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结核分枝杆菌H37Rv感染期表面蛋白筛选及宿主相关免疫应答研究

目前,结核病仍是致死率最高的疾病之一,全球几乎1/3人口为潜在结核患者,该人群中10%有发展为活动性结核的可能。MTB致病机理复杂,疫苗研制及诊断研究已成为研究的热点。筛选候选疫苗及检测抗原,有助于深入了解其致病机制。表面蛋白(分泌蛋白、跨膜蛋白等)介导细菌与宿主的相互作用,与宿主最初接触过程中能破坏宿主组织,引起一系列级联反应,在MTB致病过程中起重要作用,并影响宿主免疫防御。MTB表面蛋白具有靶向免疫细胞并在其内部潜伏增殖能力,了解MTB表面蛋白和宿主细胞的相互作用有利于了解MTB的致病机制。本文构建MTB H37Rv全基因组表面蛋白噬菌体展示文库,直接完成了表面蛋白筛选、鉴别、表达纯化及功能分析过程,MTB H37Rv全基因组噬菌体展示文库库容量为105,经过表面蛋白筛选后共得到840个阳性克隆。随机挑选其中200个克隆测序分析,共得到47个包含信号肽序列的表面蛋白,因此预知840个阳性克隆将有188个表面蛋白,与目前软件  (本文共129页) 本文目录 | 阅读全文>>

《微生物与感染》2008年04期
微生物与感染

结核分枝杆菌H37Rv色氨酸合成酶α亚基编码基因的克隆、表达及酶学性质分析

目的克隆表达色氨酸合成酶α亚基编码基因并对其进行功能分析。方法以结核分枝杆菌(简称结核杆菌)H37Rv基因组为模板,扩增trpA基因,构建pET30a-trpA重组质粒;转化重组质粒到大肠埃希菌DH5α并在BL21(DE3)诱导表达,纯化可溶性的结核杆菌重组色氨酸合成酶α亚基(His-rMtTrpA)。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和质谱分析测定相对分子质量(Mr)后,用圆二色光谱(CD)分...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国中医药信息杂志》2000年06期
中国中医药信息杂志

抗痨颗粒对H37RV感染动物体内抑菌的实验研究

为探讨抗痨颗粒的抑菌作用,本文观察了药物对H37RV感染小鼠的作用。结果表明抗痨颗粒对H37RV感染的小鼠具有显著的保护作用,保护率分别为80...  (本文共2页) 阅读全文>>

大连医科大学
大连医科大学

结核分枝杆菌H37Rv分泌滤液中糖蛋白的筛选

目前,结核病仍然是威胁人类健康的主要传染病,据世界卫生组织统计,全球每年约有800万人感染结核分枝杆菌,300万人死于结核病。如何有效的预防和控制结核病是人类面临的一个重要课题。通过对一些细菌的研究表明,细菌糖蛋白与细菌致病性密切相关。其作用包括:保持细胞结构稳定性;细胞表面及胞内识别;细胞粘附,调节及维持许多生化特征:如蛋白可溶性,粘度,表面电荷等。由于目前发现的结核分枝杆菌数量有限,所以寻找和发现新的结核分枝杆菌糖蛋白,研究它们的功能和合成途径,对于全面了解结核病的发病机制以及研制新的抗结核药物或疫苗具有重要意义。通过对天然结核分枝杆菌不同组份(包括细胞壁,细胞膜,细胞质,细菌分泌液等)分别进行研究检测,发现只有在胞外分泌液(culture filtrate protein ,CFP)中有糖蛋白的存在。此外,通过研究结核分枝杆菌糖蛋白的合成机制发现,只有底物是经过分泌途径到达胞外的蛋白,才能在甘露糖基转移酶的作用下形成糖基化...  (本文共86页) 本文目录 | 阅读全文>>

湖北大学
湖北大学

巨噬细胞与结核分枝杆菌H37Rv的蛋白质互作研究

结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,Mtb)是结核病(Tuberculosis)的胞内致病菌,其在人体内的主要宿主细胞为巨噬细胞(Macrophage)。巨噬细胞可以通过先天性免疫过程中吞噬体与溶酶体融合、细胞因子和自由基对结核分枝杆菌杀伤、细胞凋亡以及抗原呈递启动适应性免疫等机制来杀灭胞内的结核分枝杆菌。同时,结核分枝杆菌为了逃避巨噬细胞对它的杀伤,进化出了多种相应的逃逸和潜伏机制。结核分枝杆菌和巨噬细胞之间相互作用机制的阐明,对结核病致病机理的研究以及治疗有着重要意义。本研究以人THP-1细胞(人急性白血病单核细胞株,可诱导分化为巨噬细胞)为研究对象,以结核分枝杆菌蛋白质组芯片作为研究平台,并辅助以定量蛋白质组学技术探究结核分枝杆菌H37Rv与人类THP-1巨噬细胞之间的相互作用。首先,通过流式细胞术、酶联免疫吸附实验等技术,证实THP-1单核细胞受到25 ng/mL丙二醇甲醚醋酸酯(Phorb...  (本文共65页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物信息学》2014年01期
生物信息学

基于约束建模法的结核菌H37Rv代谢网络分析

基于结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株的基因组尺度代谢网络模型iNJ661进行分析,以寻找代谢网络中培养基的关键成分和必要基因。该研究在Matlab平台上利用COBRA工具箱,采用基于约束的建模方法进行动态生长模拟、解空间抽样在酶活性水平上的具体化和基...  (本文共5页) 阅读全文>>