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胰岛素样生长因子结合蛋白-1基因克隆、表达以及功能研究

胰岛素样生长因子结合蛋白-1基因克隆、表达及功能研究胰岛素样生长因子结合蛋白-1(Insulin-like growth factor bindingProtein IGFBP-1)是重要的内分泌激素之一。它的生物学作用及作用机制仍未完全阐明。我们根据 分子生物学、生物信息学理论,采用基因重组、酵母双杂交、细胞培养、CAM及鸡胚神经背根节培养等技术对IGFBP-1进行了系列研究。全文共分三个部分一、为了获取IGFBP-1基因和蛋白,本研究采用PCR方法,从人胎肝cDNA文库中成功钓取了IGFBP-1基因。并采用基因重组技术,构建了IGFBP-1融合表达载体,首次利用IGFBP-1与GST基因融合表达方式,实现了重组IGFBP-1在原核细胞中的高效表达,采用亲和层析法和凝血酶切割分离获得纯度达85%以上的重组IGFBP-1蛋白。二、为发现IGFBP-1可能的生物学作用及作用机制,首次采用酵母双杂交技术对IGFBP-1进行了研究。结  (本文共87页) 本文目录 | 阅读全文>>

《仲恺农业工程学院学报》2020年02期
仲恺农业工程学院学报

鹅HIF-1α基因克隆与组织表达分析

缺氧诱导因子-1(HIF-1)是在缺氧细胞中发现的一种转录因子,在生物体氧平衡调节中起关键作用.缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是HIF-1活化的关键调控因子,参与细胞的生长、分化和凋亡的调节.为进一步了解家鹅的缺氧应答系统,本研究参考NCBI上公布的鹅HIF-1α基因序列设计引物,并成功克隆了马岗鹅HIF-1α mRNA,获得...  (本文共6页) 阅读全文>>

《上海畜牧兽医通讯》2009年04期
上海畜牧兽医通讯

RACE技术在动物基因克隆中的应用

cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNAends,RACE)技术自出现以来,在动物基因...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国兽医学报》1990年10期
中国兽医学报

基因克隆的几种常用方法

基因(gene)是遗传物质的最基本单位,也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能,还是要改变某...  (本文共4页) 阅读全文>>

湖南师范大学
湖南师范大学

不同倍性鱼HPG轴生殖基因的表达及性别决定的机制研究

下丘脑—垂体—性腺(HPG)轴是鱼类体内重要的神经内分泌系统的调控轴。下丘脑分泌促性腺激素释放激素(GnRH),刺激脑垂体产生促黄体生成素(LH)和促卵泡激素(FSH),然后LH和FSH的受体被激活,作用于性腺性类固醇激素合成,促使性腺发育成熟、最终排出精子和卵子。本研究用基因克隆技术、Western Blot技术和RT-PCR技术,以二倍体红鲫、三倍体鱼、四倍体鲫鲤,二倍体团头鲂、三倍体鲫妨、四倍体鲫鲂等多倍体鱼为实验材料,首次对HPG轴中与生殖相关的基因GnRH2、LHβ和FSHβ的表达差异进行了比较研究,获得的主要研究结果如下:1.对不同倍性鲫鲤GnRH2核基因的内含子进行了克隆和序列分析。比较了这四种鱼GnRH2内含子序列之间存在的差异性和共同性,差异性表现在第二内含子序列的长度不同:鲤鱼是545bp,二倍体红鲫是422bp,三倍体鱼是837bp,四倍体鲫鲤是837bp;第三内含子序列的长度不同,鲤鱼是l10bp,二倍体...  (本文共132页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国林业科学研究院
中国林业科学研究院

林木谷氨酸脱羧酶(GAD)基因克隆及其催化产物GABA的调控功能

盐胁迫是一类重要的非生物胁迫因子,影响植物的生长和发育,甚至导致严重的生态环境问题。盐胁迫会引起植物各种生理变化和适应性反应,这些生理反应过程都需要通过植物细胞感知和传递信号分子,引起细胞内与胁迫相关基因的表达,最终参与调节和抵御盐胁迫对植物造成的伤害。在生理适应反应过程中,已经发现活性氧和植物激素参与胁迫信号调控和响应。谷氨酸脱羧酶(GAD)是生物体内广泛存在的一种酶,在盐胁迫下能迅速响应和发挥生理作用。GAD由GAD基因编码,能催化谷氨酸脱羧生成重要的四碳非蛋白质氨基酸小分子——γ-氨基丁酸(GABA),对调解细胞pH值、氮贮存、发育和碳的代谢以及抗逆分子信号调控等方面具有重要作用。过去对于GAD基因家族逆境下表达模式已经有了一定的研究,但是对于盐胁迫下GAD基因和GABA在分子水平与活性氧、激素等的信号物质共同参与抗逆信号调控机制需要进一步研究。本研究主要采用RACE技术首次克隆得到中间锦鸡儿(Caragana lioua...  (本文共158页) 本文目录 | 阅读全文>>