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生淀粉糖化酶高产菌的选育及产酶机理的研究

生淀粉糖化酶(简称RSDG)是指可以在低于淀粉的糊化温度下,直接作用于未经高温处理、未糊化的生淀粉晶体颗粒,生成葡萄糖的一种淀粉酶。将其用于淀粉分解过程,可以免去高温处理过程,简化生产工艺,节约大量能源。本研究从腐烂的木薯块根中筛选到一株能够分泌生淀粉糖化酶的菌种,经分子鉴定和形态观察,鉴定该菌种为黑曲霉,命名为AspergillusnigerF-01(简称F-01)。通过紫外线和亚硝基胍诱变,得到高产突变株Aspergillus nigerG-11(简称G-11),在淀粉为碳源的产酶培养基上产酶水平达到77.8U/mL,是F-01产酶水平的3.4倍。为了研究是哪些位点突变导致从F-01到G-11产酶水平的提高,分别克隆了F-01和G-11的生淀粉酶糖化酶基因开放阅读框、启动子以及碳源代谢阻遏因子creA,进行了序列比对,并对F-01和G-11的生淀粉酶糖化酶基因和启动子的功能差异进行了分析。通过序列分析发现,F-01生淀粉糖化  (本文共138页) 本文目录 | 阅读全文>>

《广西科学》2017年01期
广西科学

重组草酸青霉生淀粉糖化酶的酶学特性鉴定

【目的】了解在毕赤酵母中表达的来源于草酸青霉(Penicillium oxalicum)GXU20的重组生淀粉糖化酶的酶学特性。【方法】用3,5-二硝基水杨酸法测定pH值、温度、金属离子和化学试剂对纯化的重组生淀粉糖化酶的活力的影响,同时测定酶的底物特异性、酶对生淀粉的吸附能力以及酶对不同生淀粉的水解效率等,用高效液相色谱法对该酶水解生木薯淀粉的产物进行分析鉴定,用扫描电子显微镜观察重组酶对不同生淀粉颗粒的水解方式。【结果】重组生淀粉糖化酶rPoGA15A的最适pH值为4.5,最适温度为65℃,在...  (本文共9页) 阅读全文>>

《基因组学与应用生物学》2015年02期
基因组学与应用生物学

Aspergillus nigerF-01生淀粉糖化酶基因的克隆与序列分析

本研究从Aspergillus niger F-01中克隆到了生淀粉糖化酶菌基因的DNA及c DNA序列。序列分析表明,该生淀粉糖化酶基因DNA序列编码区长2 169 bp,c...  (本文共5页) 阅读全文>>

《微生物学通报》2014年01期
微生物学通报

Aspergillus sp.RSD生淀粉糖化酶的分离纯化及酶学性质

【目的】纯化得到一种生淀粉糖化酶,并对其酶学性质进行分析。【方法】从曲霉RSD发酵液中,经过硫酸铵分级盐析,HiPrep DEAE FF16/10弱阴离子交换层析,凝胶过滤层析,Hiprep 16/10 source 30S阳离子交换层析最终纯化出一种电泳纯的生淀粉酶。【结果】粗酶液纯化倍数为12.65倍,活力回收率为9.02%,SDS-PAGE结果显示该酶的相对分子质量约...  (本文共9页) 阅读全文>>

《中国酿造》2010年07期
中国酿造

青霉固态发酵生产生淀粉糖化酶的条件优化

对青霉Penicillium sp.26固态发酵生产生淀粉糖化酶的培养条件、培养基组成和后续液体培养进行了优化。考察了加水量、添加物起始pH值、培养时间等培养条件及附加碳源、氮源、无机盐和表面活性剂等培养基组成和后续液体培养对产酶的影响。结果表明,适宜的固...  (本文共5页) 阅读全文>>

《应用与环境生物学报》2006年01期
应用与环境生物学报

生淀粉糖化酶产生菌Aspergillus niger(6#)的分离筛选及其产酶条件

从大曲中分离到了1株降解生淀粉能力较强的黑曲霉Aspergillusniger(6#).固体发酵酶活可达2461U/g,RDA值为21.47%;液体发酵酶活可达353U/mL,RDA值为20.3...  (本文共4页) 阅读全文>>