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Eppin优势表位自组装纳米避孕疫苗的构建及实验研究

近年来,以附睾蛋白酶抑制蛋白(epidydimal protease inhibitor,Eppin)为靶点的避孕疫苗研究取得了一定的进展,但仍存在以下问题:(1)采用Eppin优势表位疫苗进行免疫能减少不良反应,但免疫原性差;(2)表位交联载体蛋白可以增强免疫原性,但抗体特异性差;(3) Eppin避孕疫苗的实验研究中通常联合使用免疫佐剂如弗氏佐剂,其在人体中的应用存在安全性问题;因此,解决这一问题的关键在于构建更加安全、有效的避孕疫苗运载体系。本研究以筛选的优势表位为基础,设计构建多价表达抗原的E-Q11自组装纳米肽避孕疫苗,体外实验研究树突状细胞(dendritic cell, DC)对疫苗的摄取及免疫应答,建立避孕疫苗经皮微针免疫方法,对E-Q11自组装多肽的体内免疫效应和抗生育效应进行研究。课题分为三个部分。一、E-Q11自组装肽的构建及表征将前期筛选的Eppin优势抗原表位与具有多价抗原表达特征的自组装纳米肽(QQK  (本文共104页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中华男科学杂志》2007年02期
中华男科学杂志

附睾蛋白酶抑制剂Eppin的研究进展

附睾蛋白酶抑制剂Eppin是一种睾丸和附睾特异性分泌的蛋白质,精液中含量极为丰富,精子表面大量存在,用重组Eppin免疫的猴子出现不育,...  (本文共3页) 阅读全文>>

《国外医学(医学地理分册)》2011年02期
国外医学(医学地理分册)

附睾蛋白酶抑制剂Eppin蛋白的原核表达及纯化

目的构建人附睾蛋白酶抑制剂Eppin蛋白的重组质粒pET28a(+)-Eppin,并研究该质粒在原核细胞中的表达及纯化。方法本研究以人睾丸组织cDNA为模板获得人Eppin基因片段,将其插入pET28a(+)载体His_6-Tag上游,构建重组质粒pET28a(+)-Eppin,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组人Eppin蛋白后,运用SDS-PAGE进行分析和鉴定。大量表达的重组Eppin蛋白经镍柱亲和层析...  (本文共5页) 阅读全文>>

第三军医大学
第三军医大学

人源附睾蛋白酶抑制剂Eppin蛋白的可溶性表达

人口问题是我国经济可持续发展的重要因素,因此避孕节育研究受到极大的重视。近年来,人类附睾蛋白酶抑制剂Eppin成为男性避孕研究中重要的候选物。人附睾蛋白酶抑制剂(Epidydimal protease inhibitor,Eppin)为分泌蛋白,在结构上包含Kunitze和Wap两个结构域,主要在男性的附睾及睾丸中特异性表达。O’Rond等人于2004年的动物实验中使用重组Eppin蛋白免疫雄猴,获得78%的不育率,抗体高滴度维持数月后下降,72%雄猴恢复了致孕功能;随后的研究发现在射精的过程中Eppin蛋白与精子凝固蛋白(Semenogelin,SEMG1)结合后调控来自前列腺的前列腺特异性抗原(Prostate Specific Antigen,PSA)专一水解SEMG1,并延缓其水解,使得精子处于凝胶保护中,维持精液微环境,免受女性阴道环境的攻击,保证精子正常液化后获能。同时有研究表明Eppin与SEMG1结合能减慢精子运...  (本文共69页) 本文目录 | 阅读全文>>

《基因组学与应用生物学》2019年08期
基因组学与应用生物学

牦牛Eppin基因CDS的克隆及其在附睾不同区段中的表达研究

为了研究牦牛附睾组织中精子成熟的相关机理,并为探讨高原动物的生殖机制提供基本数据。本研究运用基因克隆技术对牦牛附睾Eppin基因CDS全长序列进行克隆,采用生物信息学方法进行分析,Eppin基因和编码序列特征进行了预测和分析。结果表明,牦牛Eppin基因的CDS含有一个405 bp长度的片段,由134个氨基酸编码;牦牛Eppin基因对应的蛋白分子量和理论等电点分别为15.09 ku...  (本文共7页) 阅读全文>>

南京医科大学
南京医科大学

Eppin抗体降低睾丸支持细胞膜阻抗及其抑制精子动力的研究

人口、资源、环境问题是严重影响新世纪人类生存和经济社会发展的关键问题。重点研发安全有效避孕节育新技术和药物,是控制人口数量、提高人口质量所亟待解决的重大科学问题。通常人们认为避孕是女性的责任,但随着女性社会分工及社会地位的提高,人口控制更需要男性发挥积极的作用。然而,男性避孕药物的研发仍无突破性进展,面临着“可靠方法不可逆,可逆方法不可靠”的尴尬局面。众所周知,睾丸产生的精子是不成熟精子,缺乏运动和受精能力。附睾是精子成熟的场所,精子表面存在的大量蛋白必须在附睾中进一步修饰、折叠,发生必要的结构变化,才能使精子适应女性生殖道内复杂的生理变化,获得运动和受精能力,达到功能上的成熟。某些精子表面蛋白的功能缺陷将会影响精子的正常成熟和获能过程,导致男性不育。在研究免疫机制造成的不孕不育过程中,人们已经注意到很多患者体内存在抗精子抗体,提示人们可以通过开发精子膜抗原疫苗达到免疫避孕目的。附睾蛋白酶抑制剂(Epididymal prote...  (本文共107页) 本文目录 | 阅读全文>>