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奶牛金黄色葡萄球菌乳腺炎研究进展

奶牛乳腺炎是世界范围内造成奶牛业经济损失最严重的疾病之一,临床研究表明,金黄色葡萄球菌已成为首要的奶牛  (本文共2页) 阅读全文>>

山东农业大学
山东农业大学

奶牛乳腺炎病因学和金黄色葡萄球菌的分子调查及Fnbp蛋白免疫

乳腺炎是威胁奶牛业最为频繁和损失最为严重的疾病之一,世界每年因乳腺炎的损失超过350亿美元,乳腺炎主要包括临床型和隐性乳腺炎,临床型乳腺炎可引起弃奶、奶产量暂时性减少和奶牛的过早淘汰;隐性乳腺炎可引起乳腺慢性感染从而造成奶产量长期下降。尽管国内外对乳腺炎进行了大量研究,但仍存在众多不足:首先对引起乳腺炎的病原菌缺乏系统研究;针对近些年来引起乳腺炎的主要病原菌缺少快速简捷的检测方法;尤其对目前乳腺炎的主要病原菌金黄色葡萄球菌缺少分子流行病学资料;目前国内外还缺少预防金黄色葡萄球菌效果较好的疫苗;目前我国对隐性乳腺炎还缺乏重视;我国众多奶牛散养户在顽固性乳腺炎面前束手无策等等,为探讨、解决以上问题,进行了本项研究,主要结果如下:1.对不同类型类型乳腺炎的细菌学系统分析对山东7个地区14个奶牛场做了临床型和隐性乳腺炎调查,并且采取了临床乳腺炎病牛234个乳样,隐性乳腺炎241个乳样分别做了细菌学检查,结果表明:泌乳期临床型乳腺炎病原菌...  (本文共147页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
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奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌基因工程疫苗构建及实验免疫

本研究利用分子生物学、细菌学、免疫学及基因工程和DNA重组技术等理论和方法,以研制安全有效的奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌基因工程疫苗为目的,基于金黄色葡萄球菌的基因组结构、感染与致病以及免疫反应等特点,甄选具有主要抗原活性的纤黏连结合蛋白A(FnbA)配基结合区基因和凝集因子A(ClfA)及其活性基因作为研究对象,通过PCR获得目的基因,利用原核表达系统制备了可溶性的重组蛋白,纯化后进行了小鼠免疫试验;以安全性真核表达载体pVAX1为基础,扩增牛白介素18基因(bIL18)作为基因佐剂,构建了系列单独表达或共表达pFnbA、ClfA和bIL18基因的侯选重组核酸疫苗质粒,开展了小鼠免疫试验研究。同时,通过不同疫苗组合、添加佐剂以及免疫-增强(Prime-boost)等策略探讨了联合免疫在临床应用的可行性。运用血清ELISA抗体检测、Th1/Th2类细胞因子含量测定、T细胞增殖实验等方法对免疫小鼠的各项指标进行综合评价,结果表明,所构...  (本文共181页) 本文目录 | 阅读全文>>

扬州大学
扬州大学

应用表达谱芯片技术和microRNA测序筛选奶牛金黄色葡萄球菌人工诱导乳腺炎关键基因的研究

奶牛乳腺炎是奶牛养殖业中流行最广,造成经济损失最大的一种奶牛疾病,国内外对奶牛乳腺炎的研究已经有百余年历史,但是至今仍未彻底解决这一难题。金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳腺炎的主要致病菌之一,通过研究奶牛乳腺感染金黄色葡萄球菌后引起乳腺炎发生过程中miRNAs和基因的特异性表达,可以有目的地调节炎症发生中某些蛋白的表达,有利于发展出一套新的奶牛乳腺炎预防、治疗方法。本研究利用金黄色葡萄球菌人工感染中国荷斯坦奶牛乳腺,构建金黄色葡萄球菌人工感染奶牛乳腺炎疾病模型;再分别采集金黄色葡萄球菌诱发乳腺炎和正常健康乳腺组织提取总RNA,分离、构建文库。利用Affymetrix牛基因组表达谱芯片技术分析金黄色葡萄球菌人工感染奶牛乳腺组织引起乳腺炎后全基因组范围内的基因差异表达,并利用Q-PCR技术对基因芯片的结果进行验证,对差异表达基因进行GO和Pathway分析。同时利用Solexa高通量测序技术分析健康乳腺和乳腺炎乳腺的miRNA表达差异;利...  (本文共93页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
南京农业大学

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌油乳剂灭活疫苗的研制及免疫效果评价

乳腺炎是导致奶牛业损失惨重的一种奶牛多发病,该病主要由细菌引起,在牛群中广泛存在。该病病原菌种类复杂,至今仍无满意的结果,目前主要以抗生素治疗为主。抗生素的残留和耐药菌株的出现,造成奶品质下降和治疗难度增加的同时也存在一些潜在的危害,所以迫切需要研究新的预防与治疗方法。各国研究证实,乳腺炎重在预防,研制乳腺炎疫苗控制该病的发生迫在眉睫。本实验主要研究结果如下:1.在南京地区三个奶牛场调查发现金黄色葡萄球菌是奶牛乳腺炎的最主要致病菌。为筛选金黄色葡萄球菌疫苗株,从53株金黄色葡萄球菌乳样分离株中挑选了培养和形态典型的六株进行生化试验和传代稳定性试验,进一步研究这六株菌的致病性因子,凝固酶、耐药性和溶血效价。为分析金黄色葡萄球菌的致病力,建立了奶牛乳腺炎的鼠关节炎模型,对TQ-1、XG-2、TQ-2和XL-1等四株生化典型、传代稳定、致病因子全面的分离株进行鼠致病力试验,发现XG-2株致病力最强。2.为筛选抗原谱典型的葡萄球菌菌株,...  (本文共64页) 本文目录 | 阅读全文>>

扬州大学
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奶牛金黄色葡萄球菌人工诱导型乳腺炎基因表达谱分析

本试验旨在研究奶牛金黄色葡萄球菌型乳腺炎感染后基因的表达变化。运用基因表达谱芯片和实时荧光定量PCR技术对差异表达基因进行筛选、分析和验证,从而找出奶牛金黄色葡萄球菌型乳腺炎免疫应答过程中的关键候选基因。本试验选取了3头中国荷斯坦奶牛作为供试奶牛,利用金黄色葡萄球菌人工感染其乳腺,并观察感染后奶牛的全身反应,感染后24h,利用临床诊断、奶牛乳中体细胞计数等方法诊断奶牛成功感染乳腺炎后,采用外科手术的办法采集供试奶牛乳腺组织样本,利用Agilent牛基因组表达谱芯片分析供试奶牛乳腺组织全基因组范围内的基因差异表达结果,利用Q-PCR技术对基因芯片的结果进行验证分析,并对芯片结果及Q-PCR结果进行关联性分析。同时对差异表达基因进行GO和Pathway等功能分析,主要结果如下:1、基因表达谱芯片分析共筛选出显著差异表达基因297个,其中188个基因上调表达,109个基因下调表达(FC2,P0.05)。2、对差异表达基因进行GO分析,...  (本文共75页) 本文目录 | 阅读全文>>