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水牛的生物学特性

$T水牛饲养系列讲座之二$E$$水牛是食草的反刍家畜,其瘤胃发达,并且其瘤胃内的微生物和原  (本文共1页) 阅读全文>>

广西大学
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水牛胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特性的研究

水牛是中国南方地区较为重要的一种家养动物,在农业耕作上一直将其作为劳力使用。近些年来随着对水牛研究的不断深入,其经济利用价值逐渐显现出来,特别是将其作为生物反应器生产目的蛋白。目前尚未建立生物学特性明确的水牛细胞系,限制了在细胞水平研究和长期保存水牛种质资源,也妨碍了通过将稳定表达外源基因的细胞作为核移植供体,获得基因改造水牛的研究。因此,建立水牛细胞系并对其进行生物学特性的研究非常重要。从南宁市内屠宰场获取88只水牛胎儿,对其耳缘、肾脏、皮肤进行原代培养,从分离获得的成纤维细胞中挑选出形态正常、生长动力学较好的细胞系,最后挑选出2个水牛胎儿皮肤成纤维细胞系(BFSF101107、 BFSF101007)、1个水牛胎儿耳缘成纤维细胞系(BFEF)、1个水牛胎儿肾脏成纤维细胞系(BFKF)、1个水牛胎儿肾脏扁平状成纤维细胞系(BFKF-Flat)。然后对这些细胞系分别进行生长动力学测定、冻存前/复苏后活率测定、微生物污染检测、核型...  (本文共92页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西大学
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水牛睾丸支持细胞生物学特性及其FGF2过表达细胞系建立的初步研究

水牛睾丸支持细胞(Sertoli cells)以及其分泌物对于水牛精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)的增殖有重要的影响。支持细胞环绕在精原干细胞周围,为精原干细胞的正常生长提供稳定的空间,同时参与形成血睾屏障,保护精原干细胞环境的稳定,为精原干细胞的增殖提供物理支持,其分泌的生长因子如GDNF和FGF2等,对精原干细胞的增殖具有重要作用,FGF2是干细胞培养过程中重要组成成分,对于处在未分化状态的干细胞是必需的,并且对中胚层和外胚层来源的细胞具有促分裂作用。本论文探索了水牛支持细胞分离纯化方法,对比了幼牛及成年牛支持细胞中FGF2表达差异并观察了它们作为饲养层培养水牛SSCs的效果,构建了支持细胞FGF2过表达细胞系,以期为建立优化的水牛精原干细胞体外培养系统奠定基础。现将本论文的研究结果简述如下:第一章:开展了水牛睾丸支持细胞组织定位及分离纯化研究。研究结果显示:以anti-DDX4作为...  (本文共75页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西大学
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水牛脂肪干细胞生物学特性及表观遗传修饰检测的初步研究

本研究从水牛腹股沟处脂肪组织中,通过胶原酶消化法分离出水牛脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs),观察原代及传代后细胞形态。将分离得到的细胞用低糖-DMEM(Dulbecco,s modified Eagle,s medium low glucose,LG-DMEM)和 α-MEM(α modified Eagle's medium)培养和传代,进行生长曲线的评定,建立一种适合水牛ASCs分离和培养的方法。利用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法检测水牛ASCs多能性相关基因表达情况,选择适当抗体,利用流式细胞技术,检测水牛ASCs多种表面抗原的表达情况,将水牛ASCs体外诱导分化(成脂、成骨、成软骨)后进行相关检测,初步探索水牛ASCs的诱导分化能力。利用实时荧光定量PCR(quantit...  (本文共64页) 本文目录 | 阅读全文>>

《动物医学进展》2018年12期
动物医学进展

信阳水牛成纤维细胞的体外培养及生物学特性分析

为建立信阳水牛成纤维细胞系,以信阳水牛耳缘组织为实验材料,采用组织块培养法进行原代和传代培养,并对其形态学、生长曲线、细胞活力、染色体、微生物检测等生物学特性进行分析。结果表明,...  (本文共4页) 阅读全文>>

广西大学
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水牛胚胎生殖样细胞分离培养及相关研究

1.从形态观察、碱性磷酸酶染色、表面抗原的免疫组化检测、多能性的标志基因表达和体外分化潜能等方面对水牛胚胎生殖样细胞(EG-likecells)的生物学特性进行了研究。结果发现,水牛EG样细胞形成多层结构的克隆,有明显的边界与饲养层分开,与小鼠的ES/EG克隆形态相似。通过组化染色发现,水牛EG样细胞表达AP、SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4以及OCT-4。另外,RT-PCR结果显示,Fgf4除外,水牛EG样细胞均表达OCT-4、NANOG、SOX2、FOXD3、GP130、STAT3和HEB基因。将细胞延迟培养2个星期后,可以观察到成纤维样细胞,神经样细胞,肌样细胞和上皮样细胞的分化形成。悬浮培养的水牛EG样细胞可以形成简单拟胚体和复杂拟胚体(EB),复杂拟胚体仍然表达FOXD3、GP130、STAT3以及HEB基因,但已经无法检测出OCT-4、NANOG和SOX2这三个基因。此外,三个胚层标志基因的表达也在复杂拟胚体...  (本文共109页) 本文目录 | 阅读全文>>