 本文目录 | 阅读全文>>

《动物医学进展》2006年02期
动物医学进展

脂质体作为疫苗免疫佐剂的应用研究进展

脂质体作为一种新型疫苗佐剂可同时增强机体的体液和细胞介导免疫应答,对疫苗有很强的增效作用。通过分析脂质体的作用机...  (本文共5页) 阅读全文>>

南京农业大学
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分子佐剂对生长抑素基因免疫的作用及其机制研究

以生长抑素基因(SS)与乙肝表面抗原(HBsAg,S)基因融合的真核表达质粒pES/2SS为基础,制备S/2SS与GM-CSF基因的融合表达质粒和基因佐剂质粒及细菌DNA等,免疫小鼠及湖羊,探讨影响生长抑素基因疫苗免疫应答及促生长效果的因素,了解生长抑素基因免疫动物的作用机制,建立合适的生长抑素基因免疫程序,为最终获得经济有效的生长抑素基因免疫方法和疫苗、开发促生长、提高畜牧生产效率的新技术奠定基础。1.S/2SS与GMCSF基因的融合表达质粒和基因佐剂质粒的构建①pES/2SS-GMCSF表达产物抗原表位预测 应用DNA软件分析质粒pES/2SS-GMCSF及pES/2SS融合基因表达产物的结构和理化特性,发现二者S/2SS区域抗原表位一致。同样,在插入生长抑素氨基酸序列的2个区域存在抗原表位。在pES/2SS-GMCSF质粒中,S/2SS区域以外有另外的抗原表位区,推测GMCSF不改变S/SS表达产物抗原表位,且能够增强生...  (本文共144页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川农业大学
四川农业大学

猪白细胞介素2、4分子佐剂对猪口蹄疫疫苗免疫增强作用研究

如何增强动物的抗病防御能力和免疫应答水平,最大限度地提高疫苗的免疫效果是当前我国防制口蹄疫生产实践中迫切需要解决的问题。本研究从分子免疫佐剂的角度出发,设计了猪IL-2、4真核表达质粒分别同口蹄疫疫苗联合免疫猪,观察猪白细胞介素2、4分子佐剂对口蹄疫疫苗免疫效果的影响。采用OIE/FAO口蹄疫世界参考实验室确认的,检测FMDV抗原和血清应优先选用的ELISA法,分别在免疫后0天、15天、30天、60天、90天收集8组共64头猪的血清,检测口蹄疫特异性抗体,比较各组试验猪的体液免疫应答水平。实验结果表明:脂质体+VR1020-IL-4组(B组)抗体滴度和保护率比其它组高:脂质体+VR1020-IL-2组(A组)、B组、免疫加强组(C组)的抗体水平和保护率接近(P>0.05),A组、B组、C组比一次免疫组(D组)、VR1020-IL-2组(E组)、VR1020-IL-4组(F组)、空脂质体组(G组)以及空白对照组(H组)的抗体水平和...  (本文共56页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业大学
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新孢子虫NcSRS2 DNA疫苗的研究

新孢子虫(Neospora caninum)是引起犬运动神经系统疾病的一种顶复合体寄生原虫,并且是世界范围内造成奶牛流产的主要原因。目前,还没有防治新孢子虫病的有效措施。一般认为疫苗免疫是预防奶牛流产和降低经济损失的可行性措施。为此,我们进行了新孢子虫NcSRS2DNA疫苗的研究。根据新孢子虫NcSRS2基因序列,设计了一对含有Kozak序列、Pst Ⅰ和Xba Ⅰ酶切位点的引物。以含有NcSRS2基因的质粒P43为模板,利用聚合酶链反应(PCR)扩增获得NcSRS2 ORF基因片段,用Pst Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切该片段,回收得到含有以上两个酶切位点粘端的NcSRS2 ORF基因,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的pcDNA3.1(+)真核表达载体中,获得重组质粒PcNCSRS2。经PCR鉴定、限制性内切酶分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正确性。纯化无内毒素的重组真核表达质粒pcNcSRS2,脂质体介导方法转染哺乳...  (本文共101页) 本文目录 | 阅读全文>>