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转ZmABP9棉花抗逆功能分析和CRISPR/Cas9介导的棉花基因定点突变初探

棉花是世界范围内种植范围最广的经济作物之一,同时也是棉籽油和棉纤维的主要来源。但是干旱、高盐等非生物胁迫严重制约着棉花生长、发育和产量。ZmABP9是通过酵母单杂交的方法从玉米(Zea mays)幼胚中克隆筛选得到的一个编码bZIP转录因子的基因,其编码蛋白脱落酸应答元件连接蛋白 9(ABA responsive element binding protein 9,ABP9)能与玉米 catalase1(Cat1)基因的ABRE2元件相互作用。ZmABP9的表达显著提高了拟南芥对多个非生物胁迫的耐受性,但在棉花中的作用研究较少。另外,由于棉花基因组的复杂性,利用CRISPR/Cas9技术对棉花基因组的编辑有一定的困难。因此本课题通过农杆菌介导的遗传转化技术将ZmABP9基因转到棉花中进行抗逆功能分析,同时对通过CRISPR/Cas9系统介导的棉花基因定点突变进行了初步研究,这对培育具有耐旱耐盐的棉花新品系以及通过CRISPR/C  (本文共113页) 本文目录 | 阅读全文>>

扬州大学
扬州大学

基于CRISPR/Cas9的水稻多基因编辑及其在育种中的应用

随着水稻基因组测序的完成,阐明水稻重要基因功能的研究也日渐迫切。利用ZFN、TALEN基因编辑技术已经实现了单个基因的定向敲除,但是对于家族基因的功能分析、基因之间的相互作用、多基因调控同一个复杂农艺性状的阐明则需要多基因突变体进行研究。虽然可以利用传统的杂交方法获得多基因突变体,但是品种间基因渗透和连锁使得之后的筛选工作量加大。近年来发展起来的CRISPR/Cas9基因编辑技术能定向的突变基因,避免了传统多突变体获得过程中的基因连锁和基因渗透现象。因此,利用CRISPR/Cas9多基因编辑技术获得多个基因共敲除突变体不仅对水稻基因功能研究有重大意义而且在水稻育种中有很大的应用价值。本研究在已有的CRISPR/Cas9系统上建立了水稻中CRISPR/Cas9多基因敲除系统,并对该多基因敲除系统进行优化,利用优化过的多基因编辑系统进行水稻中多基因编辑实验。主要研究结果如下:一、CRISPR/Cas9介导的水稻单基因敲除在前人CRI...  (本文共129页) 本文目录 | 阅读全文>>

《土壤与作物》2021年01期
土壤与作物

CRISPR/Cas9系统在水稻分子育种中的应用

CRISPR/Cas9是目前广泛应用的基因编辑技术,其操作方便、效率高、成本低。水稻作为全球粮食安全的战略作物,优质高产的水稻培育尤为重要,CRISPR/...  (本文共9页) 阅读全文>>

《兰州大学学报(医学版)》2020年01期
兰州大学学报(医学版)

利用Crispr/Cas9技术构建影响先天性心脏病关键基因的表达载体

目的利用Crispr/Cas9技术构建影响先天性心脏病关键基因表达载体,为后续基因编辑工作做好前期分子实验基础。方法利用NCBI数据库检索调控先天性心脏病关键基因NKX2-5、GATA4、TBX5,通过生物软件在线设计3个基因对应的sgRNA。对慢性病毒载体lentiCRISPRv2进行BsmB I单酶切,通过胶回收获得线性化载体。利用T4...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国畜禽种业》2020年01期
中国畜禽种业

CRISPR/Cas9基因编辑技术在动物疾病模型构建的应用

CRISPR/Cas9系统是一种能实现精准基因定位的基因编辑技术。在这些年的发展中,基因编辑技术在生物方面取得很大进展,也正是由于这种技术的兴起,C...  (本文共2页) 阅读全文>>

《遗传》2020年05期
遗传

基于CRISPR/Cas9系统在全基因组范围内筛选功能基因及调控元件研究进展

CRISPR/Cas9系统是一种近年来被广泛应用于基因组编辑的强大工具。通过将CRISPR/Cas9系统中的Cas9蛋白突变后,使其失去剪切活性而成为dCas9 (nuclease-dead Cas9),再结合基因功能丧失(loss-of-function,LOF)、基因功能激活(gain-of-...  (本文共9页) 阅读全文>>

权威出处: 《遗传》2020年05期