分享到:

防御素的发现十分重要

9月26日,何大一教授在美国召开新闻发布会,公布了他所在的实验室──美国洛克菲勒大学戴蒙德艾  (本文共1页) 阅读全文>>

权威出处: 科技日报2002-11-07
武汉大学
武汉大学

蝎和人防御素多肽新生物学功能的发现及作用机制研究

防御素是一种在先天免疫和适应性免疫中发挥了极其重要的作用的抗菌肽。近年来新的研究工作正在不断地丰富人类对它们生物学功能的全面认识。例如,我们课题组2015年以来首次报道了真菌防御素和人源防御素能够抑制T细胞膜上钾离子通道Kv1.3电流,调节细胞因子分泌的功能(Feng,Yang et al.2015,Xiang,Xie et al.2015,Xie,Feng et al.2015,Yang,Feng et al.2015)。鉴于防御素广泛分布在真菌、植物、无脊椎动物和脊椎动物中,本论文拟创新开展无脊椎动物蝎防御素和深入开展脊椎动物人防御素的新功能与机制研究。蝎在四亿多年前完成了由带有尖刺尾针的海蝎到与现生蝎相似毒腺水蝎的自然进化,随后进一步进化为陆生动物,因而被称为“活化石”。蝎子作为众所周知的有毒动物,其神经毒素的分子进化一直是科学界中活跃的科学问题。鉴于蝎毒液器官“从无到有”的进化历程和蝎防御素与经典蝎神经毒素的氨基酸残基序...  (本文共113页) 本文目录 | 阅读全文>>

西北农林科技大学
西北农林科技大学

骆驼β-防御素-1(caBD-1)的分子克隆和组织表达

内源性抗微生物肽是生物体内先天性免疫的重要组成成分,防御素(defensins)是广泛分布于动物和植物界的一类富含半胱氨酸的阳离子内源性抗微生物肽,是内源性抗微生物肽中的一个大家族。根据防御素分子内半胱氨酸的位置和连接方式、前体性质及表达位置的差异可分为α-防御素、β-防御素、θ-防御素、昆虫防御素和植物防御素五种类型。β-防御素主要分布于哺乳动物的黏膜上皮细胞内,所以,β-防御素被确认为黏膜表面抗微生物屏障的组成成分。已有研究报道在哺乳动物—牛、羊、猪、鼠、猴体内有β-防御素的表达。本研究中我们在骆驼体内又发现了一种新的β-防御素,命名为骆驼β-防御素-1(camelβ-defensin-1,caBD-1)。从骆驼舌黏膜上皮组织中提取总RNA,根据反刍动物—牛和羊β-防御素cDNA的保守序列设计了一对引物,采用RT-PCR技术扩增出caBD-1的cDNA,并重组到pBlueselect T载体,经限制性内切酶图谱分析后进行DN...  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>

内蒙古农业大学
内蒙古农业大学

蒙古绵羊雌性生殖道β-防御素(sBD-1)表达的研究

内源性抗微生物肽是生物体内先天性免疫的重要组成成分,防御素(defensins)是其中一大家族。β-防御素是防御素家族中的的重要成员,它主要分布于哺乳动物和鸟类的粘膜上皮组织内,已被确认为黏膜表面抗微生物屏障的组成成分。因目前未见有关羊雌性生殖道防御素的研究报道。也未见生殖道防御素表达和雌激素、孕激素关系的研究报道。本文系统研究了蒙古绵羊雌性生殖道β-防御素(sBD-1)的表达情况,并系统研究了生殖道β-防御素的表达和雌激素、孕激素的关系。结果如下:1运用RT-PCR技术,首次从蒙古绵羊雌性生殖道各器官中证实,β-防御素(sBD-1)在蒙古绵羊输卵管、子宫、子宫颈、阴道粘膜上皮内均有表达。并且发现,sBD-1在雌性生殖道的各个器官内的表达量不同。其中在子宫颈的表达量最高,子宫和输卵管内的表达量次之,阴道内的表达量最少。2将蒙古绵羊输卵管组织sBD-1的RT-PCR产物回收、地高辛探针标记,应用原位杂交技术,检测sBD-1 mRN...  (本文共136页) 本文目录 | 阅读全文>>

石河子大学
石河子大学

人β防御素的改构及活性研究

目的:以人β防御素(hBDs)为基础,通过改变特定氨基酸序列获得原防御素的突变体,旨在提高其杀菌活力,同时降低盐敏感性,并初步探讨防御素的构效关系与机理。摸索防御素的原核表达途径。方法:(1)Fmoc法合成防御素,对合成后的防御素进行初步的纯度分析以及结构分析。(2)对合成的防御素进行杀菌以及盐敏感性的分析,并应用透射电镜观察防御素的作用方式。(3)用MTT法对合成防御素进行细胞毒性分析,同时通过溶血实验来分析其对血细胞的毒性。(4)将hBD-3进行原核表达纯化。结果:(1)在人β防御素1-4(hBD-1-4)中,hBD-3对测试菌有最强的杀菌活力及最强的耐盐活力,对测试菌株的百分之九十杀死率(LD90)在15μg/ml以下。同时,合成的hBD-1抑菌活力很低,LD90超过100μg/ml。合成的hBD-2,4抑菌活力弱于hBD-3(P<0.01),但并没有发现明显的对革兰氏阴阳菌的选择性。(2)hBD-3的N端缺失突变体当失去...  (本文共61页) 本文目录 | 阅读全文>>

甘肃农业大学
甘肃农业大学

奶牛子宫内膜抗菌肽分离纯化、BNBD5基因的克隆及原核表达

内源性抗微生物肽是生物体内先天性免疫的重要组成部分,防御素是广泛分布于动物和植物界的一类富含半胱氨酸的阳离子内源性抗微生物肽,是内源性抗微生物肽中的一个大家族。是由生物细胞特定基因编码,经特定外界条件诱导产生的一类多肽。具有抵抗外界微生物侵害、消除体内突变细胞的作用。根据防御素分子内半胱氨酸的位置和连接方式、前体性质及表达位置的差异可分为α-防御素、β-防御素、θ-防御素、昆虫防御素和植物防御素五种类型,防御素主要分布于哺乳动物的黏膜上皮细胞内,所以,防御素被确认为黏膜表面抗微生物屏障的组成成分。在实验中以奶牛子宫为实验材料,从奶牛子宫内膜上皮组织中提取总RNA,根据已发表的牛抗菌肽基因序列设计引物。经RT-PCR扩增抗菌肽DNA片段,回收纯化PCR产物,连接pMD18-T载体,转化感受态细胞DH5a。在含X-Gal、Amp及IPTG的LB平板上筛选阳性克隆,经PCR及双酶切鉴定后,对目的片段进行测序。结果表明,RT-PCR扩增...  (本文共92页) 本文目录 | 阅读全文>>