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禽流感病毒(H5N1)基因(h5n1a)在马铃薯中的转化与表达研究——附:乙肝表面抗原(HBsAg)基因转化的对比研究

本研究首次将禽流感病毒(H_5N_1)基因h5n1a导入马铃薯获得表达,并优化了转化系统,为商品化生产转基因植物疫苗提供科学依据。1、为了优化马铃薯(Solanum tuberosum L.)以块茎为受体的再生系统。着重对诱导分化和结薯培养基作了较系统的筛选。以MS为基本培养基,调整激素配比,得到M1、M2、M3、M4等4种培养基。比较试验结果以M4(MS+2.0mg/L BA+3.0mg/L ZT+0.5mg/LNAA+0.5mg/L GA_3)诱导块茎分化的效果最佳,丛芽分化频率达89.4%,分化时间提早约20天。同时筛选了诱导结薯的较优培养方法,获得使试管薯结薯数增加近1倍的壮苗和诱导结薯培养基组合(壮苗:1/2MS+0.5mg/L BA+0.5mg/L GA_3+3%Suc;诱导结薯:MS+2.0mg/LBA+3.0mg/L ZT+10%Suc),为获得高频转化奠定了基础。2、构建了4个植物表达双元载体。p1301BG含  (本文共97页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国免疫学杂志》2017年03期
中国免疫学杂志

禽流感病毒H5N1单克隆抗体的生物学特性鉴定

目的:探讨禽流感病毒单克隆抗体的生物学特性。方法:制备H5N1禽流感病毒的单克隆抗体,鉴定其亚型、效价、血凝抑制活性以及与其他亚型流感病毒的交叉反应性。免疫印迹方法验证单抗与H5N...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国比较医学杂志》2011年12期
中国比较医学杂志

气管插管法接种H5N1病毒感染恒河猴及系统组织病毒检测

目的测试气管插管法接种高致病性禽流感病毒H5N1感染恒河猴的优势效果及疾病分析,为有效感染恒河猴、制备H5N1疾病模型提供实验依据。方法使用人源H5N1病毒液经气管插管滴入恒河猴上呼吸道进行感染,观察感染恒河猴的临床表现,每天采集咽拭子、鼻灌洗液,在感染前2 d感染后第3、5、7天采血,感染后第3和7天分别解...  (本文共5页) 阅读全文>>

北京协和医学院
北京协和医学院

H5N1亚型禽流感病毒样颗粒构建、优化与实验免疫研究

自2003年起,高致病性H5N1亚型流感病毒感染人的事件不断发生,并且衍生出新的基因谱系,其中,2.3.2.1和2.3.4谱系流行最为广泛。高致病性H5N1病毒存在大规模流行的可能性是被大家所公认的,需要对存在流行风险的多个谱系禽流感病毒进行疫苗的研究。目前广泛应用的灭活疫苗只能针对同谱系病毒感染提供免疫保护,利用杆状病毒表达系统生产的无感染性的病毒样颗粒疫苗,因生产成本低、无生物安全风险等优势受到广泛关注,特别是因其具有诱导细胞免疫能力可能针对同型的异源病毒提供免疫保护,而可能用于变异频繁的流感病毒疫苗研究。本研究的目的是应用昆虫杆状病毒表达系统,通过表达模式筛选、佐剂效应蛋白偶联等系列优化研究,研制H5N1病毒样颗粒,并评估对异源病毒感染的免疫保护作用。首先,利用昆虫杆状病毒表达系统研制了包含H5N1 A/meerkat/Shanghai/SH-1 2012 (clade 2.3.2.1) HA、NA和M1蛋白的病毒样颗粒。...  (本文共113页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国疾病预防控制中心
中国疾病预防控制中心

来源于H5N1禽流感患者的广谱抗血凝素蛋白抗体筛选及其功能研究

流感是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病,自20世纪初流感大流行暴发以来,几乎每年都有流感疫情的发生。近年来,除了引发季节性流感的H1N1、H3N2和B型流感病毒之外,一些跨越种属屏障的、新发禽流感病毒(包括H5N1、H5N6、H6N2、H9N2、H7N9和H10N8等)直接感染人,对人类健康造成了巨大威胁,因此,寻找有效的流感治疗措施十分重要。血凝素(Hemagglutinin,HA)是流感病毒表面重要的糖蛋白,也是诱导机体产生抗流感免疫的重要抗原,可以诱导机体产生保护性体液免疫。流感病毒感染或者流感疫苗接种所诱导产生的HA抗体主要针对HA头部,可以阻断病毒与唾液酸受体的结合,对机体起到保护作用,但此类抗体常常具有毒株特异性,不能有效抵抗新发或突发流感病毒的感染。近年来,研究者发现大量可以对不同型或亚型流感病毒产生交叉保护作用的抗HA广谱中和抗体。这类抗体主要靶向HA茎部的保守区域,也有少数靶向头部受体结合区以及其他保守区域,从...  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

H5N1亚型禽流感病毒对家鸽的致病性试验研究

2002年香港水禽及部分野鸟的H5N1亚型高致病性禽流感流行病学调查中,从一只死亡野鸽(Columba livia)分离到H5N1禽流感病毒。作为与人类接触密切的留鸟,鸽是否能对禽流感病毒易感,是否具有传播禽流感病毒的潜在危险,一直是有争议的话题。一方面,在疫情暴发的地区很少见到鸽大批死亡或感染禽流感病毒的报道。另一方面,我国目前尚缺少有关鸽对H5N1亚型禽流感病毒致病性的系统研究以及城市鸽禽流感病毒感染的完整流行病学调查资料。本试验利用禽流感国家参考实验室2002年至2004年间从我国不同地区的鸡、鸭和鸽等不同宿主禽类分离的10株H5N1亚型禽流感病毒感染4周龄家鸽,就H5N1亚型禽流感病毒对家鸽的致病性进行了系统研究。以10~6EID_(50)的禽流感病毒鼻腔感染鸽后,于第3、5、7、10、14天,分别采集存活鸽喉头拭子、泄殖腔拭子,同时剖杀感染鸽各2只,采集各脏器组织并进行病毒滴定和组织病理学分析。于第7、14、21天采集...  (本文共69页) 本文目录 | 阅读全文>>